SLC16A11、SLC16A13基因多态性与乙型肝炎相关性肝癌的关联性分析

王莹莹，张贤培，刘震阳，闫丽娜，高 霞*

(1.河北省石家庄市疾病预防控制中心性病艾滋病防治所，河北 石家庄050011 ；2.河北医科大学研究生学院，河北 石家庄 050017；3.河北医科大学公共卫生学院流行病与卫生统计学教研室、河北省环境与人群健康重点实验室，河北 石家庄 050017)

肝癌是临床上常见的消化系统恶性肿瘤，全球每年约有84.1万新发病例和78.2万病死病例[1]，其中超过50%的肝癌新发病例发生在中国。2018年，在我国常见恶性肿瘤发病率、肿瘤致死病因中，肝癌分别位列第4位和第2位。慢性乙型肝炎病毒(hepatitis B virus，HBV)感染目前是我国肝癌发病的重要诱因，肝炎变成肝纤维化、肝硬化，进而演变成肝癌[2-4]。最新研究发现肿瘤细胞膜上的单羧酸转运蛋白(monocarboxylate transporter，MCT)与肿瘤细胞的非控制性增长有关，而SLC16A11和SLC16A13编码的蛋白质MCT11、MCT13就属于MCT家族，但是SLC16A11和SLC16A13是否与肝癌发生发展有关尚不明确[5-7]。本研究将探讨SLC16A11 rs13342692与SLC16A13 rs4796576基因多态性与乙型肝炎相关性肝癌的关联性。

1 资 料 与 方 法

1.1一般资料 选取2010年1月-2014年3月于河北医科大学附属第一医院、第二医院、第四医院和河北省石家庄市第五医院的住院患者和体检人群1 039例，其中健康体检者370例和HBV自然清除(natural clearance，NC)者248例分别为对照组，乙型肝炎相关性肝癌(HBV相关肝癌)患者421例为病例组。其中病例诊断标准符合由中华医学会感染病学分会和中华医学会肝病学分会联合制定的2010版《慢性乙型肝炎防治指南》。

本研究经河北医科大学医学伦理委员会批准通过。所有研究对象均知情同意且签署知情同意书。

1.2样本含量 采用PASS 2005软件计算样本含量，取双侧α=0.05，检验效能1-β=0.85，罕见等位基因频率(minor allele frequency，MAF)取15%，比值比OR=2，对照组与病例组人数比值为1∶1，经计算每组所需最少样本含量为237。本研究各组样本含量均达到237例以上，其检验效能将大于85%。

1.3资料收集和录入 本研究在获取研究对象的知情同意后，收集了患者的基本信息(性别、年龄、吸烟、饮酒等)，抽取其5 mL外周静脉乙二胺四乙酸抗凝血，提取基因组DNA，运用Sequenom实验平台进行SLC16A11 rs13342692与SLC16A13 rs4796576的基因分型。

1.4统计学方法 应用IBM SPSS 22.0统计软件分析数据。计量资料比较采用K-WH秩和检验；计数资料比较采用χ2检验和χ2分割法。基因多态性与乙型肝炎相关性肝癌的关联性分析采用二分类Logistic回归分析。P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.13组一般情况比较 3组性别、年龄、吸烟与饮酒比较差异有统计学意义(P<0.05)，见表1。

表1 3组一般情况比较Table 1 Comparison of general conditions of three groups

2.2哈-温平衡检验(H-W平衡) 健康对照组和病例组的SLC16A11 rs13342692与SLC16A13 rs4796576两个位点基因型进行了哈-温平衡检验，均符合H-W平衡(P>0.05)，见表2。

表2 哈-温平衡检验Table 2 Hardy-Weinberg test (例数)

2.3SLC16A11和SLC16A13基因型分布情况分析 SLC16A13 rs4796576的基因型分布在共显性模型中差异有统计学意义(P<0.05)，但该基因位点在其显性和隐形模型比较差异无统计学意义(P>0.05)，SLC16A11 rs13342692的基因型分布在其共显性、显性和隐性模型中差异有统计学意义(P>0.05)，见表3。

表3 SLC16A11和SLC16A13基因型分布情况Table 3 Genotype distribution of SLC16A11 and SLC16A13 (例数)

2.4SLC16A11和SLC16A13基因多态性与HBV相关肝癌的关系 以年龄、性别、吸烟、饮酒及各基因多态性为自变量，以HBV相关性肝癌与否为因变量，进行二分类Logistic回归分析，变量赋值情况见表4。结果显示，控制年龄、性别、吸烟和饮酒的影响后，SLC16A11 rs13342692与SLC16A13 rs4796576基因多态性与HBV相关肝癌的关联性分析结果见表5。与健康人群相比，SLC16A11 rs13342692与SLC16A13 rs4796576基因某一基因型与HBV相关肝癌不相关(P>0.05)。以HBV自然清除人群为对照，与AA基因型相比，携带SLC16A13 rs4796576位点AG基因型与HBV相关肝癌相关(P=0.019)；在该基因显性模型中，携带G等位基因位点相对携带C等位基因位点与HBV相关肝癌相关(P=0.017)。SLC16A11rs13342692与SLC16A13 rs4796576位点其他基因型与HBV相关肝癌不相关(P>0.05)。

表4 变量赋值表Table 4 Information of variable assignment table

表5 基因位点与HBV相关肝癌的关联性分析Table 5 Analysis of association between gene loci and HBV-related LC

表5 (续)

3 讨 论

本研究采用病例对照研究的方法，通过健康对照、HBV自然清除者以及乙型肝炎相关性肝癌患者，分析了SLC16A11基因的rs1334269位点和SLC16A13基因的rs4796576位点的基因型在不同人群中的分布情况及分布特点。研究结果显示病例组与对照组在年龄、性别、吸烟与饮酒等方面比较差异有统计学意义(P<0.05)。HBV相关肝癌组年龄显著高于正常组与自然清除组，HBV相关肝癌组中男性占比也显著高于其他组别，同时吸烟饮酒者在HBV相关肝癌组中也占有更高的比例。

SLC16A13 rs4796576基因的GA基因型相较于HBV自然清除组，在HBV相关肝癌患者中更为多见；同时当基因以共显性模型表达时，与HBV自然清除人群作对照 AG基因型与AA型相比，可以显著增加患癌风险(OR=1.544，95%CI:1.073～2.224)；当基因以显性模型表达时，携带G等位基因位点也同样显著增加患癌的风险(OR=1.530，95%CI:1.079～2.170)。显示SLC16A11 rs1334269基因位点在试验组与对照组差异无统计学意义(P>0.05)。

SLC16A家族成员在肿瘤发生和肿瘤进展中起关键作用。SLC16A11和SLC16A13编码的蛋白质MCT11、MCT13属于MCT家族。MCTs在肿瘤过程中乳酸的转运、pH的调节、肿瘤细胞的高糖酵解表型和酸抵抗表型的维持环节中发挥了主要作用[8-10]。此外，MCTs 介导的乳酸转运还能在肿瘤细胞其他恶性表型，比如免疫逃逸和生成肿瘤血管等过程中起到促进作用[11-15]。本研究显示，SLC16A13基因rs4796576位点与乙型肝炎相关性肝癌可能有关，携带G等位基因可能是患癌的危险因素。但本研究结果仅针对乙型肝炎相关性肝癌患者和乙型肝炎自然清除人群，作共显性模型分析时，显示SLC16A13基因rs4796576的AG基因型与AA型相比高。此研究结果的得出目前尚缺乏具体的机制研究来进行支持，存在一定的局限性，尚待进一步研究和探讨。