反复呼吸道感染患儿细胞因子及T 淋巴细胞亚群水平的变化及临床意义

何其瑞，金玉林，丁兴华，徐阳

（河南省信阳市中心医院输血科，河南 信阳 464000）

小儿反复呼吸道感染（RRI）指在单位年限内，呼吸道感染发生频次超出正常次数（7 次以上或下呼吸道感染3 次以上）的呼吸道疾病[1]。空气污染、环境变化、婴幼儿期喂养不当以及患儿体质等因素，均可诱发该疾病。在儿科呼吸道疾病中，RRI 的发病率高达50%，病程迁延难愈，影响后患儿生长发育[2]。小儿由于呼吸系统发育尚未完善，其鼻腔相对成年人短且狭窄，故而更易发生微生物感染；除此之外，小儿免疫细胞功能与气道体液免疫功能相对薄弱，如T 淋巴细胞含量少且功能差，气道分泌物中含可抗病原菌的物质（如干扰素、补体等）少，使得小儿成为RRI 的主要发病人群[3-4]。为探究反复呼吸道感染患儿细胞因子及T 淋巴细胞亚群水平的变化及临床意义，本次研究选择2020年4 月至2021 年4 月期间我院收治的反复呼吸道感染患儿40 例及正常健康儿童40 例作为研究对象，详细报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择2020 年4 月至2021 年4 月期间我院收治的反复呼吸道感染患儿40 例及正常健康儿童40 例作为研究对象，分别作为反复呼吸道感染组（n=40）、对照组（n=40）。对照组男性23例，女性17 例；年龄1～13 岁，平均（5.84±1.46）岁。反复呼吸道感染组男性22 例，女性18 例；年龄1～12岁，平均（5.94±1.53）岁。两组一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），有可比性。

1.2 纳入标准与排除标准 纳入标准：（1）符合《诸福棠实用儿科学(第7 版)》[5]中关于RRI 的诊断标准；（2）年龄≤14 岁；（3）发病频率为0～2 岁，1 年呼吸道感染≥7 次或支气管炎＞3 次，2 岁以上至5岁，1 年呼吸感染≥6 次或支气管炎＞2 次，5 岁以上至14 岁，1 年上呼吸道感染≥5 次或支气管炎＞2 次。

排除标准：（1）原发性系统缺陷、先天性呼吸系统畸形因素造成的呼吸道感染；（2）合并严重贫血、糖尿病、结核或明显脏器功能障碍；（3）入组前7 d 曾使用免疫制剂、益生菌或维生素等可能对研究结果产生影响患儿。

1.3 方法

1.3.1 治疗方法 入组患儿均采用维生素D 滴剂[国药控股星鲨制药（厦门）有限公司，国药准字H35021450]治疗，800 U/次，1 次/d。在此基础上，给予对照组患儿布拉氏酵母菌散（法国百科达制药厂，批准文号S20100086）口服治疗，0.25 g/次，2次/d，连续治疗20 d、停药10 d 为一疗程，共治疗2个疗程。

1.3.2 检测方法 取患儿静脉血5 mL，经3 000 r/min分离血清后将其置于-4℃冰箱保存待检。采用武汉默沙克生物科技有限公司生产的相关试剂盒，以免疫比浊法测定患儿免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）；采用酶联免疫吸附法测定血清25 羟基纤维素D3 [25（OH）D3]，采用BD FACSCanto 做干扰素γ（IFN-γ），白细胞介素-4（IL-4）水平和患儿T 淋巴细胞亚群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）进行检测[5-9]。

1.4 统计学方法 应用SPSS 20.0 工具进行处理，计量资料（比如[25（OH）D3]、IFN-γ 等指标）用（）表示（组间对比采用t 检验），P＜0.05 为对比差异有统计学意义。

2 结果

2.1 免疫球蛋白对比 反复呼吸道感染组治疗前、治疗后与对照组的IgG、lgA、IgM 水平结果，见表1。

表1 两组治疗前后免疫球蛋白对比（）

表1 两组治疗前后免疫球蛋白对比（）

注：与治疗前对比，*P＜0.05；与对照组对比，#P＜0.05。

2.2 两组25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 对比 反复呼吸道感染组治疗前25（OH）D3、IFN-γ 水平较对照组低，IL-4 水平较对照组高（P＜0.05），治疗后，反复呼吸感染组25（OH）D3、IFN-γ 水平显著提高，IL-4水平显著降低（P＜0.05），治疗后25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 与对照组对比无明显差异（P＞0.05），见表2。

表2 两组25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 对比（）

表2 两组25（OH）D3、IFN-γ、IL-4 对比（）

2.3 两组T 淋巴细胞亚群水平对比 反复呼吸道感染组治疗前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组低，CD8+水平较对照组高（P＜0.05），治疗后，反复呼吸感染组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著提高，CD8+水平显著降低（P＜0.05），治疗后T 淋巴细胞亚群水平与对照组对比，无统计学差异（P＞0.05），见表3及图1。

图1 两组T 淋巴细胞亚群水平

表3 两组T 淋巴细胞亚群水平

3 讨论

RRI 临床主要表现为咳嗽咳痰、流鼻涕、乏力等，与一般呼吸道感染相似，但由于该病反复发作，病程迁徙，不及时治疗容易诱发其他系统疾病[10]。小儿由于呼吸系统发育尚未完善，其鼻腔相对成年人短且狭窄，故而更易发生微生物感染[11-12]。除此之外，小儿免疫细胞功能与气道体液免疫功能相对薄弱，如T 淋巴细胞含量少且功能差，气道分泌物中含可抗病原菌的物质（如干扰素、补体等）少，使得小儿成为RRI 的主要发病人群[13]。

IgA、IgG、IgM 是体液免疫的主要组成部分，是反映体液免疫功能的主要指标。25（OH）D3 有调节细胞免疫的作用，IFN-γ、IL-4 为反映炎性因子的指标，其中IFN-γ 能够抑制IL-4 水平，减轻炎性症状；T 淋巴细胞亚群则是反映细胞免疫功能的指标[14]。本次研究中，反复呼吸道感染组治疗前，IgG、IgA、IgM、25（OH）D3、IFN-γ 水平较对照组低（P＜0.05），IL-4 水平较对照组高，治疗后，反复呼吸感染组IgG、IgA、IgM、25(OH)D3、IFN-γ 显著提高，IL-4水平显著降低（P＜0.05），治疗后与对照组对比，无统计学差异（P＞0.05）。

T 淋巴细胞亦可简称为T 细胞，主要来源于骨髓的淋巴干细胞，并且在胸腺中发育并成熟[15]。T细胞的异质性较高，根据T 细胞表面标志物以及分化抗原的差异，分为不同的亚群，主要包括CD4和CD8 T 淋巴细胞二个亚群，生理状态下，T 细胞的数目和亚群的比例维持在恒定水平，其中CD4占T 淋巴细胞的60%～65%，CD8 占30%～35%，CD4 和CD8 的比例在正常机体中处于稳定状态，各个亚群之间既相互协作又相互制约，当机体免疫状态发生改变时，二者的比值随之变化[16-17]。T 细胞具有介导细胞适应性免疫作用，是发挥细胞免疫的主要细胞。成熟的T 细胞中只能检测到CD4或CD8 分子的表达，而这两种分子的主要作用是在T 细胞抗体对抗原进行识别或者对T 细胞活化信号进行传导时，起辅助作用[8]。CD4 主要分布在T细胞的辅助细胞诱导亚群和抑制细胞诱导亚群表面，CD4 的结构是一条单链的跨膜蛋白，在其远膜端的2 个结构域结合主要组织相容性抗原Ⅱ的β2的结构域，对T 细胞转化为效应细胞和B 细胞生成抗体具有辅助作用。CD8 主要分布抑制性T 淋巴细胞和杀伤性T 淋巴细胞表面，CD8 是由两条肽链组成的，即组成的异二聚体（CD8α 和β）的细胞外区各包含一个结构域，该结构与能够结合MHC I 类分子的α3 功能区，进而使信号发生转导。CD8 还可直接将靶细胞裂解，或者将其杀死，主要作用机制由穿孔素、颗粒酶、淋巴毒素相互作用完成的，CD8 通过作用Fasl 促进靶细胞的凋亡[19]。CD3 属于T 细胞的另一个亚群，具有5 种肽链的跨膜蛋白，表达于所有T 细胞表面。CD3 主要与TCR 相结合形成复合物，CD3 的作用是将TCR 通过对抗原所产生的活化信号进行识别，活化信号转导至T 细胞中[20]。CD3 是所有T 细胞的表面标志物，因此CD3 的数值可反应T 细胞状态。通过对CD3、CD4、CD8 进行研究，了解T 细胞的反应情况。反复呼吸道感染组治疗前CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平较对照组低，CD8+水平较对照组高（P＜0.05），治疗后，反复呼吸道感染组CD3+、CD4+、CD4+/CD8+水平显著提高，CD8+水平显著降低（P＜0.05），治疗后T 淋巴细胞亚群水平与对照组对比差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，RRI 患儿细胞因子及T 淋巴细胞亚群存在异常，可用于评估病情，而且有利于评估治疗效果。