肺癌组织与血液中DHX32的表达水平及临床意义

王友祥 尹向飞 梁小亮

（厦门医学院附属第二医院医学检验科，福建 厦门 361021）

探索实体肿瘤中DHX32表达情况，分析DHX32在癌旁组织、肺癌中的表达、变化情况。和正常细胞相比，结肠癌细胞中的DHX32表达更高。研究发现，以结肠癌细胞为对象，发现干扰DHX32能对癌细胞增殖产生阻碍，同时可以提升癌细胞对5-FU等化疗药物的敏感性[1]。DHX32可以对β-catenin泛素化产生抑制，促使其稳定性提升，基于转录层面，可以提升VEGFA含量，宿主内皮细胞结构逐渐过渡到肿瘤，形成微血管。DHX32b初次见于白血病细胞，在DHX32序列中其属于第四外显子。医学家在肝癌细胞中第一次检测出DHX32剪切异构体[2]。DHX32于肝癌组织中的表达情况直接影响癌细胞转移和肝癌分期，DHX32高表达意味着肝癌转移率更高，但关于其在肺癌血液、组织中的研究很少。本次研究以肺癌患者为对象，分析患者肺癌组织、血液中DHX32的表达情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2020年8月至2021年10月厦门医学院附属第二医院99例肺癌患者（肺癌组），28例肺良性结节患者（肺良性结节组）、100例健康体检人群（健康体检人群组）开展研究。肺癌组中有4例为小细胞癌，有74例为腺癌，有17例为鳞癌，有3例为神经内分泌癌，有1例未明确类型；男61例，女38例；平均年龄（59.35±5.40）岁。肺良性结节组男13例，女15例；平均年龄（58.11±5.71）岁。健康体检人群组有男57例，女43例；平均年龄（58.46±5.34）岁。3组的性别、年龄资料比较无统计学差异（P＞0.05），具有可比性。本研究已获得我院伦理委员会的批准。

纳入标准：①肺癌组、良性结节组均经手术病理确诊。②均具有完整资料。③患者知情同意本次研究。

排除标准：①肺部以外的良恶性肿瘤，伴有血液疾病。②心脏、肾脏伴有严重器质性疾病。③有精神疾病。

1.2 方法 以前期研究作为基础，借助DHX32多克隆抗体、DHX32单克隆抗体8H3A、17D8（包括剪接体和全长），于细胞、组织水平，研究肺癌中DHX32表达情况。采用免疫组织化学法测量肺癌组和肺良性结节组肺组织中的DHX32（包括DHX32a和DHX32b）；借助ELISA方法测量3组血清中的DHX32（包括DHX32a和DHX32b）；经由化学发光法或电化学法检验3组血清中的CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC和ProGRP，分析DHX32等指标在3组研究对象的结果，探讨临床意义。

1.3 观察指标 评价肺不同性质组织中的DHX32表达（包括DHX32a和DHX32b）。评价3组血清中的DHX32表达（包括DHX32a和DHX32b）。评价3组血清中的相关指标检验结果（包括CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC和ProGRP）。

1.4 统计学方法 采用SPSS 23.0处理数据，计量资料用（）表示，行t检验，P＜0.05，表述差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组肺部不同性质组织中的DHX32表达比较 肺癌组组织中的DHX32a和DHX32b均高于肺良性结节组（P＜0.05）。见表1。

表1 两组肺部不同性质组织中的DHX32表达比较（）

表1 两组肺部不同性质组织中的DHX32表达比较（）

2.2 3组肺部不同性质血清中的DHX32表达比较 健康体检人群组、肺良性结节组和肺癌组血清中的DHX32a和DHX32b均呈现出明显升高趋势（P＜0.05）。见表2。

表2 3组肺部不同性质血清中的DHX32表达比较（）

表2 3组肺部不同性质血清中的DHX32表达比较（）

2.3 3组血清指标检验结果比较 健康体检人群组、肺良性结节组和肺癌组的CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC和ProGRP均呈现出明显升高趋势（P＜0.05）。见表3。

表3 3组血清指标检验结果比较（）

表3 3组血清指标检验结果比较（）

3 讨论

肺癌是临床多发恶性肿瘤之一，可能产生于肺部支气管腺体或黏膜，常见表现有喘鸣、咳嗽等，疾病不会传染，但具有遗传易感性，存在家族聚集性。现阶段，该病的发病人群以男性为主，在所有恶性肿瘤中该病发生率最高，在女性群体中发生率位居第三。该病的影响因素如下。①吸烟：该因素占比最高，吸烟者发生肺癌的概率约为不吸烟者的20倍，同患肺癌，吸烟者的病死率可高出不吸烟者的4～10倍[3]。②职业接触：职业环境中存在致癌因子，如甲醛、芥子气和石棉等，可能诱发肺癌。③空气污染：包括室外污染（如工业废气）与室内污染（如燃料燃烧）等。④其他：包括饮食、电离辐射等。尽早发现，予以患者诊治，能取得良好预后，疾病发展到晚期后，治疗困难，预后效果不佳。目前临床诊断肺癌多采取实验室检查及相关辅助检查，主要有以下内容。①影像诊断：常见技术有X线检查、MRI检查、CT检查、纤维支气管镜检查、PET/CT检查和纵隔镜检查等。②病理学检验：主要包括两项技术，其一为转移灶组织检查，其二为活检。③细胞诊断：主要包括两项技术，其一为胸水检查，其二为痰液脱落细胞学检查。④生化学诊断：主要为肿瘤标志物。⑤其他：包括检测抑癌基因和染色体等。

Abdelhaeem教授于2002年以急性淋巴细胞白血病为对象展开研究，首次提出DHX32，并得出结论DHX32属于RNA螺旋酶[4]。目前国内外研究DHX32调控机制和功能的报道较少，处于刚起步阶段。当下，国外探讨DHX32大多围绕调节免疫细胞功能，如T细胞、淋巴细胞等。Alli、Abdelhaeem等学者提出DHX32影响细胞凋亡和增殖分化。Freedman和Gold于1965年最先提出CEA，提取自胚胎组织及结肠癌，CEA属于酸性糖蛋白，该物质存在人类胚胎抗原特性，来源于内胚层细胞，经由其分化形成，所处位置为癌症细胞表面，在细胞膜中属于结构蛋白[5]。CEA形成自细胞质，穿过细胞膜进入体液、血液，临床能够在粪便、胸腹水、乳汁和血清等多种成分中检出该物质。在结直肠癌早期诊断中常将CEA视为特异性标志物，后续经大量研究显示，除胃肠道恶性肿瘤以外，其他恶性肿瘤中CEA表达也较高，如肺癌等。CEA被称之为广谱肿瘤标志物，尽管在恶性肿瘤诊断中不能作为特异性指标，但其恶性肿瘤临床诊疗中发挥着重要辅助价值。CYFRA21-1来源于细胞角蛋白，具有可溶性，常被视为肿瘤标志物，特别是在肺癌诊断中作用明确[6]。细胞角蛋白参与上皮细胞生成过程，以等电点、分子量等存在差异为依据，通过双向电泳，可将其分为多种类型，目前已知有20余种。细胞角蛋白主要涵盖两个亚群，其一为Ⅰ类，代表酸性蛋白；其二为Ⅱ类，表示碱性蛋白。CYFRA21-1属于Ⅰ类，其分子量大概在40 000 Da，在所有角蛋白中其分子量最小。CYFRA21-1普遍存在于正常组织表面，如鳞状上皮等。针对恶性上皮细胞，蛋白酶被激活，细胞降解速度加快，众多细胞角蛋白片段涌入机体血液中，因可溶性片段能够结合BM19.21与KS19.1，故而命名为CYFRA21-1[7]。NSE属于酸性蛋白酶，仅存在于神经内分泌细胞、神经元中，在SCLC诊断中，NSE是一种肿瘤标志物，敏感性最高。NSE可用于鉴别诊断肺癌，关注病情进展，评估疗效，预测癌症复发情况。SCC来源于鳞状上皮细胞，最早见于鳞癌诊断，在检验肺癌、胃肠道肿瘤时，SCC呈现出增加趋势，病情越重，SCC含量越高。通过检验SCC，可以监测肿瘤转归、发展情况[8]。ProGRP是GRP前体，常用于诊断小细胞肺癌。以往，医学家普遍认为该物质存在于消化道腺体上皮中，随着医学事业发展，临床研究深入，目前人们发现呼吸系统上皮细胞中也存在该物质。ProGRP增加时意味着上皮细胞DNA分裂速度、增殖速度提高，细胞周期出现调控异常的概率提升。一般情况下，GRP存在于胃部、胃部的神经纤维中，该物质能对胃壁G细胞产生刺激，释放出胃泌素，和平滑肌收缩关系密切，小细胞肺癌患者GRP表达异常增高。上述物质含量受多种因素影响：①受癌症分期影响，随疾病进展，上述指标呈增加趋势[9]。②受肿瘤转移影响：患者出现肿瘤转移后，上述指标水平随之增加。③受癌症组织类型影响：敏感度最高的为腺癌，然后为低分化癌，或者为腺癌。④受疾病预后影响：疾病恶化，上述指标含量提升；疾病好转，上述指标水平下降[10]。由此可见，通过测量上述指标，能作为恶性肿瘤辅助诊断信息，可以反映出预后情况。本次研究结果显示肺癌组织中的DHX32a和DHX32b均高于肺良性结节组（P＜0.05）；健康体检人群组、肺良性结节组和肺癌组血清中的DHX32a和DHX32b均呈现出明显升高趋势（P＜0.05），表示高表达DHX32意味着肺部病变严重，临床可借助该指标判断病灶性质。CEA、CYFRA21-1等指标在肺癌诊治中发挥着重要作用，疾病恶性程度增加，各指标表达含量提升。健康体检人群组、肺良性结节组和肺癌组的血清CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC和ProGRP均呈现出明显升高趋势（P＜0.05），表明临床可通过上述指标预测肺部有无病变，同时判断病变性质。在肺癌检验中CEA、CYFRA21-1、NSE、SCC和ProGRP可作为重要辅助指标，分析上述指标水平有助于预防肺癌，且指标水平越高，代表疾病越严重，可以为后续诊疗提供重要信息支持。

综上所述，肺癌组织、血液中DHX32高表达，通过测量DHX32，能有效预测肺部病变情况，同时可以鉴别肺部疾病性质，区分良恶性病灶，为疾病诊疗提供重要参考信息。