牛人工授精操作要点

文│吕全云（山东省沂水县畜牧发展促进中心）

配种员进行牛人工授精具有很大的挑战性，经过长时间的实践，配种员往往通过咨询户主、外部观察等确定母牛发情后进行人工授精，从而为母牛的成功配种奠定良好的基础。其操作要点主要包括发情鉴定、冻精准备和输精3部分。

一、发情鉴定

包括前期准备、外部观察和直肠检查3部分，具体操作可参考如下。

1.前期准备。

（1）养殖户发现母牛出现发情征兆（如外阴发红、出现“吊线”现象、大声哞叫、爬跨其他牛或接受其他牛爬跨等）时，要及时与配种员联系。一般母牛早上发情下午对其配种；下午发情次日早上配种。但很多母牛会在晚上发情，所以配种员往往会根据养殖户诉说的母牛症状结合母牛年龄、胎次判断配种的时间。户主需在配种员到来时及时保定好母牛。

（2）配种员配种前需穿好工作服和靴子，并剪短、磨平指甲；充分洗净、消毒并擦干双手，也可以用免洗消毒液清理双手；最后佩戴一次性塑料短手套。

2.外部观察。配种员通过肉眼观察并掰开母牛阴门，结合外阴颜色、阴道黏膜及黏液状态判断发情情况。一般在发情后期进行配种，成功概率高。此时，母牛比较安静，食欲由减退慢慢转为正常，躲避其他牛爬跨；外阴肿胀不再明显，消失的横纹逐渐恢复；阴道黏膜充血减退，呈暗红色；阴道黏液量少且颜色浑浊、不透明。配种员检查完毕后脱掉手套，扔到垃圾桶。

3.直肠检查。由于卵泡囊肿、子宫炎症或妊娠两月内的母牛也可能出现发情症状，为避免误配，直肠检查很有必要。因为牛的妊娠期较长，有些养殖户为了减少饲料成本，确保母牛妊娠，会在配种45天后请配种员通过直肠检查进行检胎。

（1）配种员根据操作习惯，清洗、消毒、擦干双手后分别戴上一次性短手套或长臂塑料手套，并将一次性长臂塑料手套外侧均匀涂抹润滑剂。

（2）一般情况下，母牛向两侧踢，但牛的品种不同，即使有多年人工授精经验的配种员一年中被踢到1～2次也正常。所以，配种员应站于母牛正后方，两腿岔开，膝盖微微前倾，如果遇到突发情况及时后撤，确保人身安全。

（3）配种员将母牛尾巴拉向一侧，戴一次性长臂塑料手套的食指可先轻轻触碰其阴门，接着轻轻转动伸入直肠。待母牛稍放松时，五指并拢，呈圆锥形从肛门旋转伸进直肠，沿直肠上部向里深入。如果母牛宿粪过多，需先轻柔向外掏出。掏完宿粪后手心向下，摸到子宫颈口后依次轻轻触摸子宫体和两侧子宫角、输卵管和卵巢。

一般情况下，母牛发情后期的卵泡直径发育到2.0厘米左右，稍突出于卵巢表面，卵泡壁薄且胀，有明显波动感，感觉一触即破。此时输精配种更易成功。输精结束后可轻拍母牛臀部，促进精液进入。

当母牛患有卵泡囊肿时，其发情周期缩短，有些母牛会表现为持续、强烈的发情行为，如高度兴奋，哞叫不安，追逐或爬跨其他牛。母牛阴蒂增大，阴唇水肿，分泌灰白色黏液，子宫壁水肿。长时间后，母牛会出现食欲减退、消瘦、屡配不孕的情况。直肠检查时可以摸到卵巢上有一个或多个卵泡壁薄、紧张性较高、有波动的囊泡，间隔2～3天再检查仍然存在。

当母牛患有子宫炎症时，阴道会不定时流出脓性分泌物，当母牛卧下或排尿时排出量更多。做直肠检查时可以摸到子宫角变粗，子宫壁增厚、稍硬且敏感，收缩反应弱，如果子宫内有积存的分泌物，会有波动感。

母牛妊娠时安静喜卧，食欲增加。随妊娠天数增加，母牛尾巴逐渐向一侧偏离，尾根部鼓起。直肠检查时，妊娠一侧的孕角会较空角侧稍增大，触摸时有波动感，从一侧滑向另一侧，细细感受，有胎膜囊滑动的感觉。

做完直肠检查后，如母牛发情，则进行人工授精。

二、冻精准备

在实际操作中，多年人工授精的配种员往往根据经验确认配种时间，不进行直肠检查。为保证配种成功率，如果母牛在1个月内返情，会免费为该母牛再人工授精1次。

人工授精前需做好用品准备、冻精取放及解冻和精液品质检查三项工作。

1.用品的准备。配种员需提前准备好液氮罐、冻精、输精枪、输精套管、装有37℃温水的水杯等。

2.冻精的取放及解冻。

（1）配种员打开液氮罐口，将装有冻精的提桶上移到液氮罐颈口下部，用镊子快速取出一支冻精，如果5秒内未取出，需将提桶放回液氮中浸泡一下再次取出。

（2）配种员需轻轻甩动取出的冻精细管，将细管表面附着的液氮及棉塞端内的液氮甩掉，并快速放入装有37℃温水的水杯中，使细管冻精全部浸没于水中，及时盖上液氮罐口。

（3）解冻10秒后，配种员用镊子取出解冻后的细管精液，用无菌卫生纸把细管上的水擦干。

3.精液品质检查。在实际操作中，配种员往往不进行该项操作。冻精生产者、推销员和经营商会不定期检查冻精品质。

（1）提前打开显微镜电源，调整好物镜、载物台，将载玻片和盖玻片放置于载物台上预热。检查解冻后的细管外观，记录公牛号、品种等信息，剪开细管两端，稍微倾斜一下细管，在载玻片上滴上一滴精液，注意不要过多或过少。轻轻盖上盖玻片，尽量不要出现大气泡。

（2）调整显微镜准焦螺旋，在低倍镜下找到并调至清晰视野观察精子，然后将物镜转到高倍镜下，微调至清晰视野观察精子活力，可移动载玻片，多观察几个清晰视野，确保公牛精子活力最低0.35。对于精子活力低下的冻精细管应及时进行淘汰。

（3）观察完精子活力后关闭显微镜电源。将冻精细管、盖玻片等投放到垃圾桶中，载玻片清洗、干燥后可下次使用。

三、输精操作

包括装输精枪、消毒和输精3部分，牛人工授精的原则可以概括为慢慢插入、适当深入、轻轻注入、缓缓流出和防止倒流。

1.装输精枪。

（1）配种员用75%的酒精棉球擦拭输精枪，为彻底消毒，可将输精枪内芯拉出，逐一消毒后用无菌卫生纸擦干，再将内芯装回输精枪内。

（2）配种员从装有37℃温水的水杯中取出解冻细管（具体可参考冻精的取放及解冻），用无菌卫生纸擦干后剪去细管封口端，注意剪口断面应整齐。

（3）配种员将解冻细管剪口端向前装至输精枪前部，并将输精枪推杆慢慢后退直到解冻细管98%左右装至枪内，再将输精枪外管套套在输精枪上，拧紧外套管后部与输精枪后部螺纹处，以保证精液不从套管外流出。将输精枪放置于一侧，尽量避免污染。

2.消毒。

（1）配种员先用消毒液消毒母牛外阴，再用无菌卫生纸擦干；接着用温水清洗母牛外阴，再用无菌卫生纸擦干。

（2）配种员将两手及手臂充分洗净、消毒并擦干，戴好一次性短手套和长臂手套，并在长臂手套上均匀涂抹上润滑剂。

3.输精。

（1）配种员用戴短手套的手拿好输精枪，将戴长臂手套的手伸入母牛直肠，握住子宫颈，将子宫颈向前推，拉直阴道壁，接着肘臂稍向下，压开阴裂。

（2）配种员轻拉输精枪外套包装袋，将包装袋头部穿透，将输精枪从母牛阴道口下部斜向上约45°轻轻插入10～15厘米，再向前方水平插入至子宫颈口，双手配合轻轻旋转插入输精枪至子宫颈螺旋状皱襞1～2厘米处，使输精枪前端进入子宫体内，将输精枪向后稍退0.5厘米左右，找到正确的输精位置。最后，缓缓推动输精枪推杆，将精液慢慢注入。