青海省互助县一起绵羊弓形虫病疫情的调查报告

马元莲,蔡相银,王文勇,刘淑霞

(青海省互助县动物疫病预防控制中心,青海 互助 810500)

弓形虫是一种在世界范围内流行的人兽共患寄生虫,主要以猫科动物为终末宿主,可以感染多种温血动物。弓形虫病是由刚第弓形虫(Toxoplasmagondii)引起的一种人畜共患寄生虫病,可使孕畜流产或产死胎[1],急性弓形虫病还可造成家畜死亡。孕妇感染弓形虫后可引起流产、胎儿畸形或产出弱智儿。

据互助县丹麻镇岔尔沟门村一农户反映,自家放牧饲养的母羊发生流产,流产发生在妊娠期后期,约生产前1个月以内,产下的弱羔在出生后不久即死亡。母羊在流产前未见明显征兆,流产后未经治疗也能恢复健康。据了解,该农户曾于2021年12月从本县东山乡大泉村引进12只母羊。为查明母羊发病原因,制定防控措施,笔者在2022年1月对此次疫情开展了回顾性调查,通过现场查看、采样、实验室检测和流行病学分析等方法,对此次疫情进行了流行病学调查。

1 材料与方法

1.1 调查方法与样本采集

1.1.1调查方法 2022年1月底,到疫情所在地互助县丹麻镇岔尔沟门村及与流行病学关联的东山乡大泉村,开展了现场流行病学调查和实验室检测。通过访谈了解牧户养殖的基本情况和疫病发生的具体经过,同时对农户的羊群圈舍和放牧草场进行了现场勘察、采样。

1.1.2样本采集 在丹麻镇岔尔沟门村及东山乡大泉村的羊群中采集了44份曾发生流产或产弱羔的母羊血清、5份未发病但疑似感染的种公羊血清。

1.1.3实验室诊断 对采集的血清分别开展布鲁氏杆菌、衣原体和弓形虫抗体检测。

1.1.3.1检测方法及试剂 布鲁氏杆菌病采用虎红平板凝集试验(RBT)和试管凝集试验(SAT)(布鲁氏杆菌虎红平板凝集试验抗原批号为10012102,布鲁氏杆菌病试管凝集试验抗原批号为20210920,均购自青岛立见生物科技有限公司);衣原体和弓形虫病用间接血凝试剂盒(IHA)检测(衣原体抗原批号为20211029204;弓形体抗原,标准阴、阳性血清批号为20210910504);所用抗原,标准阴、阳性血清、稀释液均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。检测过程严格按说明书进行操作。

1.1.3.2器械 检测用96孔V型聚乙烯板;10～100 μL单道移液器;微量振荡器;生化培养箱等。

1.1.3.3结果判定 布鲁氏杆菌病出现凝集反应者判为阳性,不出现凝集反应者为阴性;衣原体病对照各孔均成立,则被检血清滴度不低于1∶16(第2孔)出现“++”为阳性,被检血清滴度低于1∶4(第2孔)出现“+”以下者为阴性,被检血清滴度在1∶4～1∶16之间判为可疑;弓形虫病在阳性对照血清效价不低于1∶1 024,阴性对照血清第 1 孔允许存在前滞现象(+),其余各孔均为“-”,稀释对照孔为“-”的前提下,被检血清抗体滴度达到或者超过1∶64判为阳性,“++”为阳性终点。

2 结果与分析

2.1 现场流行病学调查结果

2.1.1养殖情况 互助县丹麻镇岔尔沟门村地处E 102°25′8″、N 36°42′57″,海拔为2 500 m,东山乡大泉村地处E 101°58′15″、N 36°43′42″,海拔为2 800 m。两个村的农户饲养的牲畜主要是小尾寒羊和半细毛杂种羊,每户养殖数量为10～500只不等,部分农户还饲养少量牦牛和黄牛。每户的饲养模式基本相同,每年5月底到10月初在夏季高山草场放牧,其余时间以圈养为主。

2.1.2疫病防控 该区域所有羊群每年由县动物疫控中心进行至少1次布病抽样检测,羊群寄生虫病比较常见,主要感染或寄生肺线虫、肝片吸虫和羊鼻蝇等,农户通常投喂丙硫咪唑片、阿苯达唑和伊维菌素等药物进行治疗和预防。对羊群进行免疫的疫苗有羊四联疫苗、小反刍兽疫疫苗、口蹄疫疫苗和羊痘疫苗。

2.1.3疫情描述 丹麻镇岔尔沟门村发生疫情的农户共存栏羊86只,其中母羊32只。发病的12只母羊中初产母羊3只,流产母羊9只,均在正常生产前1个月内流产、产死胎或足月产下弱羔,弱羔在出生后数天内死亡。农户自述曾于2021年底从本县东山乡大泉村购入12只绵羊。东山乡大泉村售羊农户存栏羊92只,其中母羊50只,36只怀孕母羊发生流产和产死胎,流产母羊多为经产母羊,产下大量弱羔,母羊流产率约为72%。经调查,售羊农户于2020年从民和县购入34只母羊,母羊在流产前无明显征兆,流产后饮食和表现与其他正常生产的母羊没有明显区别,因此未进行治疗。流产胎儿及胎衣等流产物和死亡的弱羔掩埋在远离圈舍处,埋葬前未进行无害化处理,也未对圈舍进行彻底的消毒处理。此前该售羊农户及同村其他农户所饲养的羊群从未发生过类似状况。

2.2 临床及实验室诊断

2.2.1临床特征 临床主要表现为怀孕母羊在正常分娩前4～6周发生无征兆流产或足月产下死胎或弱羔,弱羔在出生不久后死亡。这与布鲁氏杆菌、流产衣原体及弓形体感染引起母羊流产的临床特征相似。

2.2.2血清学监测 采用衣原体IHA试剂盒检测衣原体抗体、虎红平板凝集试验和试管凝集试验检测布鲁氏杆菌抗体,详见表1。

表1 血清学抗体检测表

2.2.3风险因素 经调查,该养殖户在引种前自家羊群没有发病史,而引种地区曾发生过弓形虫疫情,但该农户在引进羊只时未进行弓形虫病检疫,引进后羊群出现零星发病时未对病羊进行检疫和治疗,更没有对流产物和圈舍进行无害化处理和消毒,这些都可能是弓形虫病发病的主要风险因素。

3 讨论

近年来互助县牛、羊流产疫情多发,通常由布鲁氏杆菌、流产衣原体或弓形体感染引起,严重影响了当地畜牧业的健康发展。布鲁氏杆菌、流产衣原体和弓形体具有相同的宿主谱,均可感染绵羊等多种家畜,其临床症状也比较相似,一般无明显症状,感染家畜可长期带毒,感染母畜会在分娩前发生流产。此外,这3种病原也都是人兽共患病病原,除影响养殖业的发展外,还威胁着人类的健康。据王文勇等[2]报道,近年互助县部分规模养殖场羊衣原体病的感染率和发病率有上升的趋势,衣原体感染率达到了31%,而弓形体和布鲁氏杆菌感染率为0。据邢东阳等[3]报道,青海省部分地区藏羊弓形虫血清抗体阳性率介于0～6%之间,刚察县、门源县、泽库县、乌兰县、海晏县和大通县都曾检测出藏羊弓形虫阳性样品,在野生动物中也有阳性检出,表明存在自然疫源性感染风险。据陈至柔[4]报道,从动物粪便中可检测出弓形虫存在的情况,感染率最高的羊群阳性率高达17.8%。本次调查在养殖户羊群中检测出弓形体感染阳性病例,且阳性率高达65.3%,表明调查的发病羊群流产的主要原因为弓形虫感染。弓形虫病可使孕畜发生流产或产死胎,急性弓形虫病可造成家畜死亡,不仅对动物的健康构成了极大的威胁,而且给养殖业造成了一定的经济损失。因此,建议广大养殖户做好羊舍卫生工作,定期消毒;饲草、饲料和饮水严禁被猫的排泄物污染,同时避免羊只吞食猫、狗的粪便;对羊的流产胎儿及其他排泄物要进行无害化处理,养殖场地也应严格消毒;对死于本病或疑似死于本病的畜尸要进行严格处理,以防污染环境或被猫及其他动物吞食;对个别发病家畜可采用磺胺类药物和抗菌增效剂进行针对性治疗。动物疫病预防控制机构应制定监测计划,对重点区域和养殖场户开展定期检测,全面掌握监测数据,有针对性地开展防治工作。