布地奈德与维生素D3在哮喘患儿中的应用效果观察

杨 珊,杨 钊,王世明,吴 英

(1.四川省都江堰市妇幼保健院小儿内科,四川 成都 611830;2.成都市妇女儿童中心医院呼吸内科,四川 成都 610000)

儿童支气管哮喘(简称哮喘)本质为一种慢性气道炎性病变,发生发展过程中伴随变态反应性、可逆性气流受限,具有反复发病、病程迁延等特点,严重患儿甚至出现不可逆性气流气道狭窄和气道重塑[1],给患儿及家属的身心健康均造成不良影响。目前临床上用药方案还未统一[2],常使用激素类、支气管扩张药物,近几年研究发现哮喘发生还与免疫失衡有关,并指出哮喘患儿进行维生素D辅助治疗可加强治疗疗效,减少哮喘次数和预防病情恶化[3]。有研究发现维生素D可刺激淋巴细胞分泌IL-10,有利于控制炎症反应,并参与调节先天和适应性免疫系统[4]。但目前维生素D治疗哮喘的机体机制尚未明确。25-羟基维生素D3是活性维生素D的主要形式,可显著改善炎症[5]。Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路可促进分泌作用于气道上皮细胞的相关炎症因子,从而加重气道炎症、高反应性[6]。本研究选取常规布地奈德药物治疗配合维生素D3,分析该治疗方案对哮喘患儿的疗效以及对TLR4/NF-κB通路的影响。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料收集2019年5月至2022年10月都江堰市妇幼保健院和成都市妇女儿童中心医院收治的120例支气管哮喘患儿120例,纳入标准:①确诊哮喘,病情轻中度[7];②急性发作期;③入组前近1月无激素等哮喘相关治疗史,近3月无维生素D制剂治疗以及白三烯受体阻断剂;④所有患儿家属均知情同意。排除标准:①合并传染性疾病、全身感染性疾病、其他呼吸系统疾病、自身免疫疾病、内分泌系统疾病、恶性肿瘤等1种及以上;②存在维生素D3使用禁忌证;③临床资料不全,或无法评估治疗疗效者。根据随机数字表法将为对照组和治疗组各60例,其中对照组男32例、女28例;年龄4～12岁[(7.12±1.50)岁];平均哮喘病程(9.67±3.03)个月。治疗组男30例、女30例;年龄4～12岁[(7.41±1.64)岁];平均哮喘病程(9.26±3.17)个月。两组患儿一般资料比较差异无统计学意义(P<0.05)。本研究获得医院伦理委员会审核批准。

1.2 方法对照组采用布地奈德(阿斯利康制药有限公司,国药准字H20030411)治疗,使用方式为雾化吸入,使用频次:轻度患儿按照1 mg/Q12 h治疗,中度患儿1 mg/Q8 h。随着患儿症状的好转,逐渐减少治疗频次与剂量。治疗组采用布地奈德配合维生素D3药物治疗,布地奈德使用方法与对照组一致,维生素D3口服,400 U/d。另外两组患儿根据病情严重程度和自身情况给予相关对症支持治疗,两组均持续治疗1个月。

1.3 观察指标①临床疗效判定[8]:分为显效、有效、疾病稳定、无效,其中显效+有效=治疗总有效;②肺功能情况:使用肺功能仪(安徽安科电子科学研究所;型号FGC-A+)检测患儿的第1秒用力呼气 量(FEV1)、用力肺活量(FVC)、最大呼气流量(PEF)等指标;③血清学指标:在治疗前和治疗完成后抽取患儿空腹静脉血,离心(3500 r/min;半径15cm)15 min,分离出的血清超低温保存待检。取一部分采用酶联免疫吸附法测定25-羟维生素D、白细胞介素-17(IL-17)水平。④免疫功能:采用免疫比浊法检测患儿空腹静脉血中免疫球蛋白IgA、IgG及IgE水平。⑤TLR4/NF-κB通路蛋白:从上述备用的血清中提取蛋白,经过相关处理后采用Westernblot法和Image J软件测定和计算细胞TLR4、NF-κB蛋白表达值[9]。

1.4 质量控制对研究小组成员进行统一培训,由2名医务人员分别管理和收集2家医院的患者及数据资料,再由1人汇总,对有疑问数据及时询问相关负责人,若有错误及时更改。两家医院的肺功能仪和流式细胞仪均为同一型号,试剂均来采购与安迪生物科技有限公司,可排除仪器和试剂不用造成的相关误差,且相关指标均由专业人员按照试剂说明书步骤严格进行。

1.5 统计学方法应用SPSS 23.0统计学软件进行数据分析。计量资料以均数±标准差表示,比较采用t检验;计数资料以例数(%)表示,比较采用χ2检验。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组临床疗效比较治疗组总有效率高于对照组,差异有统计学意义(χ2=4.357,P<0.05)。见表1。

2.2 两组肺功能情况比较治疗前,两组肺功能指标差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组PEF、FEV1/FVC水平均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

2.3 两组血清血指标水平比较治疗前,两组各血清血指标比较差异无计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组25-羟维生素D水平较对照组高,IL-17水平较对照组低,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组血清血指标水平比较

2.4 两组免疫功能比较治疗前,两组IgA、IgG及IgM水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组IgA、IgG、IgM均高于治疗前,且治疗组较对照组高,差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 两组免疫功能比较 (g/L)

2.5 两组TLR4/NF-κB通路相关蛋白水平比较治疗前,两组TLR4、NF-κB蛋白水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,治疗组TLR4、NF-κB表达较对照组更低,差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 两组TLR4及NF-κB蛋白水平比较 (%)

3 讨论

维生素D是人体生长发育过程中重要的一类脂溶性类固醇激素,随着研究的深入,人们也发现维生素D与哮喘存在关联[10],相关研究表示不同水平维生素D人群的哮喘发病率和严重程度相关性也不同[11]。其中维生素D3为活性维生素D,若水平下降可引起肺泡嗜酸性粒细胞浸润程度下降和气道高反应性,降低肺部抗感染能力,从而易诱发哮喘。另外哮喘的发生发展过程中有多种炎症细胞参与,炎症因子水平上升会严重损伤气道局部组织及屏障功能障碍。另外临床中给予哮喘患儿常规布地奈德治疗的疗效尚可,其优势在于药物可直接接触下呼吸道等病变位置,且药物部分成分可与参与机体花生四烯酸、前列腺素及白三烯的代谢,对嗜酸性粒细胞的活化具有抑制作用[12],减少细胞浸润,缓解症状,促进哮喘恢复。

本研究结果显示,治疗组疗效更佳,可能与布地奈德配合维生素D3有效改善患儿肺功能、免疫功能以及降低炎症因子水平等有关。目前Th1 /Th2失衡学说已得到广泛认可,但尚不能解释哮喘的具体机制[13]。国外有研究称有超过40%的哮喘患儿主要由中性粒细胞浸润诱发致病[14]。IL-17为Th17分泌的关键促炎因子,当其水平升高时,可刺激其他炎症因子水平分泌,加重机体炎症反应。另外还会介导气道腺细胞的物质代谢,严重时引起气道组织改变,加快病情发展,出现气道重塑[15]。哮喘炎症相关研究表示,IL-17水平可反映哮喘病情程度,且为正相关关系[16]。本研究治疗后,与对照组相比,治疗组患儿的IL-17水平更低,说明配合维生素D3治疗可显著降低患儿的炎症反应,有利于患儿的康复。本研究中的120例患儿均存在一定程度的维生素D3缺乏,给予1月的干预治疗后,两组患儿的25-羟维生素D水平均有所上升,但治疗组患儿上升更多,即说明布地奈德配合维生素D3治疗可显著增加患儿体内的维生素D3水平,有利于调节免疫功能。尚伟光等[17]对咳嗽变异性哮喘患儿的研究指出,给该类患儿给予3个月规律维生素D3治疗后,患儿的免疫球蛋白和T 淋巴细胞亚群均出现了显著改变,并指出通过维生素D3治疗可以改善患儿的机体免疫紊乱,减轻气道炎症,有利于患儿的预后。与本研究结果相似,本研究显示治疗后治疗组患儿的IgA、IgG及IgM等免疫球蛋白水平较对照组更优,说明通过补充维生素D3可增加机体免疫球蛋白含量,改善体液免疫功能。

目前TLR4/NF-κB信号通路为机体重要的一条炎症信号通路,被公认与机体炎症反应相关。TLR具有识别病原相关分子模式以及参与启动和调节气道炎症作用,可作为气道炎症严重程度评估指标[18]。NF-κB为一种可间接反映机体免疫环境状况的基因调控蛋白。NF-κB可受TLR4激活活化,从而增加炎症细胞活性以及气道黏液,加重气道炎症及高反应性[19]。另外还有研究指出该过程与机体变态反应相关,通路的蛋白表达值可作为哮喘治疗效果和预后质量的参考指标[20]。本研究治疗后,治疗组患儿的TLR4、NF-κB表达水平优于对照组,可反映治疗组患儿炎症反应和变态反应降低,分析其原因为外源性补充维生素D3对TLR4/NF-κB信号通路的信息传递产生了一定影响,阻碍炎症因子的合成与释放,同时外源性补充维生素D3还可能促进恢复免疫平衡,加快患儿康复,有利于患儿的身心健康。

目前本研究存在以下不足:样本量偏少,且未对患儿进行随访观察,因此后续还需多中心、大样本量以及长期随访性研究进一步验证布地奈德配合维生素D3在哮喘患儿的治疗价值。另外本研究只纳入轻中度哮喘患儿,因此该结果可能只适用于轻中度患儿中,对重度哮喘患儿的影响也还需要进一步研究分析。综上,布地奈德配合维生素D3在轻中度哮喘患儿中具有不错疗效,可有效患儿提高肺功能、免疫力,改善炎症因子水平和气道重塑。并有效调节TLR4/NF-κB信号通路表达,从病理基础出发对病情发挥理想控制作用。