血液标志物对皮肌炎的实验室辅助诊断价值

李秀娟,栾小娟,南京柱,张 旭

(1.首都医科大学附属北京友谊医院,北京 100050;2.青岛市第三人民医院,山东 青岛 266041;3.解放军总医院第一医学中心,北京 100853)

皮肌炎(Dermatomyositis)是临床上较为少见的一种自身免疫性疾病,常表现为四肢酸痛、肿胀无力,一般累及肺脏、肾脏、心脏、关节等[1-2].由于皮肌炎的发病机制尚不明确,且发病特点、临床指征不具有特异性,暂无对皮肌炎的诊断标准.目前对皮肌炎的诊断大多以临床症状、肌电图、影像学检查多方面联合为主.皮肌炎的诊断依据大多来自1975年的Bohan/Peter建议的诊断标准及2004年欧洲神经肌肉疾病中心提出的诊断标准[3-4].由于肌电图和影像学检查相对于实验室检测相对复杂,而血液学检测相对容易,通过对血液学标志物的研究,寻找对皮肌炎具有诊断价值的指标变得尤为重要.近几年国内研究[5-6]报道,皮肌炎患者合并间质性肺疾病时,一些肿瘤标志物水平显著升高,并具有一定的临床诊断价值.本研究旨在通过研究癌胚抗原(CEA)、甲胎蛋白(AFP)、糖类抗原125(CA125)、NSE、CYFRA211、红细胞计数(RBC)及WBC水平在疾病组和正常组中的差异,找出对皮肌炎有影响的血清学指标,对皮肌炎的实验室诊断提供帮助.

1 对象与方法

1.1 研究对象

纳入标准:2019年1月—2022年4月在解放军总医院第一医学中心风湿病科进行住院治疗的初诊患者;明确诊断为皮肌炎,所有病例的诊断依据均为1975年Bohan/Peter建议的DM/PM诊断标准或2004年欧洲神经肌肉疾病中心提出的《特发性炎性肌病分类诊断标准》[3-4];病情稳定,无合并恶性肿瘤及其他慢性消耗性疾病.

排除标准:诊断有皮肌炎,但不是因皮肌炎住院的患者;生存状态差的患者.

1.2 研究方法

将所有样本按照是否患皮肌炎分为疾病组和对照组,其中疾病组共90例,男41例,女49例;对照组85例,男37例,女48例.对疾病组和对照组的年龄、性别、体质量指数(BMI)、血压及各血液指标分别进行研究分析.

1.3 仪器与试剂

由于本研究为回顾性分析,故通过查询医院病历系统统计患者的年龄、性别、BMI、血压等基本情况,并在实验室信息系统(Laboratory Information System,LIS)中查询患者CEA、AFP、CA125、CYFRA211、NSE、鳞状上皮细胞癌相关抗原(SCC)、RBC、WBC等结果.其中CEA、AFP、CA125、NSE、CYFRA211采用罗氏 Cobas8000-E601全自动电化学发光分析仪及其原装试剂盒检测.SCC采用雅培i2000SR全自动免疫分析及其原装试剂盒检测.RBC和WBC为XN-9000 全自动血细胞分析仪(SYSMEX公司,日本)测得.所有结果均有当日质控结果做保证,均不存在失控情况.

1.4 统计学分析

应用SPSS 22.0对数据进行处理与统计学分析.本研究所有资料均为偏态分布,因此,统一采用中位数[M(P25～P75)]表示,建立模型采用二元Logistic回归,诊断效能采用ROC曲线分析.以P<0.05为差异具有统计学意义.

2 结 果

2.1 疾病组与对照组的基本信息及各指标的差异分析

将疾病组和对照组比较后发现年龄、性别差异无统计学意义(P>0.05).疾病组的CYFRA211、NSE、WBC水平较对照组显著升高(P<0.001).而 SCC、RBC水平则较对照组降低(P<0.05).两组间CEA、AFP、CA125水平比较差异无统计学意义(P>0.05).见表1、图1.

表1 疾病组与对照组基本信息及血清标志物水平分析Tab.1 Analysis of basic information and serum marker level between disease group and control group

图1 WBC、CYFRA211及NSE水平在疾病组与对照组的表达差异Fig.1 Different expression of WBC,CYFRA211 and NSE levels between disease group and control group

2.2 皮肌炎的危险因素 Logistic 回归分析

根据皮肌炎临床特征及与疾病的关系,RBC、SCC和皮肌炎疾病本身的相关性较差,且为了消除同质性干扰,RBC与SCC不予进入模型并舍弃这两项指标.最终将疾病组与对照组比较后的具有统计学差异的指标CYFRA211、NSE和WBC代入二元Logistic回归分析(Forward:Conditional法),建立Logistic 回归模型.见表2.

表2 基于CYFRA211、WBC和NSE建立的Logistic回归模型Tab.2 Logistic regression model based on CYFRA211,WBC and NSE

2.3 基于CYFRA211、WBC和NSE的Logistic回归与ROC曲线对皮肌炎的诊断价值

通过对CYFRA211、WBC和NSE进行Logistic回归后得到预测概率,将预测概率带入ROC曲线分析进行三者联合诊断皮肌炎的效能比较.单独诊断皮肌炎时CYFRA211的约登指数为0.369,诊断特异度和敏感度分别为0.783、0.587;WBC的约登指数为0.452,特异度和敏感度分别为0.986、0.467;NSE的约登指数为0.557,特异度和敏感度分别为0.957、0.600.将三者进行联合检测后,约登指数为0.729,特异度和敏感度分别为0.942、0.787.单独检测CYFRA211、WBC和NSE时,ROC曲线下面积均小于三者联合检测时ROC曲线下面积(0.923).见表3、图2.

表3 基于CYFRA211、WBC和NSE的Logistic回归与ROC曲线对皮肌炎的诊断效能Tab.3 Diagnostic efficacy of Logistic regression and ROC curve based on CYFRA211,WBC and NSE for dermatomyositis

图2 WBC、CYFRA211、NSE单独及联合诊断皮肌炎ROC曲线分析Fig.2 ROC curve analysis of WBC,CYFRA211 and NSE in individual and cooperative diagnosis of dermatomyositis

3 讨 论

皮肌炎是一种自身免疫性疾病,主要表现为肌肉痛和四肢无力等,常常并发其他器官的损伤,严重者甚至合并恶性肿瘤.目前,皮肌炎的5 a生存率为50%～80%,且早期不易发现,常规体检很难覆盖到皮肌炎诊断,所以经常出现漏诊现象[7].

目前,我国并无官方数据显示的皮肌炎的发病率,但国外数据显示皮肌炎的发病率约为0.6～1/万人[8].有研究[9]称,皮肌炎女性发病率是男性的两倍.本研究收集3 a的皮肌炎住院患者病例,发现女性患者略多于男性患者,发病多集中在33～56岁.目前有报道[10]显示,皮肌炎老年人发病较多,还有研究[11]称皮肌炎发病年龄多在45周岁以上,与本研究皮肌炎患者发病年龄相当.由于本研究病例剔除了恶病质及晚期预后较差的患者,多属于稳定期患者,所以患者相对于其他研究年龄较小.

本研究发现,疾病组CYFRA211、NSE、WBC水平较对照组显著升高,CEA、AFP、CA125水平差异不明显,其余虽有差异,但在二元Logistic建模时发现对疾病的预测作用较小.因此,本研究主要探讨CYFRA211、NSE、WBC与皮肌炎的关系.CYFRA211是细胞角蛋白19的可溶性片段[12],主要是在细胞恶性增殖时大量释放入血,导致其在体内水平升高,在人体的肺和乳腺等上皮中常见.正常人分泌的CYFRA211水平极低,因此,它是一个较好的预测人体肺部和乳腺等位置出现病变指标.NSE作为酸性糖蛋白,由神经元或神经内分泌细胞分泌而来,主要存在于神经组织和神经内分泌系统.有研究[13]报道,NSE是一种糖酵解酶,参与糖酵解的过程.WBC在人体产生急性时相反应时发生改变,如感染与应激状态以及炎症时均会导致WBC的升高.

皮肌炎目前多认为与体液免疫因素、细胞免疫因素、遗传因素、环境因素以及感染等有关[14-16],1型干扰素在皮肌炎的体液免疫中具有非常重要的作用.GREENBERG S A研究[17]发现,干扰素可以诱导免疫传递引起血管内皮改变,从而产生炎性细胞.而细胞免疫主要是通过细胞的增殖分化、细胞凋亡、免疫反应来完成[14].CYFRA211在细胞增殖分化过程中升高较为明显,可能与皮肌炎的发病机制有一定的关系.环境因素和遗传因素是目前研究皮肌炎的重要因素,虽然目前说法不一,但普遍认为HLA基因、辐射等遗传及环境因素是影响皮肌炎发病的重要因素[15].皮肌炎虽然是一种发病机制复杂的自身免疫性疾病,但它的本质还是一种炎症.因此,在皮肌炎的疾病发生发展过程中,WBC发生相应的变化并显著升高.本研究中疾病组WBC水平高于对照组,与之吻合.另外,皮肌炎易并发肺部病变,且目前的研究多认为皮肌炎容易伴发肺间质病变,且很多确诊皮肌炎患者存在肺间质病变的情况[18].CYFRA211和NSE都是肺部指向性较好的指标,在肺部细胞产生病变时,CYFRA211和NSE升高较为显著.本研究中,CYFRA211和NSE在皮肌炎患者中的表达明显高于对照组(P<0.05),因此,我们可以认为CYFRA211、NSE和WBC是非常好的用于评价皮肌炎的临床血液学指标.

将CYFRA211、NSE和WBC这3个具有临床意义的指标代入二元Logistic中,通过ROC曲线发现单一检测CYFRA211、NSE和WBC的曲线下面积均小于三者联合后检测的曲线下面积,三者联合检测灵敏度和特异性分别为0.787、0.942,曲线下面积为0.923.因此,三者联合检测对于皮肌炎的辅助诊断有较为明显的临床意义.

综上所述,皮肌炎患者血清CYFRA211、NSE和WBC水平显著高于对照组(P<0.05),三者联合检测对皮肌炎的实验室辅助诊断具有较大临床价值.本研究也存在一些不足之处,如样本量较小,且是单一中心研究,故覆盖面较小.下一步我们将扩大样本量进行多中心研究,增加多项有意义血清学指标,并通过随访跟踪及进行生存分析,探讨皮肌炎的诊断及预后.