乌苯美司对D组慢性阻塞性肺疾病急性加重期患者Th17/Treg平衡的影响*

钱 红 张小梅 周美玲 贺兼斌 周 言 张 畔 刘理静

1 长沙民政职业技术学院,湖南省长沙市 410004; 2 怀化市第一人民医院呼吸与危重症医学科

慢性阻塞性肺疾病(COPD)是以持续呼吸道症状和气流受限为特征的慢性炎症性肺病,常呈进行性发展,极大危害人民生命健康[1]。COPD急性加重期(AECOPD)可造成肺功能进一步损毁,诱发呼吸衰竭,加速疾病进展,增加死亡率[2]。D组患者急性加重频率高,病情大多严重,肺功能减退显著,治疗难度大,预后不佳,故积极寻求D组AECOPD患者的有效防治措施具有重要临床意义。研究表明辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)失衡所致的免疫功能紊乱及过度炎症反应在AECOPD发生发展中起重要作用,以免疫失衡致病机制中Th17/Treg为切入点开发靶向治疗新药已成为防治D组AECOPD的新策略。乌苯美司为细胞表面分子CD13抑制剂,具有抗癌和免疫调节的双重药理学效用[3]。近年研究发现其可改善机体免疫功能,促进AECOPD患者肺功能恢复[4]。然而,乌苯美司是否通过调节Th17/Treg平衡和细胞因子表达而起作用,尚无相关报道。本研究旨在探讨乌苯美司能否通过提高免疫功能和抑制炎症反应改善D组 AECOPD 患者的治疗和预后,现报道如下。

1 资料与方法

1.1 临床资料 选取2019年10月—2021年3月怀化市第一人民医院收治的80例D组AECOPD患者,采用随机数字表法将其分为对照组和干预组,各40例。对照组男29例,女11例;平均年龄(67.85±5.16)岁;平均病程(14.98±3.65)年;平均体质量指数(22.42±2.33)kg/m2;有吸烟史33例,无吸烟史7例。干预组男31例,女9例;平均年龄(68.08±5.41)岁;平均病程(15.43± 4.06)年;平均体质量指数(22.69±2.51)kg/m2;有吸烟史31例,无吸烟史9例。两组临床资料相近(P>0.05)。本研究经过医院伦理委员会审批(批件号:快KY-2019030801),入组患者及家属均知情并自愿签署知情同意书。

1.2 选择标准 纳入标准:(1)符合《慢性阻塞性肺疾病急性加重(AECOPD)诊治中国专家共识(2017年更新版)》中AECOPD诊断标准[5];(2)上一年急性加重次数≥2次,且改良版英国医学研究委员会呼吸困难问卷(mMRC)分级≥2级或COPD 评估测试(CAT)评分≥10分;(3)发病至入院就诊时间不超过1周。排除标准:(1)对试验拟用药物存在禁忌证者;(2)合并其他呼吸系统疾病(肺结核、支气管扩张等);(3)合并全身严重感染;(4)合并严重心、肝、肾功能障碍;(5)合并糖尿病、血液病、免疫系统疾病;(6)合并恶性肿瘤;(7)近3个月使用过免疫抑制剂、免疫调节剂、全身糖皮质激素治疗。

1.3 治疗方法

1.3.1 对照组患者长期给予低浓度吸氧、静滴抗菌药物抗感染、解痉平喘、祛痰止咳、维持水电解质及酸碱平衡等常规对症治疗。并规律吸入沙美特罗替卡松粉雾剂(英国葛兰素史克公司,进口药品注册证号:H20150325,规格:50μg/500μg/吸),1吸/次,2次/d,噻托溴铵粉吸入剂(英国勃林格殷格翰公司,进口药品注册证号:H20140954,规格:18μg/粒),1粒/次,1次/d,进行支气管扩张治疗。

1.3.2 干预组则在对照组基础上加用乌苯美司胶囊(成都宛东生物制药股份有限公司,国药准字H20094031,规格:10mg/粒)口服治疗,10mg/次,3次/d,连续使用12周。

1.4 观察指标 (1)住院时间:记录并比较两组患者住院时间。(2)肺功能指标:使用肺功能仪(德国JAEGER公司)分别测定两组患者治疗前、治疗12周后次日的第1秒用力呼气容积(FEV1)、FEV1占预计值的百分比(FEV1%)、FEV1/用力肺活量(FVC),并进行比较。(3)免疫功能指标:治疗前、治疗12周后次日分别抽取两组患者清晨空腹肘静脉血10ml,均分成2份,其中1份血液标本使用流式细胞仪(美国BD公司)测定Th17、Treg细胞水平,计算Th17/Treg后进行比较。(4)细胞因子水平:将第二份血液标本以3 000r/min离心15min,提取上层血清后,置入-80℃冰箱低温保存,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法测定血清中白细胞介素(IL)-17A、IL-10水平并进行比较。(5)不良反应:观察并比较两组患者治疗期间恶心呕吐、腹泻、皮疹、头痛、头晕等不良反应发生情况。(6)急性加重和再住院次数:门诊和电话随访两组患者共计12个月,统计并比较两组急性加重次数和再住院次数。

2 结果

2.1 两组患者住院时间比较 干预组患者平均住院时间为(8.15±1.59)d,短于对照组的(10.58±1.82)d,差异有统计学意义(t=6.331,P=0.000)。

2.2 两组患者肺功能指标比较 治疗前,两组患者FEV1、FEV1%、FEV1/FVC相比无显著差异(P>0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者FEV1、FEV1%、FEV1/FVC均显著上升,且干预组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表1。

表1 两组患者肺功能指标比较

2.3 两组患者免疫功能指标比较 治疗前,两组患者外周血Th17细胞、Treg细胞、Th17/Treg比值相比差异无统计学意义(P>0.05)。与治疗前比较,治疗后两组患者Treg细胞水平升高,Th17细胞水平、Th17/Treg比值均降低,但干预组上述指标改善程度优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表2。

表2 两组患者免疫功能指标比较

2.4 两组患者细胞因子水平比较 治疗前,两组患者外周血IL-17A、IL-10水平相比无显著差异(P>0.05)。与治疗前相比,治疗后,两组患者IL-17A水平降低,IL-10水平升高,且干预组上述指标改善程度均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表3。

表3 两组患者细胞因子水平比较

2.5 两组患者不良反应情况比较 两组不良反应总发生率比较,差异无统计学意义(χ2=0.738,P=0.390>0.05)。见表4。

表4 两组患者不良反应发生情况比较[n(%)]

2.6 两组患者随访12个月内急性加重次数和再住院次数比较 干预组患者随访12个月内急性加重次数和再住院次数均少于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),见表5。

表5 两组患者随访12个月内急性加重次数和再住院次数比较次)

3 讨论

COPD是一种由中性粒细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞等多种炎症细胞参与的慢性气道炎症性病变,与长期接触香烟烟雾等有害气体或颗粒物质有关,可导致气道和(或)肺泡异常破坏,引起持续性气流阻塞,造成肺功能进行性受损,其发病率和死亡率较高,已成为全球第三大死因疾病。AECOPD是COPD病程中的严重阶段,患者免疫功能低下,气道炎症反应加重,黏膜分泌物持续增加,堵塞小气道,进一步加剧炎症反应,引起肺功能恶化,导致患者生活能力丧失,甚至死亡,增加了家庭及社会经济负担,特别是D组AECOPD患者尤为显著。因此,积极预防和减少D组AECOPD的发生是延缓患者肺功能下降、提高生活质量和延长生存期的关键措施。乌苯美司是从橄榄网状链霉菌培养液中分离所得的一种氨肽酶N(APN)抑制剂,通过竞争性抑制APN活性而提高T、B淋巴细胞功能及增强自然杀伤细胞的杀伤活力,同时还可增加集落刺激因子合成,促进骨髓细胞再生及分化,从而起到调节、增强和恢复机体免疫功能的生物学功效[3],已被应用于多种恶性肿瘤的临床治疗。研究发现,乌苯美司辅助治疗能提高AECOPD患者临床疗效,改善肺功能,利于控制病情。本研究结果显示,治疗后与对照组比较,干预组患者的住院时长显著缩短,FEV1、FEV1%、FEV1/FVC明显提升,急性加重次数及再住院次数减少,且不良反应少,安全耐受性良好,与文献报道相一致[4],这表明乌苯美司对D组AECOPD患者具有良好的治疗效果,能缩短病程,明显改善肺通气功能,并有效减少及预防病情的急性加重再发作。

T淋巴细胞分泌和表达失衡介导的异常免疫应答是导致AECOPD的重要发病机制。Th17和Treg细胞是CD4+T细胞的两个亚群,Th17通过分泌促炎因子IL-17A,促进T细胞增殖,诱导中性粒细胞聚集、活化、迁移到炎症部位,释放多种炎性介质,作用于气道黏液腺分泌过多黏液,引起气道反应性增高,进一步导致肺组织弹性改变和气道重塑, 加速COPD的进展。Treg通过释放抑炎因子IL-10和转化生长因子-β,抑制T细胞增殖和活化,阻止促炎细胞因子和趋化因子分泌,减少抗体产生而拮抗气道炎症反应,缓解COPD的病情,发挥免疫负调节作用。在正常状态下,Th17 和 Treg 细胞介导的促炎与抗炎免疫反应之间处于动态平衡,以保持机体免疫稳态。当二者平衡遭受破坏,可发生机体免疫调节失衡,导致自身异常免疫反应。研究表明,AECOPD患者机体免疫功能紊乱,体内炎症反应加剧,外周血Th17及其释放的IL-17A水平升高,而Treg及其分泌的IL-10表达下降,Th17/Treg比值明显增高,且与炎症反应状态和肺功能下降程度呈正相关[6]。提示恢复Th17/Treg平衡以及调节炎症因子表达是有效防治AECOPD的重要靶点。研究显示,苏黄止咳胶囊可经调节Th17/Treg 平衡提高机体免疫功能,减轻AECOPD患者病情[7]。为了进一步明确乌苯美司有效治疗D组AECOPD是否与调节Th17/Treg平衡及细胞因子表达有关,本研究检测了外周血中Th17、Treg细胞和IL-17A、IL-10表达,结果发现,治疗后与对照组相比,干预组患者外周血Treg细胞、IL-10表达水平均升高,Th17细胞、Th17/Treg比值、IL-17A表达水平均降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。说明乌苯美司能有效纠正患者的Th17/Treg免疫失衡,减少促炎因子IL-17A表达,增加抑炎因子IL-10分泌,从而减轻气道炎症反应,促进疾病恢复。

综上所述,乌苯美司能有效改善AECOPD患者机体免疫功能,减轻炎症反应,促进肺功能恢复,从而缩短住院时间,减少急性加重和再住院次数,安全性高,在临床上有推广应用价值。