周春香,卢 炜
(1.黄河科技学院,河南郑州 450063;2.河南巽丰生物科技有限公司,河南郑州 451161)
我国生猪养殖业正在走向规模化、集约化、智能化的发展道路,烈性传染病造成的损失得到有效控制,但引起母猪繁殖障碍、影响母猪、仔猪健康,甚至导致死亡的猪瘟、猪蓝耳病、猪伪狂犬病等病毒性传染病的危害一直被行业所关注。对河南某规模化猪场连续2年血清样本进行抽样检测,系统分析不同阶段猪只的抗体水平、该场存在的疫病防控安全隐患及风险,为该场猪群健康防控,降低疫病治疗成本,保证从业者安全提供技术参考。
1.1.1 血清样品
采集河南省某规模化猪场健康猪只血清样本,3 500 r/min离心分离血清,剔除溶血血清样本,做好标记,置-25℃冰箱保存备用。
1.1.2 主要试剂
猪瘟抗体检测试剂盒、猪蓝耳病抗体检测试剂盒和猪伪狂犬IgE抗体检测试剂盒均购自爱德士生物科技有限公司,猪伪狂犬IgB抗体检测试剂盒购自百测生物生物科技有限公司,置于4℃冰箱冷藏保存备用,其他试剂、耗材主要购自生物工程(上海)股份有限公司,均在规定有效期内使用。
1.1.3 主要仪器
高速台式离心机(贝克曼ALLegra X-30),多功能酶标仪(Tecan infinite E Plex),电热恒温箱(GHO-9050),Eppendorf可调节移液器,冷藏冰箱(中科MPC-25V268E),漩涡振荡器(SI/vortex-genie2)。
1.2.1 操作方法
所有试剂在使用前均要求恢复至室温(18~25 ℃),且使用前先摇匀,样品检测方法及判定结果标准参照试剂盒说明书,使用后按照说明冷藏保存备用,不同试剂盒中的试剂不能混用。
猪瘟抗体检测结果评定标准:阻断率≥40%,判为阳性;阻断率≤30%,判为阴性;之间判为可疑。
猪蓝耳抗体检测结果判定标准:S/P值≥0.4,判为阳性;S/P值<0.4,判为阴性。
猪伪狂犬gB抗体检测结果判定标准:S/P值≤0.499,滴度范围≤1070,判为阴性;S/P值≥0.500,滴度范围≥1071,判为阳性。
猪伪狂犬gE抗体检测结果判定标准:S/N值≤0.6,判为阳性;S/N值≥0.7,判为阴性。
1.2.2 统计分析
利用office软件对检测数据进行生物统计学分析。
2021年,基础母猪、保育仔猪、育肥猪和公猪的猪瘟抗体阳性率均在85%以上,产房仔猪的猪瘟抗体阳性率最低为66.42%,差异显著(P<0.01),平均值只有58.37,离散度最高达44.00%;2022年,基础母猪、产房仔猪血清猪瘟抗体阳性率为55.76%、18.81%,均低于2021年同阶段猪只抗体水平,且差异显著(P<0.01),离散度也上升到37.63%和69.67%。
2021年,基础母猪群中后备母猪、妊娠母猪、哺乳母猪的阳性率分别为96.67%、95.48%、94.94%,免疫效果较好。2022年的抗体阳性率分别下降到76.84%、61.63%、57.93%,与2021年比较差异显著(P<0.01),且后备母猪离散度高达56.50%。见表1。
表1 基础母猪猪瘟抗体阳性率及离散度统计结果
该场为蓝耳疫苗免疫场,猪蓝耳病ELISA抗体检测结果发现:2021年,基础母猪、保育仔猪、公猪抗体阳性率分别为84.64%、98%和91.67%,离散度分别为56.06%、32.00%和49.00%;2022年,基础母猪和产房仔猪的抗体阳性率下降到63.4%和35.22%,差异显著(P<0.01),离散度上升到58.00%和93.88%。见表2。
表2 猪蓝耳病抗体统计结果
根据基础母猪群的组成结果发现:2021年后备母猪、妊娠母猪和哺乳母猪的阳性率分别为93.12%、90.48%和71.41%,其中,后备母猪S/P>2.0和S/P>2.5的阳性率为41.27%和30.69%;2022年抗体阳性率分别下降到85.00%、55.50%和58.33%,后备母猪S/P>2.0和S/P>2.5的阳性率为8.33%和0,差异显著(P<0.01),而哺乳母猪的离散度高达59.67%。
2021~2022年累计收集检测771份猪血清样本,猪伪狂犬病IgB抗体阳性率维持较高水平,分别为97.00%和100%;猪伪狂犬病IgE抗体阳性率2021、2022年分别为18.32%、25.84%,差异显著(P<0.01),整体呈上升增加趋势。见表3。
表3 猪伪狂犬病抗体年度检测结果(%)
2021年,后备母猪、妊娠母猪、哺乳母猪、产房仔猪、保育仔猪和公猪伪狂犬IgB抗体阳性率均在80%以上,伪狂犬IgE抗体阳性率分别为15.50%、43.30%、33.60%、27.30%、0和0。抽样检测结果显示该场疫苗整体免疫效果较好,但猪伪狂犬病野毒在母猪和产房仔猪的阳性占比较高;2022年,各阶段猪只的伪狂犬IgB抗体阳性率均达到100%,妊娠母猪、哺乳母猪、产房仔猪、保育仔猪和公猪伪狂犬IgE抗体阳性率分别为8.70%、35.80%、23.31%、54.90%和0%。疫苗免疫效果较高,公猪伪狂犬IgE一直保持阴性,妊娠母猪伪狂犬IgE抗体阳性率下降,但哺乳母猪和产房仔猪伪狂犬gE阳性率没有缓解,且保育仔猪伪狂犬IgE阳性率已由2021年的0上升到2022年的54.90%,差异显著(P<0.01)。见表4。
猪瘟是由猪瘟病毒感染引起的高热、稽留、血管壁变性、全身出血点和脾梗死为特征的一种急性、热性和接触性传染病,1984年世界卫生组织将其列为A类动物传染病,我国自1999年将其定为一类动物传染病至今。大量研究和临床生产使用证明,猪瘟疫苗的免疫可以达到较好的保护效果。本研究中,该场2021年除产房仔猪猪瘟抗体阳性率66.42%比较偏低之外,其他各阶段猪只的猪瘟抗体水平都高于80%以上,并且母猪结构中后备母猪、妊娠母猪和哺乳母猪的抗体值都在90%以上。截至2022年,基础母猪和产房仔猪的抗体阳性率显著下降,平均值母猪不足70%,仔猪不足30%,且后备母猪、妊娠母猪和哺乳母猪随着生产节律的延伸,抗体水平逐渐降低。因此,该场的瘟猪疫苗常规免疫流程需要加强监管,疾病控制部或基层实验室要定期开展抗体监测,实时掌握各阶段猪只的疫苗免疫状况,对免疫不合格的阶段猪只要及时安排驻场兽医进行补打,以保证猪只的健康,减少疾病损失。
本调研结果发现,2021年该场各阶段猪只的抗体阳性率均大于80%,但在母猪的结构组成中,后备母猪、妊娠母猪和哺乳母猪S/P>2.5的阳性率高达30.69%、7.14%和10.34%,整个母猪群处于蓝耳病不稳定甚至排毒状态,严重影响母猪的繁殖性能和仔猪的健康生长。截至2022年,S/P>2.0的阳性率只有后备母猪8.33%,妊娠母猪和哺乳母猪均为0,但群体疫免疫阳性率却下降到85%、55%、58.33%。该场蓝耳阴性猪面临的风险比较大,蓝耳病的免疫、抗体监测及野毒检测工作不容忽视,特别是从外部新引进的后备母猪和孕猪,也可结合生产效益等综合因素考虑全群净化问题。
猪伪狂犬病是由猪伪狂犬病病毒引起妊娠母猪流产、死胎,公猪不育,新生仔猪神经症状大量死亡,育肥猪呼吸困难、生长停滞等临床特征的重大动物传染病,呈全球性分布。本项研究调查发现,该场伪狂犬病IgE的总感染率从2021年的18.32%增长到2022年的25.84%,也从最初的繁殖场的母猪和产房仔猪,蔓延到育成场保育阶段仔猪,保育阶段仔猪2022年伪狂犬病gE阳性率达54.9%。该场伪狂犬病已对猪只健康构成严重威胁,严重影响生产成绩,因此伪狂犬病的净化工作任务较大,疾控部门做好日常免疫监测的同时,还要严把引种质量关,避免带毒猪入群。
综上所述,猪瘟、猪蓝耳病和猪伪狂犬病是长期困扰生猪养殖行业的重要病毒性传染病,常呈并发或伴发状态,不仅危害动物健康,甚至危害公共卫生安全。在目前行业大背景下各个养殖场在积极努力防控非洲猪瘟病毒侵袭,稳定生产的同时,还要重视加强对以上三种疾病的免疫、监测等疫病防控工作。