血清Kisspeptin-1对甲状腺癌诊断和预后的临床意义

李玲 刘莉

调查显示,全球甲状腺癌发病率呈逐年上升趋势,已成为业界备受关注的肿瘤之一[1]。甲状腺癌病理类型呈多样性特征,且生物学特性多变,恶性程度高低不同,有些甲状腺癌发病隐匿,其诊断、治疗及预后均由不同[2]。因此,探讨甲状腺癌的临床生物学特性和特异性诊断预后指标,对提高早期诊断的准确性、改善患者生存预后具有重要临床意义。已有研究证实,人吻合素-1(kisspeptin-1,KISS-1)广泛存在于机体组织中,在一些肿瘤细胞中发现KISS-1是一种抑癌基因,有望成为新的生物学标志物和治疗靶点[3]。基于此,本研究对我院收治的105例甲状腺癌患者临床资料进行回顾性分析,并对血清Kisspeptin-1水平进行检测,探讨在甲状腺癌诊断及判断预后的价值,报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究经我院伦理委员会审批并备案,回顾性分析2019年2月至2021年2月我院内分泌科住院并接受甲状腺癌手术治疗105例患者作为研究对象(甲状腺癌组),男26例,女79例;年龄23～76岁,平均年龄(49.03±15.27)岁。另选取同期在内分泌科治疗的70例甲状腺良性病变者作为甲状腺良性病变组和医院体检中心体检的82例健康志愿者作为健康对照组。甲状腺良性病变组男25例,女20例;年龄22～75岁,平均年龄(45.37±7.18)岁;健康对照组男24例,女28例;年龄20～72岁,平均年龄(40.85±6.08)岁;健康对照组排除恶性肿瘤、血液系统疾病、自身免疫性疾病、肝肾功能异常等疾患。3组研究对象一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准[4]:①术后经病理学明确为甲状腺癌;②既往未接受手术、放化疗或其他抗癌治疗;③患者临床资料完整,术后均对患者进行随访5年且记录完整;④告知研究方案,签署知情同意书。

1.2.2 排除标准:①合并自身免疫系统疾病;②预计生存期≤6个月;③合并其他部位恶性肿瘤或远处转移;④伴有严重心脑血管疾病;⑤中途自行退出或预计无法正常随访。

1.3 方法

1.3.1 血清KISS-1检测:采集3组受试者空腹肘静脉血5 ml,甲状腺癌组和甲状腺良性病变组患者于入院后次日清晨,对照组于体检当日。分别将血液标本放入促凝剂试管中静置10 min,以1 500 r/min离心30 min(离心半径800×g)获得血清,置于-70℃冰箱内保存,待测。采用酶联免疫吸附试验法(ELISA)检测血清KISS-1水平,试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司,检测操作参考试剂盒说明书。

1.3.2 资料收集:调阅甲状腺癌患者电子病历,收集性别、年龄、病理类型、肿瘤体积、淋巴结转移、分化程度、TNM肿瘤分期等临床资料,分析血清KISS-1与临床资料的关系。再以肿瘤中位生存期作为观察指标,分析甲状腺癌患者生存预后的危险影响因素。

1.3.3 随访:对105例甲状腺癌患者进行为期5年随访,随访至2021年2月,随访以门诊复查、微信群、电话回访等方式,初始日期以术后第2天计算,截止时间为患者失访或死亡时间。记录患者5年生存率及中位生存期。

2 结果

2.1 甲状腺癌组、甲状腺良性病变组和健康对照组血清KISS-1水平比较 甲状腺癌组、甲状腺良性病变组和健康对照组血清KISS-1水平比较差异有统计学意义(F=5.917,P<0.05)。两两比较显示,甲状腺癌组血清KISS-1水平高于甲状腺良性病变组和健康对照组(t=13.358,5.297,P<0.001)。见表1。

表1 3组血清KISS-1水平比较 pg/ml,

2.2 血清KISS-1水平与临床病理参数的关系 按照甲状腺癌患者血清KISS-1水平中位数1.29 pg/ml,分为血清KISS-1高水平组52例和低水平组53例。血清KISS-1表达水平与颈部淋巴转移、肿瘤直径、肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度有关,差异有统计学意义(P<0.05);血清KISS-1水平与患者性别比、年龄、病理类型等无关(P>0.05)。见表2。

表2 甲状腺癌血清KISS-1与临床病理参数的关系 例(%)

2.3 血清KISS-1水平对甲状腺癌的诊断价值 ROC曲线分析结果,血清KISS-诊断甲状腺癌的AUC为0.908(95%CI 0.864～0.953,Z=17.978,P<0.05),根据最大约登指数0.734确定最佳截断值1.79 pg/ml,敏感性和特异性为90.48%和82.93%;血清KISS-1甲状腺良性病变者AUC为0.732(95%CI 0.652～0.811, Z=5.714,P<0.05),根据最大约登指数0.405确定最佳截断值2.22 pg/ml,敏感性和特异性为85.71%和54.88%。见图1。

图1 血清KISS-1水平对甲状腺癌和甲状腺腺瘤良性病变的诊断效能

2.4 血清KISS-1与甲腺癌患者生存率的关系 105例甲状腺癌患者均获得5～60个月随访血清KISS-1低水平组和高水平组5年生存率分别为69.8%和86.5%,低水平组5年生存率明显低于高水平组,差异有统计学意义(χ2=4.293,P=0.038)。见图2。

图2 不同血清KISS-1水平的甲状腺癌患者的生存曲线分析

2.5 甲状腺癌患者预后生存期单因素分析 血清KISS-1、颈部淋巴结转移、肿瘤TNM分期、肿瘤分化程度与甲状腺癌患者预后显著相关(均P<0.05)。见表3。

表3 甲状腺癌患者预后生存期Cox单因素回归分析

2.6 甲状腺癌患者预后生存期Cox多因素回归分析 将单因素Cox回归分析中有统计学意义的指标引入多因素Cox回归方程,结果显示血清KISS-1降低(<1.29 pg/ml)、颈部淋巴结转移及分化程度是甲状腺癌不良预后的独立预后因素(P<0.05)。见表4。

表4 甲状腺癌患者预后生存期Cox多因素回归分析结果

3 讨论

甲状腺癌不同组织学分级、不同病理类型的生物学行为具有较大差异性,对于不同类型的甲状腺癌、良恶性程度的鉴别存在不足[5]。因此研究甲状腺癌的临床生物学特性,对提高早期诊断的准确性,改善患者预后及延长生存期具有重要临床意义。随着分子生物学的研究进步,恶性肿瘤的发生、发展机制得到探索。肿瘤基因是通过染色体的缺失、易位、重排、突变及基因扩增等途径激活,使正常细胞转化为恶性细胞。肿瘤的转移与肿瘤基因激活或转移抑制基因失活相关,是多种因素综合作用的结果[6]。国外报道称不同组织变型的甲状腺癌恶性分化程度、转移侵袭能力呈梯状分布[7],因此掌握甲状癌的转移、侵袭的生物机制对选择治疗方案、评价患者预后具有重要的临床意义。

KISS-1基因定位染色体1q32-1q41,受体为G蛋白偶联54,最初从黑色素瘤中分离出来并证实是一种抑癌基因。研究证实KISS-1广泛存在于肝脏、胎盘、胰腺、骨骼肌等正常组织中,在机体代谢平衡发挥重要作用[8]。国内外研究表明KISS-1低表达或缺失与结直肠癌、胰腺癌、食管癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的转移相关,故认为KISS-1为抑癌基因[9]。邢家亮等[10]发现甲状腺瘤KISS-1mRNA表达水平显著高于正常组织,但低于甲状腺癌组织,说明KISS-1可能在甲状腺癌早期病变中发挥作用。张琼珍等[11]将外源性KISS-1传导至甲状腺癌细胞株中,结果显示大部分细胞停滞在Ⅰ～Ⅱ期,提示KISS-1可能通过抑制肿瘤细胞的细胞周期发挥抑癌作用。本研究采用酶联免疫吸附试验法检测甲状腺癌患者、良性病变者和健康对照组的血清KISS-1表达水平,结果显示甲状腺癌患者血清KISS-1水平显著低于甲状腺良性病变者和健康人群,提示甲状腺癌发生可能与KISS-1表达缺失相关,具有调控甲状腺癌生物学行为作用。国外一项研究显示对比早期胰腺癌细胞和晚期胰腺癌细胞株,发现晚期细胞株中KISS-1表达更低[12],表明胰腺癌进展可能与KISS-1基因表达缺失有关。本研究结果显示随着分化程度增加、颈部淋巴结转移的发生血清KISS-1水平明显较低,说明KISS-1可作为甲状腺癌早期筛查及判断预后的生物学指标。王文辉等[13]称KISS-1延生肽激活G蛋白偶联受体GPR54表达,达到干扰肿瘤细胞转移和侵袭作用。故KISS-1/ GPR54信号传导通路有望成为抗肿瘤治疗的靶点。

对甲状腺癌预后影响因素分析显示,血清KISS-1降低、颈部淋巴结转移及分化程度是甲状腺癌不良预后的独立预后因素,说明血清KISS-1高表达是甲状腺癌预后的保护因素,可以作为甲状腺癌预后评估的指标。生存曲线分析显示,血清KISS-1>1.29 pg/ml的患者生存时间明显优于血清KISS-1≤1.29 pg/ml的患者,这表明血清KISS-1可作为甲状腺癌预后评估指标之一。姜海斌等[14]对KISS-1表达降低,对肿瘤细胞的抑制作用明显减退,导致恶性肿瘤细胞增殖,最终影响患者预后。

综上所述,血清KISS-1水平在甲状腺癌患者血清中显著降低,低KISS-1水平是患者不良预后的独立危险因素,血清KISS-1水平可作为甲状腺癌早期诊断和预后评估的潜在指标之一。