外周血miR-200C、miR-101和CA-724联合检测对胃癌的诊断价值

邱天竹,徐同鹏,张皓

(南京医科大学第一附属医院肿瘤科,江苏 南京 210000)

胃癌通常起源于胃黏膜上皮细胞,早期可能出现的上腹不适、嗳气等症状与胃慢性疾病相似,通常见于40～70岁人群,且多见于男性,发病率在我国存在地域性差异[1-2]。研究[3]证实,早期胃癌患者的5年生存率高于晚期胃癌患者。因此,尽早诊断胃癌,采取切实有效的治疗方案,是延长胃癌患者生存期的必要条件。胃镜检查属于侵入性检查,部分患者存在排斥心理,故探寻其他患者易于接受的检测方法对提升早期胃癌检出率有重要意义。与传统诊断方法相比,血清中的肿瘤分子标志物具备操作简单、易重复的优势,又因单一指标检测存在特异度或敏感度较低的问题,故临床多采用多指标联合检测予以诊断。微小RNA(microRNA,miRNA)属于小分子RNA,可通过与靶mRNA结合来调控mRNA的翻译或降解来调控特定靶基因的表达[4]。研究[5-6]证实,miRNA的失调与肿瘤细胞发展有关,且不同miRNA的表达可能存在差异。糖类抗原-724(carbohydrate antigen-724,CA-724)是一类高分子量的黏蛋白,可作为辅助诊断、鉴别消化道肿瘤的癌胚抗原[7]。本研究旨在探讨miR-200C、miR-101和CA-724联合检测对胃癌的诊断价值。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年2月至2022年5月南京医科大学第一附属医院收治的112例高度疑似胃癌的患者为研究对象,根据病理检查结果分为胃癌组(n=69)和良性组(n=43)。胃癌组中男性45例,女性24例;年龄(58.6±5.3)岁。良性组中男性24例,女性19例;年龄(57.7±5.9)岁。本研究经院伦理委员会审核批准,患者及家属知情同意,两组患者性别、年龄等一般资料比较,差异无统计学意义(P>0.05)。纳入标准:(1)胃癌组患者经病理检查,符合胃癌诊断标准[8];(2)良性组经病理诊断非胃癌;(3)临床资料完整者。排除标准:(1)合并其他恶性肿瘤者;(2)存在放化疗治疗史者;(3)近3个月内存在激素、非甾体抗生素治疗史者;(4)合并血液系统疾病、全身感染性疾病、严重心肝肾疾病者;(5)合并胃底静脉曲张、肠道系统疾病者。

1.2 方法

1.2.1 miR-200C、miR-101、CA-724水平检测 采集患者清晨空腹静脉外周血6 mL,离心分离血清;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测外周血miR-200C、miR-101表达水平;采用电化学发光法检测外周血CA-724水平,使用仪器为电化学发光分析仪及配套试剂盒。

1.2.2 胃癌组分组 根据胃癌组患者肿瘤TMN分期、淋巴结转移情况进行分组。将分期为Ⅰ、Ⅱ期的患者纳入早期组(n=28),分期为Ⅲ、Ⅳ期的患者纳入晚期组(n=41);将无转移的患者纳入无转移组(n=26),将存在淋巴结转移的患者纳入转移组(n=43)。

1.3 观察指标

(1)胃癌组与良性组、早期组和晚期组、无转移组和转移组患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平;(2)miR-200C、miR-101、CA-724对胃癌的诊断价值。

1.4 统计学分析

2 结果

2.1 胃癌组与良性组患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

胃癌组患者血清miR-200C、miR-101水平低于良性组,CA-724水平高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 胃癌组与良性组患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

2.2 不同肿瘤分期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

胃癌早期组患者外周血miR-200C、miR-101水平高于胃癌晚期组,CA-724水平低于胃癌晚期组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 不同肿瘤分期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

2.3 不同淋巴结转移情况胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

胃癌未转移组患者外周血miR-200C、miR-101水平高于转移组,CA-724水平低于转移组,差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同淋巴结转移情况胃癌患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平比较

2.4 外周血miR-200C、miR-101、CA-724对胃癌的诊断价值

ROC曲线分析显示,外周血miR-200C、miR-101、CA-724单独及三者联合诊断胃癌曲线下面积(AUC)分别为0.903、0.889、0.965、0.990,三者联合检测诊断的价值高于各指标单独检测(P<0.05)。见表4及图1。

表4 外周血miR-200C、miR-101、CA-724对胃癌的诊断价值

3 讨论

随着我国居民生活水平的提升及生活习惯的改变,吸烟、饮酒、肥胖、高盐饮食等越来越常见,导致我国胃癌发病呈现年轻化趋势[9]。由于胃癌早期症状不显著及我国尚未普及胃镜作为常规检查,且属于侵入性,患者通常难以接受,故导致多数患者确诊时已进展至晚期。随着现代分子生物学的进步,血清肿瘤标志物的检测逐渐运用于提升胃癌的早期诊断率中[10]。由于使用单一的肿瘤标志物检测存在特异度或敏感度较低的问题,故临床通常使用多指标联合检查来进行胃癌的辅助诊断。

miRNA广泛存在于人类细胞中,其种类繁多、功能复杂,具备保守性、时序性、稳定性、组织特异性的特质,在肿瘤发生、发展过程中拥有癌基因、抑癌基因的作用,进而影响机体肿瘤细胞的增殖、凋亡过程[11]。miR-200C作为miR-200家族的一员,具备抑癌基因的作用,能通过多个靶标抑制肿瘤细胞的增殖、侵袭[12-13]。miR-101同样属于抑癌基因,能通过抑制多个靶基因表达以达到抑制肿瘤细胞的增殖[14]。CA-724是存在于绝大多数胃、肺、胰腺、结肠等恶性肿瘤中的癌胚抗原,属于构成肿瘤细胞骨架的基本成分之一,在消化道肿瘤中异常升高,对检测胃癌具备较高的特异度[15]。本研究结果显示,胃癌组与良性组患者外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平存在差异(P<0.05),且经ROC曲线分析,外周血miR-200C、miR-101、CA-724联合诊断的敏感度、特异度均得到提升,表明上述三指标联合诊断对提升胃癌的诊断效能有一定帮助,推测原因可能在于miR-200C、miR-101均作为抑癌基因,具备抑制癌细胞的增长、扩散的作用,故其低表达会使抑癌作用降低,进而导致肿瘤发生、发展;CA-724的表达上调提示肿瘤细胞大量增殖。既往有研究[16]证实,miR-200C可被用于诊断胃癌,本研究结果佐证了这一观点。黄光墉等[17]研究同样认为,miR-101在胃癌患者中表达异常,本研究结果与之一致。

在上皮间质化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中,上皮细胞会逐渐丧失细胞间的链接,向周围浸润或通过血管转移。本研究显示,早期胃癌患者外周血miR-200C、miR-101水平高于晚期患者(P<0.05),CA-724水平低于晚期患者(P<0.05),而未转移患者外周血miR-200C、miR-101水平与转移患者比较,水平更高(P<0.05),且CA-724水平更低(P<0.05),推测原因在于胃癌患者随TNM分期增加、淋巴结转移使外周血miR-200C、miR-101水平降低,而使CA-724水平上升;miR-200C、miR-101均可抑制肿瘤细胞的EMT过程,能抑制肿瘤细胞扩散、转移,其水平降低则会促进胃癌的进展及转移;CA-724在胃癌早期并未大量进入体循环,随着胃癌患者淋巴结被侵袭,最终使外周血CA-724显著上升。Kerche等[18]研究也显示,miR-200C与肿瘤转移相关,与本研究结果与之相近。

综上,胃癌患者的外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平与良性病变患者相比存在差异,三指标的联合检测对胃癌诊断有重要意义,能有效弥补单项指标检测存在的缺陷,且外周血miR-200C、miR-101、CA-724水平与胃癌患者临床分期、淋巴结转移有关。