一例草鱼水霉菌与指环虫混合感染的诊断与治疗

黎 英，王文成

(1.铜仁市碧江区农业农村局，贵州 铜仁 554300；2.铜仁市碧江区川硐农业服务中心，贵州 铜仁 554300)

草鱼水霉病又称为白毛病，其病原主要为水霉菌。该病一旦发生在鱼群中传播速率极快，可导致病鱼体表鳞片脱落，病变部位出现棉絮状白色菌丝，继而引起组织发炎等症状且死亡率高。指环虫是一种鱼养殖过程中十分常见的寄生虫。该病原主要寄生于鱼的鳃部，可导致病鱼消瘦、鳃丝分泌过多黏液而呼吸困难和继发感染其他病原，继而导致较高的死亡率，给养殖户造成巨大的经济损失。

铜仁市渔业资源丰富，近年来该地区养鱼业发展迅速，越来越多农户通过养鱼实现小康，但随着养殖密度的提高和养殖模式的改变，鱼在养殖过程中发生多种病原混合感染较为常见，给疾病诊断和防治带来巨大的困难，继而造成严重的经济损失。2022年8月初，铜仁市碧江区某渔场养殖的草鱼群发生疫病，且导致较高的病死率，经过诊断确定该场鱼群发病是水霉菌和指环虫混合感染引起。根据诊断结果采取了系列防治措施，最终使疫情得到有效控制。

一、发病情况

该农户拥有鱼塘约8 亩，已从事草鱼养殖约6 年，池塘水深为2 米左右，水源为附近河流水。2022年4月初外购草鱼种苗约400千克，引入种苗后有部分鱼苗出现疑似水霉病症状，将种苗进行消毒后饲养，仅极少数鱼苗死亡，遂未引起该农户的重视。2022 年8 月初，部分草鱼出现活动迟缓、呼吸困难，对外界刺激反应迟钝等现象，且部分发病鱼群表面出现白色絮状物质且鱼鳞脱落等。渔场负责人向池塘喷洒聚维碘酮溶液进行消毒，但治疗效果较差，且每天均有病鱼死亡。

二、临床症状及病理变化

观察濒临死亡病鱼临床症状，可见病鱼头部有类似霉变的白色絮状物，手按病处可感受到肌肉无力；病鱼表面无光泽，且鱼鳃处黏液较多，鳃丝有大量出血或充血点。剖检病鱼可见病变部位主要集中于鱼鳃部和表皮，内部器官病变较少或不明显。

三、实验室诊断

1.细菌分离试验

为确定该场鱼群发病是否由细菌性病原感染引起，于是采集病鱼鳃部组织、黏液、水霉、部分组织器官样品(如肝脏和肠组织)放入离心管内，加入适量灭菌PBS溶液后匀浆。离心管静置后用灭菌接种环蘸取少量上清分别在鲜血琼脂培养基和普通琼脂培养基表面进行平板划线，将平板置于37℃恒温箱内培养24 小时后观察表面是否出现疑似菌落。结果发现，两种平板表面均未出现疑似菌落，提示该场草鱼发病不是由细菌性病原感染引起。

2.寄生虫检测

为探究该场鱼群发病是否由寄生虫感染所导致，于是采集病鱼鳃部组织及黏液样品与少量生理盐水混匀。用移液器吸取少量上清滴加在载玻片上，放置于光学显微镜下观察是否有疑似寄生虫或虫卵(卵囊)等，并根据其形态学特征进行初步鉴定。结果在显微镜下可见大量扁平呈柳叶状虫体，其后吸器在体后端，可见较明显的边缘小钩等。根据虫体形态学特征可将其鉴定为指环虫。笔者还采集了病原肠组织内容物和肝脏等，采用水洗沉淀法和饱和盐水漂浮法分别对样品处理后检测是否存在寄生虫虫卵或卵囊，发现未见疑似虫卵和卵囊。

3.草鱼水霉病的病原检测

由于细菌分离和寄生虫检测均不能确定草鱼水霉病的致病原，笔者建议该场负责人将病鱼送至专业的病原分子诊断实验室进行检测。该诊断实验室工作人员通过PCR 技术扩增了水霉病原ITS基因部分序列，其后将PCR产物测序后进行序列比对，最终确定导致草鱼水霉病的致病原为寄生水霉菌。

四、诊断结果

根据该场病鱼临床特征、病情变化结合实验室诊断结果，可判定由水霉菌和指环虫混合感染引起的草鱼发病。

1.主要防治措施

系列诊断结果表明，该场发病是由水霉菌和指环虫混合感染所引起，故笔者建议渔场负责人对两种病原采取针对性治疗。

2.指环虫的治疗措施

采取“先杀虫、再杀菌”的策略，首先针对指环虫病进行了治疗。将“指环清”兑水稀释(100 克/亩)后向池塘均匀喷洒，并开增氧机提高水中溶氧；在饲料中添加恩诺沙星和电解多维，防止鱼群继发感染其他细菌性病原，且提高免疫力。注意拌喂之前需停止饲喂1天，使鱼群处于半饥饿状态，提高鱼对拌喂饲料的采食量。此外，还引入了部分活水，并向池塘中喷洒消毒剂进行消毒。

3.水霉病的治疗措施

对于水霉菌感染引起的水霉病，由于已有部分发病鱼群表面出现明显症状，霉菌已入侵病鱼组织中，依靠传统水上泼洒药物治疗效果可能较差。在实施针对指环虫病治疗措施3天后，该场负责人将全场鱼群打捞上来，并无害化处理部分发病严重鱼群，将其他鱼群浸泡于高浓度的高锰酸钾溶液中20 分钟后放入池塘；为防止有部分病鱼未打捞上来和进一步巩固治疗效果，向池塘中泼洒了生石灰(70千克/亩)进行水体消毒；两周后向水中再次泼洒复方中草药制剂粉末(主要成分为金银花、菊花、苦参和黄柏等)对水体进行持续性消毒，提高鱼群抵抗力。

4.治疗结果

实施针对指环虫病治疗措施3天后，出现呼吸困难的鱼群明显减少，且死亡鱼也明显减少；对鱼群进行高锰酸钾溶液“洗浴”后2天，病鱼体表“白毛”现象明显减少，显示对水霉病治疗效果较好，两周后鱼群基本恢复健康，采食量恢复至正常水平，鱼群未出现疑似水霉病和呼吸困难等症状。

五、讨论

近年来，水产动物(如草鱼和鲩鱼等)集约化养殖模式在国内部分地区较为常见，高密度养殖容易导致养殖环境恶化，鱼群免疫力下降导致病原感染，如2015 年江西省水产养殖因病原感染造成的经济损失超过5亿元，因此经济鱼病原感染给水产养殖业造成巨大的经济损失。本文通过系列诊断措施确定了碧江区某草鱼群发生疫病是由水霉菌和指环虫混合感染引起，根据诊断结果立即采取了相应的防治措施，使疫情得到有效控制，减少了养殖户的经济损失。

草鱼水霉病也称为肤霉病，其病原属于真菌，且可导致水霉病的真菌有多种，其中最为常见的真菌是绵霉菌和水霉菌。水霉病四季可发，其病原可感染不同品种和不同发育阶段的鱼(包括鱼卵、幼鱼和成鱼)。水霉菌孢子在水体中广泛存在，高密度鱼群在养殖或运输过程中容易受伤，水霉菌孢子可通过伤口入侵鱼体，在受伤组织处繁殖且吸收营养，造成组织发炎甚至病鱼死亡。因此，在鱼群运输、拉网和饲养过程中应尽量减少鱼体受伤，且运输或拉网鱼群下塘前需要进行消毒处理，如高浓度高锰酸钾或聚维酮碘溶液洗浴消毒等，以降低感染水霉病的风险。

指环虫是一种水产养殖中十分常见的寄生虫，该病原主要寄生于鱼鳃部，刺激鱼鳃分泌黏液，且寄生虫可破坏鱼鳃组织，不但引起鱼呼吸困难，还可继发感染其他病原，导致鱼较高的死亡率。对于指环虫病的防控，在引种前需对种苗进行病原检测，做好池塘和种苗消毒工作等，给予鱼群优质的品牌饲料，提高鱼群免疫力，降低指环虫病感染概率。对于该病的治疗可采用优质驱虫药，但驱虫药对指环虫卵杀灭效果差，需对鱼群进行多次用药，但也需要注意穿梭用药，以免指环虫出现耐药性。