CXCL5基因多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎及碳青霉烯类药物敏感性的影响*

刘启波,麦东媚△,谭俊青,李晓君,蔡栋昊

广东省第二中医院:1.检验科;2.感染管理科,广东广州 510095

医院获得性肺炎是临床中的常见病症,是发生在肺泡、终末气道或肺间质的炎性病变[1]。由于社会老龄人口增多、病原体诊断难度增大等因素,医院获得性肺炎的患病群体及肺炎相关死亡人数呈持续增长趋势[2]。鲍曼不动杆菌广泛存在于自然环境与医院环境中,生存要求极低,可定植于人体的呼吸道、消化道或皮肤表层等,对常规消毒制剂或紫外线抵抗力较强,是国内医院感染最常见的致病菌之一[3]。既往研究发现,鲍曼不动杆菌以多重耐药鲍曼不动杆菌较为多见,其耐药谱持续扩大、感染率及耐药率逐年升高[4-5]。有研究报道,多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者发病率为1.3%～3.4%,病死率为33.1%,患者住院时间较长,治疗费用高,如何预防和减少其发生是世界性的公共卫生问题。对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者的病情严重程度及预后进行有效评估一直是急需解决的难题。CXC类趋化因子配体5(CXCL5)与其受体CXC类趋化因子受体2(CXCR2)结合可以对嗜中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞等多种免疫细胞发挥趋化作用,促进炎症反应的启动和进展[7]。本研究旨在探讨CXCL5基因多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎及碳青霉烯类药物敏感性的影响,为多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的临床治疗及预防提供参考。

1 资料与方法

1.1一般资料 将2020年7月至2022年7月于本院被明确诊断为多重耐药鲍曼不动杆菌感染肺炎的121例患者纳入研究作为患者组,年龄(56.38±17.15)岁,男65例、女56例。纳入标准:痰培养连续2次以上为多重耐药鲍曼不动杆菌阳性且影像学结果表现异常,根据中华医学会呼吸病学分会医院获得性肺炎的诊断标准,确诊为医院获得性多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者。排除标准:(1)入院24 h内死亡或自动出院;(2)伴严重躯体性疾病;(3)合并其他精神疾病或有严重自杀倾向。根据临床医生对患者病情的诊断,将患者又分为轻症组(36例)、中症组(66例)、重症组(19例)。另外将同期121例体检健康者作为对照组,年龄(57.15±18.11)岁,男70例、女51例。各组年龄、性别比较,差异均无统计学意义(P>0.05),具有可比性。所有纳入研究者均对本研究知情同意并签署知情同意书。本研究已获得本院伦理委员会批准。

1.2方法

1.2.1单核苷酸多态性位点(SNP)基因分型 在HapMap数据库中选取中国汉族人群的SNP中的CXCL5基因相关位点,即rs352046和rs425535。提取患者DNA,通过毛细管电泳(采用ABI 3730XL测序仪进行,上海兴曼生物科技有限公司)及SNaPshot片段分析技术(MG-012型SNaPshot法基因型仪,天津迈基生物科技有限公司)对2个SNP位点进行基因分型。

1.2.2药敏试验及炎症指标的检测 对纳入研究患者的痰液标本进行痰液分离菌株的菌种鉴定,应用梅里埃公司生产的VITEK2-Compact全自动微生物分析仪进行检测,根据2019版CLSI标准评估药敏试验结果。炎症指标使用迈瑞7500血细胞分析仪与雅培I2000微粒子化学发光仪进行检测。

2 结 果

2.1CXCL5基因位点的基因型及等位基因比较 将对照组和患者组患者CXCL5基因的rs352046及rs425535位点进行比较,rs352046位点的基因型及等位基因分布差异无统计学意义(P>0.05),rs425535位点的基因型及等位基因分布差异均有统计学意义(P<0.05),患者组A等位基因、GA基因型比例高于对照组,G等位基因、GG基因型比例低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),见表1、2。

表1 对照组和患者组间CXCL5基因rs352046位点的等位基因、基因型分布比较(n)

表2 对照组和患者组间CXCL5基因rs425535位点的等位基因、基因型分布比较(n)

2.2CXCL5基因rs352046、rs425535位点的基因型与炎症指标的关系 rs352046位点的基因型与患者的白细胞计数无关(P>0.05),而与中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白、降钙素原水平有关(P<0.05),GG基因型的患者上述4项指标水平明显低于GC及CC基因型的患者。rs425535位点的基因型与患者白细胞计数无关(P>0.05),而与中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白与降钙素原水平有关(P<0.05),GG基因型的患者上述4项指标水平明显低于GA及AA基因型的患者,差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 CXCL5基因rs352046、rs425535位点基因型与炎症指标的关系

2.3CXCL5基因rs352046、rs425535位点等位基因和基因型分布与肺炎严重程度的关系 CXCL5基因rs352046位点基因型及等位基因分布情况与患者肺炎严重程度无关(P>0.05),而CXCL5基因rs425535位点基因型及等位基因分布情况与患者肺炎严重程度有关(P<0.05),见表4、5。

表4 不同严重程度肺炎患者CXCL5基因rs352046位点的基因型与等位基因分布比较(n)

表5 不同严重程度肺炎患者CXCL5基因rs425535位点的基因型与等位基因分布比较(n)

2.4CXCL5基因多态性与碳青霉烯类药物敏感性的关系 121例多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者中,102例患者对耐碳青霉烯类药物的敏感性较高(敏感组),19例对这类药物不敏感(不敏感组)。两组CXCL5基因rs425535位点的基因型及等位基因分布比较,差异有统计学意义(P<0.05),见表6。

表6 CXCL5基因位点的基因型与等位基因(n)

3 讨 论

医院获得性肺炎占医院感染的29.6%～32.7%,病死率为22.3%～33.2%[8],发病率约为9%[9]。医院获得性肺炎的病原菌中,多重耐药鲍曼不动杆菌感染率居首位。若患者的免疫系统紊乱或脏器功能受损,多重耐药鲍曼不动杆菌的易感性明显增加,易诱发肺炎、手术切口部位感染、泌尿系统感染、导管相关感染等各种医院感染。广谱抗菌药物的广泛使用导致多重耐药鲍曼不动杆菌对目前临床常用的抗菌药物的敏感性明显降低[10-11]。一项对国内16家医院的细菌耐药性通过细菌耐药监测网进行监测结果发现,10 120株鲍曼不动杆菌菌株中多重耐药鲍曼不动杆菌的比例高达89.2%,多重耐药鲍曼不动杆菌对常用抗菌药物的耐药率可达36.4%～2.8%[12]。可见,多重耐药鲍曼不动杆菌相关肺炎仍是公共卫生事件中棘手的问题。趋化因子在炎症细胞向炎症组织部位转运的过程中发挥调节作用,CXCL5作为关键的趋化因子之一,可以诱导、维持、扩大炎症反应或免疫反应以促进炎症进展[13]。因此,探究CXCL5基因与肺炎多重耐药鲍曼不动杆菌感染及碳青霉烯类药物敏感性之间的关系具有重要意义。

本研究将两组患者CXCL5基因的rs352046、rs425535位点进行比较,结果显示,两组CXCL5基因的rs352046位点的基因型及等位基因分布比较,差异无统计学意义(P>0.05);两组CXCL5基因rs425535位点的基因型及等位基因分布比较,差异有统计学意义(P<0.05),患者组A等位基因、GA基因型比例高于对照组,G等位基因、GG基因型低于对照组,表明CXCL5基因rs425535位点的多态性与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的发生风险相关。既往有研究报道CXCL5基因多态性与肺炎链球菌感染的发生紧密相关[14]。趋化因子是一种低相对分子质量的蛋白质,在炎症反应与免疫应答的初期与靶细胞膜上特异性受体相互作用,促使白细胞、粒细胞、NK细胞等在炎症部位聚集,对人体的炎症反应、免疫反应、组织修复和造血中发挥重要调节作用[15]。

本研究将CXCL5基因rs352046、rs425535位点基因型分布与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者炎症指标的关系进行分析。结果显示,rs352046位点的基因型和等位基因分布与患者白细胞计数无关,而与中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白与降钙素原水平有关,GG基因型患者上述4项指标水平明显低于GC及CC基因型患者。CXCL5基因rs425535位点基因型分布与患者白细胞计数无关,而与中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白与降钙素原有关,GG基因型患者上述4项指标水平明显低于GA及AA基因型。趋化因子CXCL5多态性位点基因型的改变导致中性粒细胞、淋巴细胞、C反应蛋白与降钙素原水平的升高。在既往探究CXCL5基因多态性与感染性疾病之间的关系的研究中,CXCL5-156的基因型及等位基因与巨细胞病毒感染具有相关性,而且CXCL5-156 C等位基因的增加使得患儿血清中CXCL5的水平升高,巨细胞病毒感染及新生儿坏死性小肠结肠炎的相关炎症反应加重,患儿相关死亡风险显著升高[16]。

本研究分析了CXCL5基因rs352046、rs425535位点分布情况与肺炎患者严重程度之间的相关性。结果显示,CXCL5基因rs425535位点基因型及等位基因分布情况与患者组患者的多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的严重程度有关,表明CXCL5基因多态性可以在一定程度上影响患者肺炎的病情。陆秀娟等[17]研究结果表示,CXCL9基因多态性与类风湿关节炎的发生风险显著相关,而且类风湿关节炎的发生风险随CXCL9水平的升高而增加。虽然本研究结果显示,CXCL5基因rs352046位点基因型及等位基因分布情况与患者肺炎严重程度无关,但并不意味着CXCL5基因rs352046位点的多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的发生或疾病进程不产生影响,未来还需进行深入研究。

本研究结果显示,CXCL5基因rs425535位点的基因型及等位基因分布在碳青霉烯类药物敏感和不敏感患者间比较,差异有统计学意义(P<0.05),表明CXCL5基因rs425535位点多态性的改变与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者对碳青霉烯类药物的敏感性有关。有研究报道,CXCL5基因rs425535位点的基因型及等位基因与青霉素敏感性有关[14]。本研究结果中,CXCL5基因rs352046位点的基因型及等位基因分布与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎患者碳青霉烯类药物敏感性无关,并不意味着CXCL5基因rs352046位点的多态性对碳青霉烯类药物敏感性不产生影响,未来还需更多研究来进行深入探讨。

综上所述,本研究发现CXCL5基因多态性与多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎的发生风险、严重程度及碳青霉烯类药物敏感性有关,但本研究也存在样本量较小的不足,还需要开展多中心、大样本的研究,并且考虑其他基因及环境因素产生的影响,以深入探讨CXCL5基因多态性对多重耐药鲍曼不动杆菌肺炎及碳青霉烯类药物敏感性的影响。