蓝莲口服液对雏鸡风热感冒的治疗试验

吴玉臣，王坤丽，胥彤彤，郭振环，李向辉，张艳玲，马霞，刘永录

(河南牧业经济学院，河南 郑州 450046)

《中华人民共和国兽药典2020版二部》和《中华人民共和国药典2020版一部》中收录有“清解合剂”“清瘟败毒散”“银翘散”“双黄连口服液”等方剂[1-2]，都有清热解毒、辛凉解表的功效，临床可用于预防治疗风热感冒。但这些方剂的液体制剂中，清解合剂由板蓝根、连翘、黄芩、金银花、玄参等12味中药组成，其成分多、制备和质量控制程序繁琐，双黄连口服液中金银花、连翘药材成本太高，限制其在养殖生产中的使用。

蓝莲口服液组方思路来源于《中华人民共和国兽药典2020年版二部》收载的“板青颗粒”，“板青颗粒”具有清热解毒，凉血之功效，主治风热感冒、咽喉肿痛、热毒发斑等[3]。但方中板蓝根、大青叶主要归心、肝、胃经，蓝莲口服液在板青颗粒组方基础上加入归心、肺、大肠、膀胱经的穿心莲，以弥补板蓝根、大青叶归经的不足，且在板青颗粒清热解毒，凉血利咽功效的基础上加入穿心莲的清热解毒、泻火、燥湿之效，共奏清热解毒、凉血利咽、燥湿泻火之功效。

蓝莲口服液组方精炼，生产工艺对穿心莲进行75%乙醇渗漉提取[4]，对大青叶和板蓝根先采用水浸泡煎煮、水煎液再用穿心莲渗漉液醇沉提取，蓝莲口服液的提取高效、完全，简化组方，降低生产成本，并使穿心莲、板蓝根、大青叶等成分最大限度地被利用。本试验采用人工制造鸡风热感冒模型，而后用蓝莲口服液进行治疗，观察疗效评价该药的临床效果。

1 材料与方法

1.1 临床试验用药物

蓝莲口服液:批号14100901,规格为200 mL/瓶,本实验室研制，由河南省某公司中试生产。

对照用兽药：板青颗粒，批号15020401，规格为30 g/袋，河北某公司产品。

1.2 试验动物

AA肉鸡购自开封兴达孵化场。

1.3 病例选择或人工发病依据和方法

1.3.1 人工发病方法

采用人工发病鸡风热感冒模型进行评价蓝莲口服液的治疗效果。

根据临床上肉鸡规模化养殖饲养特点，10日龄左右处于高温育雏向常温饲养过度期，是温度变化比较大的一个时间点，这时的高温与常温温差时常造成肉鸡的感冒，且多为风热感冒。所以，本试验采用高温与比常温低的温度交替给10日龄肉鸡温差应激来复制风热感冒模型。

1.3.2 人工发病依据证候及标准

考察指标及纳入标准根据临床上发病特点及参考《中药新药临床研究指导原则中药新药治疗感冒的临床研究指导原则》(2002年版)[5]进行。

主证：①身热(温度升高)，②微恶风，③咽红肿；

次证：①咳嗽，②口渴欲饮，③精神沉郁；

凡具备主证①②③中任一项，次证①②③中任意1项则可以诊断。

纳入：符合诊断证候，并排除因挤伤、踩压、啄伤死引起的死亡鸡。

排除：凡是在养殖过程中因挤伤、踩压、啄伤死引起的死亡鸡不应计入模型死亡数。

1.3.3 人工发病依据证候评分

人工制造发病模型的证候评分见表1～表4。

表1 人工发病依据证候评分(体温)

表3 人工发病依据证候评分(恶风)

表4 人工发病依据证候评分(口渴欲饮)

1.4 预试验

400只1日龄AA肉鸡饲养至8日龄，选取360只，随机分为12组，分别在第8、10、12日龄采用高于正常饲养温度(30 ℃)4 ℃、6 ℃和低于正常饲养温度3 ℃(送风风速1、2、3 m/s，不送风)交替进行造模试验。结果发现采用8日龄鸡造模死亡数量较多，12日龄则感冒症状较不明显；风速1 m/s时，鸡只舒适度较高，感冒症状不明显，2 m/s时，鸡较舒适，感冒症状较明显，风速3 m/s时，风速过高，鸡舒适度偏低；高于饲养温度6 ℃时鸡在低温送风与不送风情况下均有死亡，并且呼吸道症状严重，而高于饲养温度4 ℃低温送风交替3次，鸡感冒症状明显者在15%左右，且呼吸道症状明显但不严重；故选择10日龄鸡只采用高于其正常饲养温度4 ℃ 60 min，然后低于其正常饲养温度3 ℃ 60 min并且2 m/s送风的方式交替3次制备动物模型。

1.5 试验分组

10日龄AA肉鸡1 500只，随机选取健康鸡30只隔离饲养，并作为阴性对照组不造模，其余鸡采用高于其正常饲养温度4 ℃ 60 min，然后低于其正常饲养温度3 ℃ 60 min并且送风(风速2 m/s)的方式，交替3次复制风热感冒模型。根据鸡风热感冒诊断标准挑取鸡150只，对每只鸡评分记录后，自1至150号编号。随机均分为5组，每组30只，每组均分为3个重复。1～3组为试验组在饮水中按照体重0.25、0.5、1 mL/kg添加蓝莲口服液；第4组为兽药对照组，在按照说明书饮用板青颗粒连用4 d；第5组造模不用药为阳性对照组；第6组为阴性对照组。试验用药剂量及疗程：蓝莲口服液按体重给药，0.5 mL/kg，板青颗粒按照说明使用；药物均连续添加4 d(表5)。

表5 分组与处理

1.6 主要观察指标

临床症状：每日观察并记录各组采食量、饮水量、精神状况、扎堆状况、体温、发病情况、死亡情况。

体重变化：在给药前及给药结束第1天每组的3个重复分别称重，统计各组平均体重。

治愈情况：试验结束时统计各组鸡的发病率、治愈率、有效率、显效率。

1.7 疗效评定标准

疗效评定标准：参照《中药新药临床研究指导原则·中药新药治疗感冒的临床研究指导原则》[5]标准进行。

1.7.1 中医症状疗效判定标准

疗效指数(n)=(治疗前总积分-治疗后总积分)/治疗前总积分×100%；

临床痊愈：积分值降低，疗效指数≥95%；

显效：积分值降低，70%≤疗效指数<95%；

有效：积分值降低，30%≤疗效指数<70%；

无效：积分值降低，疗效指数<30%。

1.7.2 退热疗效判定标准

痊愈：治疗24 h内，体温恢复正常；

显效：治疗24 h内，体温降低≥1 ℃以上，但未至正常；

有效：治疗24 h内，体温降低0.5～1 ℃，但未至正常；

无效：治疗24 h内，体温降低不足0.5 ℃。

1.8 数据处理与统计

体重和体温数据以“平均值±标准差”表示，用SPSS 16.0软件分析进行单因素方差分析，比较各组差异的显著性。证候评分、发病率、治愈率、有效率采用百分数表示，采用t检验进行各组间显著性分析。

2 结果

2.1 造模发病情况

通过对10日龄AA肉鸡高温34 ℃(高于其正常饲养温度4 ℃)60 min，然后低温27 ℃(低于其正常饲养温度3 ℃)60 min并且送风(风速2 m/s)的方式，交替3次复制风热感冒模型，11日龄早上，挑选具有身热(可以根据表现症状：怕风、精神沉郁、扎堆等选取)、咳嗽或气喘等症状的鸡作为造模风热感冒成功试验动物进一步试验。在进行评价蓝莲口服液治疗鸡风热感冒效果试验过程中，各模型组和阴性对照组鸡没有死亡情况出现。

2.2 各组的临床症状情况

2.2.1 各组采食量比较

用药后的第2天早上填料换水前统计采食量，结果见表6。在用药期4 d内，药物高、中、低剂量组及兽药对照组的采食量显著高于阳性对照组，低于阴性对照组，药物高、中剂量组显著高于药物低剂量组和兽药对照组(P<0.05)；用药后第1天和第2天，药物高剂量组采食量高于中剂量组(P<0.05)；用药后第3天和第4天，药物高剂量组采食量高于中剂量组但差异不显著性(P>0.05)。

表6 用药期间各组鸡只平均采食量 g

2.2.2 各组饮水量比较

用药后的第2天早上填料换水前统计饮水量，结果见表7。用药后第1和第2天，药物高、中剂量组及兽药对照组的饮水量显著低于阳性对照组和药物低剂量组，药物高剂量组和阴性对照组显著低于兽药对照组(P<0.05)；用药后第3天和第4天，药物高、中、低剂量组及兽药对照组的饮水量显著低于阳性对照组(P<0.05)；用药后第4天，药物中剂量组、兽药对照组及阴性对照组饮水量低于药物中剂量组(P<0.05)。

表7 用药期间各组鸡只平均饮水量 mL

2.2.3 各组精神下降、扎堆鸡只数情况

用药后的第2天早上统计各组精神下降和扎堆鸡只数，并用t检验统计组间差异显著性，结果见表8。用药后第1天和第2天，药物高、中剂量组的精神及扎堆数显著低于阳性对照组(P<0.05)，药物低剂量组和兽药对照组的精神及扎堆数与阳性对照组无显著性差异(P>0.05)；用药后第3天和第4天，药物高、中、低剂量组及兽药对照组的精神及扎堆数低于阳性对照组，但无显著性差异(P>0.05)。

表8 用药期间各组鸡出现精神下降及扎堆现象的数量统计 只

2.2.4 各组体温比较

每次用药后的第2天早上测定各组鸡的体温，结果见表9。用药后第1、2天和第4天，试验组药物高、中剂量组、兽药对照组及阴性对照组的平均体温显著低于阳性对照组和药物低剂量组，药物高剂量组和阴性对照组显著低于药物中剂量组和兽药对照组(P<0.05)；用药后第3天，药物各剂量组及兽药对照组和阴性对照组的平均体温显著低于阳性对照组(P<0.05)。

表9 用药期间各组鸡的体温 ℃

2.2.5 各组证候评分情况

用药后各组证候评分情况见表10。用药后的第2天早上统计各组的证候分值。药后第1天和第2天，药物高、中剂量组及兽药对照组的证候评分显著低于阳性对照组和药物低剂量组，药物高剂量组显著低于药物中剂量组和兽药对照组(P<0.05)；用药后第3天和第4天，药物高、中、低剂量组及兽药对照组的证候评分显著低于阳性对照组，药物高、中剂量组及兽药对照组的证候评分显著低于药物低剂量组(P<0.05)。

表10 用药期间各组鸡的证候评分

2.3 各组的体重比较

用药对各组体重的影响见表11。用药前与用药结束时，药物各剂量组、兽药对照组及阳性对照组的平均体重显著低于阴性对照组(P<0.05)，但用药前，各造模组间平均体重差异不显著(P>0.05)，用药结束时，药物高、中、低剂量组、阴性对照组、兽药对照组的平均体重与平均增重显著高于阳性对照组(P<0.05)，药物高、中剂量组及兽药对照组的平均体重及平均增重显著高于药物低剂量组和兽药对照组(P<0.05)。

表11 用药期间各组鸡的体重 g

2.4 各组治愈情况

由表12可见，用药结束后的第2天早上统计各组的治愈情况。药物高、中剂量组及兽药对照组的治愈率显著高于药物低剂量组和阳性对照组的自愈率，药物高剂量组和阴性对照组显著低于兽药对照组(P<0.05)；用药后第3天和第4天，药物高、中、低剂量组及兽药对照组的饮水量显著低于阳性对照组(P<0.05)；用药后第4天，药物中剂量组、兽药对照组及阴性对照组饮水量低于药物中剂量组(P<0.05)(表12)。

表12 各组治愈情况

3 讨论

3.1 模型的确定

中医认为，风热感冒是感受风热邪，营卫不和的外感病，临床主要表现为呼吸道症状，可伴有发热重、轻微发冷、鼻流黏涕或黄涕、咽喉肿痛、咳嗽等全身症状[6-7]。基于此，本试验在预试验基础上确立了对10日龄肉鸡反复交替使用高温与比低于常温外加大风速送风的温差应激复制风热模型，所挑选的精神沉郁鸡检查后均见气管内有黏性分泌物。并确立以饮食饮水情况、体温、精神好转及证候评分等为指标，观察不同剂量的蓝莲口服液对造模成功动物的治疗效果。

3.2 蓝莲口服液的试验效果

目前临床上使用较广用的治疗风热型感冒的中成药有双黄连口服液、板蓝根颗粒等几个品种[8-9]。但因成本原因限制其在临床中被广泛使用。蓝莲口服液作为一种风热型感冒的有效治疗药物，原料药材价格相对低廉，制备工艺简单易操作。先期的药效学试验证明蓝莲口服液具有解热、抗炎的作用。且未见明显不良反应。本试验研究结果发现，4 d用药后，用蓝莲口服液不同剂量组药组鸡精神恢复正常。

风热感冒初期，病位在皮毛与肺(即在表)，甚者入脏腑，主证发热、咳嗽、流涕。口干，咽痛，舌苔薄白或薄黄[10]；凉性药是用来解热的，使热去而阴液不受耗伤，有清热保津作用[11-12]。板蓝根和穿心莲具有清热、解毒、凉血、利咽的功效，蓝莲口服液对风热感冒初期症状有确切的防治效果。方中药物联用，能奏清热解毒、祛湿退热、凉血利咽等功效，可快速缓解风热感冒引起的头痛发热、痰液黏稠等症状。各用药组尤其是蓝莲口服液高低剂量组对采食量、饮水量、体温及证候恢复情况显著优于兽药对照组。表明蓝莲口服液可以从解热等多方面缓解用药模型鸡只的感冒症状。