陈敏惠,陈于陇,李佳鸿,戴凡炜,陈飞平,王玲,戚英伟
(广东省农业科学院蚕业与农产品加工研究所,农业农村部功能食品重点实验室,广东省农产品加工重点实验室,广东广州 510610)
菠萝[Ananas comosus(Linn.) Merr]是一种主要产于(亚)热带国家的水果,占全球热带水果产量的20%以上,约2550万t[1]。菠萝富含维生素A、B1、B6和C,以及其他营养元素,如矿物质和膳食纤维[2],深受消费者喜爱。然而新鲜菠萝在食用时去皮麻烦,为食用方便,市场上推出了鲜切菠萝的新型售卖形式。菠萝在加工过程中会造成其一定程度上组织损伤,增加呼吸代谢过程,提高酶活性和细胞降解[3],即使在最适温度条件下,鲜切加工处理也会将菠萝货架期从1~2周降至仅1~3 d。此外,鲜切还为微生物的生长提供了有利的环境,导致微生物污染内部组织造成菠萝腐坏变质[4]。
鲜切菠萝最常见的传统保鲜方式主要是浸泡在盐水中,盐水可抑制微生物生长达到一定保鲜效果,然而这种方法保鲜时间短,达不到延长货架期的要求。此外,还有涂膜保鲜的方法,通过减少水分流失和果蔬组织与外界的接触,抑制其生理代谢紊乱来延长贮藏期[5]。目前最常用的可食用涂膜材料包括壳聚糖、淀粉、纤维素、海藻酸钠、角叉菜胶、玉米醇溶蛋白、乳清、脂肪酸[6]。然而,可食用涂膜在实际应用上也存在一些问题,例如亲水性较强的涂膜抗水能力差,在湿度较高的条件下可能会出现吸湿发黏的现象[7]。
气调保鲜技术是延长果蔬贮藏期的有效方法,该技术通过改变储存环境中气体的比例来抑制微生物的生长,延缓采后果蔬代谢速度,减少营养元素的消耗[8]。通过氩气、氮气的气调处理能抑制菠萝的呼吸代谢及乙烯合成,延缓菠萝褐变,延长了鲜切菠萝的货架期[9]。研究发现,通过低温结合复合气体环境包装鲜切菠萝,能有效抑制菠萝褐变和维生素C氧化,保持其良好的品质[10]。但以上处理需要配套的气调库等设备,应用成本高,不利于推广使用。自发气调包装袋是通过调节果蔬自身呼吸的气体与气调膜透过气体之间的平衡,使袋内气体成分保持最佳状态,在果蔬贮藏期起到自发气调和保湿透气的效果,更适用于研究鲜切菠萝的保鲜[11]。自发气调袋具有无毒、易操作、成本低、效果好等优点[12],其推广和使用在扩宽果蔬保鲜技术上尤为重要,然而,自发气调包装袋在鲜切菠萝贮藏保鲜的应用上却鲜有研究和报道。
本研究探究自发气调袋对鲜切菠萝贮藏期间品质变化的影响。以市售的菠萝常用包装袋(镀铝阴阳自封袋)为对照,采用实验室自主研发的自发气调保鲜袋,在低温条件下进行鲜切菠萝的贮藏保鲜实验,寻找简易但适用于鲜切菠萝贮藏的保鲜材料,延长鲜切菠萝贮藏期,为鲜切菠萝的冷链气调包装提供参考依据,解决菠萝产业在保鲜难题上困境。
菠萝,购于广州天河区五山水果市场,产地湛江,品种为“巴厘”。挑选开花后120 d左右,大小均匀,色泽相似,无病害破损的菠萝作为试验材料。洗净后用不锈钢刀去皮、去眼。先置于冰水混合物浸泡15 min预冷,再转移至3.5%(m/V)盐水浸泡5 min作保鲜处理,沥干水分后,分别用两种包装处理。对照组选用市售菠萝保鲜袋,即镀铝阴阳自立袋(材质为纯铝和PE膜,厚度20 μm,规格26 cm×38 cm);实验组采用研究室自主研发的改性聚乙烯保鲜袋,即MP20气调袋(厚度20 μm,水蒸气透过率62.58 g/(m2·d),O2渗透率11643 cm3/(m2·d·atm),规格26 cm×38 cm)。每袋包装2个菠萝,每组包装3袋,共24袋。贮藏在4 ℃低温条件下,每3 d取样一次,测量各项指标数据。
Checkmate9900型顶空气体分析仪,丹麦PBI公司;TA-XTPlus质构仪,英国StableMicroSystem公司;RFM340+糖度仪,英国Bellingham Stanley公司;CARYEclipse荧光分光光度计,美国VARIAN公司;GC-2010Plus气相色谱仪,日本岛津公司。
草酸、硼酸、维生素C标准品(纯度>99%)、三氯乙酸(分析纯),天津福晨化学试剂有限公司;无水乙酸钠、邻苯二胺(分析纯),天津市大茂化学试剂厂;硫代巴比妥酸(分析纯),源叶生物科技有限公司。
1.3.1 感官评价
感官评价采用闫静坤等[13]的方法,选择12名(6男,6女)成立测评小组,感官评定人员为年龄20~40岁身体健康、味觉正常人员。采用盲评的方式鉴赏菠萝,按色泽、香气、组织状态、风味为指标,进行感官评价,评分标准见表1。感官评分时,先以各指标的得分相加算出总评分,再取平均值。
表1 鲜切菠萝感官评价表Table 1 Sensory evaluation of fresh-cut pineapple
1.3.2 贮藏过程中微环境气体成分
参考于茂兰等[14]的方法,采用顶空气体分析仪测量袋内气体成分。在包装袋密封的环境下,将橡胶垫贴片纸贴于包装袋上,用取样针管扎透垫片贴,避免扎到菠萝,抽取袋内气体进行测量。每包样品在上中下三个位置各测三次。
1.3.3 果肉硬度的测定
参考Oms-oliu等[15]的方法,并稍作修改。用质构仪测定菠萝果肉硬度,探头型号为A/WEG,以1 mm/s的速度穿透5 mm,返回高度6 cm。结果表示为穿透过程中记录的最大力(N),硬度单位用g/cm2表示。
1.3.4 TSS和TA含量测定
参考巫梅婷等[16]的方法,并稍作修改。将菠萝果肉榨汁,细纱布过滤后收集汁液,4 ℃下5000 r/min离心10 min,收集上清液,低温保存备用。在数显糖酸度计检测镜面凹槽处滴加菠萝果肉汁液500 μL,按start读数并记录,即得TSS值。在此基础上吸取100 μL汁液,用纯水稀释50倍,再次读数并记录,得到菠萝的TA值。
1.3.5 维生素C含量测定
参考黄方志等[17]的方法,并稍作修改,采用荧光分光光度计测定维生素C含量,取1.3.5中收集的上清液0.5 mL,加入5 mL 2%(m/V)草酸和0.2 g活性炭,涡旋震荡均匀,离心取上清液。样品管为1 mL上清液加250 g/L乙酸钠溶液,对照管为1 mL上清液加30 g/L硼酸-250 g/L乙酸钠溶液,混合均匀,避光反应20 min,分别加入1 mL 0.2 g/L邻苯二胺溶液,混匀,避光反应40 min。激发波长355 nm,发射波长425 nm,测定荧光强度。
1.3.6 丙二醛含量测定
参考Zhang等[18]的方法,并稍作修改。取1.3.5中收集的上清液1 mL,加入5 mL 100 g/L TCA溶液,混合均匀。样品管取2 mL混液,对照管为2 mL 100 g/L TCA溶液,分别加入2 mL 0.67%(m/V)TBA溶液,混匀,沸水浴20 min,取出冷却后5000 r/min离心10 min,测定上清液在450、532、和600 nm波长处的吸光值。
1.3.7 乙醇含量测定
参照侯玉茹等[19]的方法,并稍作修改。顶空收集果蔬组织释放的乙醇气体,通过气相色谱柱分离后,测定乙醇含量。气相色谱配置为氢火焰离子化检测器FID和DB-FFAP填充柱,载气为N2。进样口温度220 ℃,柱温40 ℃,检测器FID检测器温度300 ℃。取1.3.5中收集的上清液5 mL,移入20 mL样品瓶中,密封后60 ℃保温1 h,顶空取1 mL气体,通过气相色谱仪测定。根据标准曲线,利用面积外标法,计算提取液中乙醇浓度。
除感官评价有12个重复外,其余数据均独立重复3次,结果以平均值±标准偏差显示。实验数据以Microsoft Office Excel 2010(美国微软公司),进行汇总,SPSS Statistics 22(美国IBM公司)进行进行单因素方差分析,利用Duncan’s多重比较进行显著性差异分析,采用Sigma Plot10.0(美国Systat公司)作图。
不同包装下的鲜切菠萝在4 ℃低温下贮藏,外观品质如图1a所示。随着贮藏时间的延长,对照组保鲜袋包装的鲜切菠萝在贮藏期间果肉色泽逐渐变深,在贮藏第9天出现了果肉弥散的现象,在第12天出现了部分自溶,而用MP20气调袋包装的菠萝果肉在整个贮藏期间均结构完整,色泽保持较好。
图1 不同包装对鲜切菠萝外观(a)和感官品质(b)的影响Fig.1 The appearance (a) and sensory changes (b) of fresh-cut pineapple treated with different packages
感官评价是反映鲜切菠萝品质最直观的指标,其硬度、口感、气味、果肉状态是影响菠萝商品质量的四个重要指标。感官品质测定满分为20分,按照表1进行评分,统计后作图。由图1b可以发现,随着贮藏时间的延长,菠萝感官评价得分持续下降。然而,采用MP20袋包装的实验组菠萝感官评分下降较为缓慢,在贮藏第9天时仍然有良好的感官品质,感官评价分为11.86分,其果肉状况较好,有一定抑制菠萝肉芽产生的作用,品尝后并未发现腐坏异味。这与朱佳佳[20]气调保鲜下贮藏鲜切菠萝9 d仍能保持良好的品质结果一致。而对照组保鲜袋包装的菠萝在贮藏9 d时感官评价分为9.29分,果肉外观色泽不佳,有些许乙醇异味,品尝后口感欠佳,只能保存6 d。在贮藏第12天时,实验组菠萝外观正常,仅有些许异味,而对照组菠萝外观有明显过熟表象,乙醇异味明显。这表明采用适宜的包装袋能很好地保持鲜切菠萝的颜色、组织状态、香气及风味。
测试包装内环境气体成分的变化情况能反应水果在贮藏期的呼吸状态,于此同时,水果的贮藏品质及生理代谢同样也受到包装内环境气体成分的影响[21]。如图2所示,在前9 d贮藏期间,普通包装袋O2含量逐渐下降,CO2含量逐渐升高,推测可能是菠萝在贮藏期间代谢旺盛,进行无氧呼吸产生CO2,导致CO2含量积累较快,在第9天CO2含量高达27.63%,O2含量仅为3.08%。实验组采用自发气调袋,使贮藏期菠萝的气体成分能持续的保持O2的透入和CO2的透出,使气调袋内O2含量维持12.31%,提供了菠萝有氧呼吸所需的O2,并排出多余CO2,CO2含量维持2.29%,避免了菠萝在缺氧环境下进行无氧呼吸产生乙醇等不良风味物质的积累。Wilson等[22]同样也认为调节保鲜膜气体渗透性和调节果蔬呼吸可以保持新鲜水果和蔬菜的质量和延长货架期。
图2 不同包装对鲜切菠萝包装环境内气体体积分数的影响Fig.2 Effect of different packaging on gas concentration in packaging environment of fresh-cut pineapple
测试鲜切水果硬度的变化情况能反应水果在贮藏期的新鲜程度及果肉状态[23]。如图3所示,随着贮藏时间的延长,鲜切菠萝的硬度呈现下降的趋势。果蔬经鲜切处理后,原完整结构受到破坏,增大组织生理代谢活动,呼吸作用增强,同时会促进内源乙烯的释放,加速果蔬衰老,影响果蔬硬度[24]。然而相比于对照组,实验组采用的自发气调袋包装缓解了鲜切菠萝硬度的下降趋势。这是由于采用MP20气调袋能自发调节O2和CO2气体平衡,结合低温环境能有效抑制菠萝果肉进行生理代谢,延缓其衰老,同时避免果肉因缺氧进行无氧呼吸产生乙醇伤害组织细胞,保持菠萝所含有的营养物质和水分流失,从而减缓果肉硬度的下降。在贮藏期间菠萝的硬度提高了10.14%,更有助于其保持其良好的物理性能、外观品质和口感。路贵龙等[25]探究气调袋对苹果贮藏品质的影响,与其研究结论类似,气调袋包装延缓了苹果硬度的下降。
图3 不同包装对鲜切菠萝硬度的影响Fig.3 Effects of different packaging on hardness of fresh-cut pineapple
可溶性固形物主要指可溶性糖(TSS)和可滴定酸(TA),是衡量果蔬贮藏和食用品质的重要指标,也是影响菠萝果实风味的重要因素[26]。如图4所示,鲜切菠萝在贮藏期间TSS含量随贮藏时间的延长,呈现下降的趋势,在贮藏12 d时对照组与实验组TSS含量分别为12.93%和13.53%,与贮藏初期相比分别下降了3.87%与3.27%。这可能是由于贮藏期间菠萝果肉生命代谢活动消耗许多营养物质,而气调贮藏处理可避免鲜切菠萝的无氧呼吸,进行有氧呼吸提供给菠萝更多的能量供其生命代谢活动,降低糖类物质的消耗速率,减少TSS的下降幅度。TA作为呼吸底物之一,在贮藏过程中不断消耗,同时TA会溶于水分,随水分的流失而下降。在贮藏前期菠萝TA含量基本维持稳定,在贮藏12 d时对照组与实验组TA含量分别为1.04和1.13 mg/L,与贮藏初期相比分别下降了18.86%与12.14%。实验组采用的自发气调袋包装均缓解了菠萝TSS和TA含量的下降,更有利于鲜切菠萝的贮藏。张凯等[27]研究自发气调袋贮藏对葡萄果实品质的影响,与该结论类似,可延缓葡萄TSS、TA含量的下降,具有较好的果实保鲜作用。
图4 不同包装对鲜切菠萝可溶性固形物和可滴定酸含量的影响Fig.4 Effects of different packaging on soluble solid content of fresh-cut pineapple
菠萝中的维生素C含量丰富,维生素C对清除自由基、保护和维持黄酮、多酚等物质的还原状态起着关键作用[28],但其性质很不稳定,容易被氧化,菠萝经加工后,失去果皮保护,组织结构被破坏,所以在鲜切菠萝的贮藏过程中,维生素C会逐渐流失。从图5中可看出,对照组维生素C含量呈现大幅下降的趋势,贮藏至第12天时与贮藏初期相比下降了34.16%。经气调袋包装的菠萝,能自发调节菠萝的呼吸速率至合适的范围,避免细胞无氧呼吸,同时抑制各项生理生化反应,减少了维生素C氧化和流失,第12天时维生素C含量是对照组的1.19倍,与贮藏初期相比仅下降了21.77%。气调贮藏可减缓鲜切菠萝维生素C的降解速率,减少氧化反应造成降低菠萝的氧化能力,提高鲜切菠萝果实新鲜度。方宗壮等[29]采用真空包装处理鲜切菠萝同样也能减少维生素C的氧化和流失。
图5 不同包装对鲜切菠萝维生素C含量的影响Fig.5 Effects of different packaging on vitamin C content of fresh-cut pineapple
丙二醛作为膜脂过氧化的产物之一,其含量常用来表示果蔬衰老或冷害过程中细胞膜的膜脂过氧化程度和逆境伤害程度[30]。从图6可以看出,随着贮藏时间的增加,对照组菠萝果肉的丙二醛含量总体变化呈现上升的趋势,显著高于实验组,对照组MDA含量为3.52 μmol/g,与贮藏初期相比上升了0.69 μmol/g。采用自发气调包装袋包装能抑制菠萝果肉丙二醛含量的上升,尤其是在贮藏后期,仍能保持一个较低的水平,贮藏至第12天时气调组菠萝果肉MDA含量为2.99 μmol/g,与贮藏初期相比仅上升0.15 μmol/g,说明自发气调贮藏处理可有效减缓鲜切菠萝的膜脂过氧化。此外,在其他水果上也发现,气调贮藏可以降低果实丙二醛的积累,防止了细胞膜结构的损伤,例如猕猴桃[31]、杨梅[32]等。
图6 不同包装对鲜切菠萝丙二醛含量的影响Fig.6 Effects of different packaging on malondialdehyde content of fresh-cut pineapple
乙醇是菠萝天然香味化合物成分之一,在菠萝的贮藏和后熟过程中由于自身呼吸作用使乙醇有不同程度的积累,然而,乙醇的累积会伤害菠萝组织细胞,导致果肉生理代谢紊乱,产生乙醇异味及褐变现象,加剧果肉腐烂,严重影响其风味和品质[33]。因此,乙醇含量的测定评价鲜切菠萝贮藏期间品质的重要指标之一。
如图7所示,随着贮藏时间的增加,贮藏的菠萝不断进行呼吸作用产生乙醇。对照组在0~6 d的贮藏期时乙醇含量缓慢升高,在6~12 d时乙醇含量迅速增加,在贮藏12 d时达到了615.9 μg/g,有明显的乙醇异味。采用自发气调袋包装的鲜切菠萝乙醇含量在贮藏期间均能维持在低浓度的含量,在贮藏12 d时仅有120.7 μg/g,远低于对照组,且没有乙醇异味,说明采用自发气调袋包装鲜切菠萝能预防菠萝在贮藏期间无氧呼吸产生乙醇,影响品质变化。张文江等[34]探究气调处理贮藏蓝莓果实,同样也能抑制乙醇含量的升高,并可较好地保持蓝莓原有风味。
图7 不同包装对鲜切菠萝乙醇含量的影响Fig.7 Effects of different packaging on ethanol content of fresh-cut pineapple
根据研究结果表明,采用低温自发气调袋包装鲜切菠萝可确保在贮藏期前9 d仍然有良好的感官品质,而市售的保鲜袋仅能保鲜6 d。与普通包装袋低O2,高CO2的袋内微环境相比,气调袋内O2体积分数能维持鲜切菠萝正常生理代谢消耗,并排除多余CO2。在贮藏后期,普通袋包装菠萝产生酒精及过量CO2,出现异味,而自发气调保鲜袋能维持鲜切菠萝的硬度,减缓了菠萝维生素C、可溶性固形物等营养物质的在贮藏期间的损失,抑制了丙二醛含量和乙醇含量的上升,有效减缓了鲜切菠萝的膜脂过氧化和抑制菠萝果肉无氧呼吸产生酒精。
今后,研究室将会致力于鲜切果蔬的保鲜研究,探索更多适用于果蔬保鲜的气调包装材料和保鲜技术,为农产品贮藏、运输、销售等环节保驾护航。