肝细胞癌患者血清SLC7A11的变化及临床意义

詹有芳 张珏 王鹏

作者单位：200021 上海中医药大学附属曙光医院检验科(詹有芳，张珏)；上海市第七人民医院检验科(王鹏)

肝细胞癌(Hepatocellular carcinoma, HCC)作为原发性肝癌(Primary hepatocarcinoma, PHC)的主要组织学类型，是全球高发的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康[1-2]。HCC通常发病隐匿，初期缺乏特异性临床表现，但病情进展迅速，多数患者至疾病晚期因各类并发症就诊时，已失去早期最佳治疗机会，导致预后极差[3]。目前，甲胎蛋白(Alpha-fetoprotein, AFP)是临床上常用的筛查HCC的血清标志物，但由于血清AFP水平易受肝炎及其他肝病的影响，导致HCC假阳性率和假阴性率仍然很高[4-5]。因此，寻找高灵敏度和高特异度的HCC早期肿瘤标志物一直是研究热点。溶质载体家族成员(solute carrier family 7 member 11, SLC7A11)为一种氨基酸转运蛋白，近来研究表明，SLC7A11在HCC患者中表达明显上升[6]。本研究旨在探讨血清SLC7A11在早期HCC诊断中的价值。

资料与方法

一、研究对象

选取2018年1月—2020年12月上海中医药大学附属曙光医院收治的HCC患者120例作为研究对象，其中HCC早期(Ⅰ期和Ⅱ期)和晚期(Ⅲ期和Ⅳ期)患者各60例(参考我国肝癌分期方案CNLC[7])，另选取同期的60例肝硬化(LC)患者作为对照组。HCC患者均通过手术切除或肝穿刺活组织标本进行病理组织学检查。HCC诊断标准参考《原发性肝癌诊疗规范(2019年版)》[7]；LC诊断标准参考《肝硬化诊治指南》[8]。纳入标准：①经病理诊断为HCC，或经组织学检查或门脉高压检测诊断为LC，且经影像学检查排除HCC可能性；②无其他重大功能障碍。排除标准：①不符合纳入标准；②合并有其他恶性肿瘤；③妊娠期或哺乳期女性。所有患者均签订知情同意书并经医院伦理委员会批准同意。

二、研究方法

询问患者详细病史，包括年龄、性别、肿瘤病理分期等相关参数。采集研究对象清晨空腹全血5 mL，分离血清后保存于-80 ℃冰箱待测。肝脏生化指标丙氨酸氨基转氨酶(ALT)、天冬氨酸氨基转氨酶(AST)等采用全自动生化分析仪测定。AFP采用化学发光法定量检测，按《原发性肝癌诊疗规范(2019年版)》[7]，AFP≥400 ng/mL判定为阳性。采用SLC7A11 ELISA检测试剂盒检测血清SLC7A11水平，检测过程严格按照试剂盒说明书完成，操作步骤如下：(1)分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100 μL，其余孔分别加标准品或待测样品100 μL，37 ℃反应120 min；(2)弃去液体，甩干，每孔加生物素标记抗体工作液100 μL，37 ℃，60 min；(3)弃去孔内液体，甩干，洗板3次；(4)每孔加辣根过氧化物酶标记亲和素工作液100 μL，37 ℃，60 min；(5)弃去孔内液体，甩干，洗板5次；(6)依序每孔加底物溶液90 μL，37 ℃避光显色；(7)依序每孔加终止溶液50 μL，终止反应；(8)用酶标仪在450 nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

三、统计学方法

采用SPSS 26.0统计软件进行数据分析。计数资料组间比较采用χ2检验；计量资料以均数±标准差表示，组间比较采用独立样本的t检验。诊断评价采用ROC曲线分析。

结 果

一、两组患者一般资料比较

HCC组120例，男75例，女35例，年龄39～92岁，LC组78例，男52例，女26例，年龄35～92岁，两组性别、年龄、TBil、ALT差异无统计学意义(P均>0.05)；HCC组的PT水平低于LC组，而HCC组的Alb水平高于LC组(P<0.01)，差异有统计学意义。并发症发生及病因差异均无统计学意义(P>0.05)(表1)。

二、早期HCC患者与晚期HCC和LC患者血清SLC7A11、AFP等指标比较

早期HCC患者血清TBil、PT指标明显低于晚期HCC组，Alb则高于晚期HCC组，差异有统计学意义(P均<0.01)，而AFP及ALT差异无统计学意义(P均>0.05), 早期HCC患者血清 SLC7A11低于晚期HCC组(P<0.01)，差异有统计学意义；早期HCC患者血清TBil、PT明显低于LC组，SLC7A11、AFP、Alb则明显高于LC组(P均<0.01)，差异有统计学意义，晚期HCC组，ALT差异无统计学意义(P>0.05)(表2)。

三、AFP和SLC7A11单独及联合诊断HCC、早期HCC的ROC曲线分析比较

AFP诊断HCC的AUC为0.792，95%CI为0.725～0.858，灵敏度为67.50%，特异度为75.64%；SLC7A11诊断的AUC为0.801，95%CI为0.740～0.862，灵敏度为68.33%，特异度为80.77%。两项指标联合检测时，AUC为0.869，95%CI为0.817～0.920，灵敏度为73.50%，特异度为85.55%(图1)。

在早期HCC组中，单项检测时，AFP诊断的AUC为0.752，95%CI为0.663～0.842，灵敏度为65.00%，特异度为70.51%；SLC7A11诊断的AUC为0.765，95%CI为0.685～0.846，灵敏度为66.67%，特异度为75.64%。两项指标联合检测时，AUC为0.802，95%CI为0.725～0.878，灵敏度为71.67%，特异度为78.33%(图2)。

讨 论

本研究中，我们发现HCC患者血清SLC7A11水平显著高于LC患者，同时，晚期HCC患者血清SLC7A11水平显著高于早期HCC患者，提示血清SLC7A11水平可能与肝脏疾病进程相关，对HCC的早期筛查诊断具有潜在的临床应用价值。进一步分析发现，诊断HCC及早期HCC患者时，SLC7A11的AUC、灵敏度以及特异度等均优于AFP。评估血清中SLC7A11和AFP联合诊断HCC的能力，结果发现，联合检测诊断HCC或早期HCC的AUC、灵敏度以及特异度等指标均高于单独检测，诊断能力明显优于单项指标。

表1 HCC患者和LC患者一般资料比较

表2 早期HCC患者与晚期HCC和LC患者血清SLC7A11、AFP等指标比较(±s)

图1 AFP和SLC7A11及联合诊断HCC的ROC曲线

图2 AFP和SLC7A11及联合诊断早期HCC的ROC曲线

SLC7A11作为溶质载体家族成员之一，是胱氨酸/谷氨酸反向转运体(也称Xc-系统)的轻链亚基，主要功能是将细胞内的谷氨酸盐转运至细胞外，而将细胞外液内的胱氨酸摄取到细胞内[9]。既往研究表明，在多种恶性肿瘤中SLC7A11呈高表达水平[10]。已有大量研究证明，SLC7A11与肿瘤生长转移、化疗耐药、营养依赖等密切相关[11]。有研究者利用公共数据库中大量的HCC患者数据，构建了HCC诊断和预后模型，证明SLC7A11具有一定的HCC诊断和预后判别能力[12]。也有研究者检测了HCC患者外周血中SLC7A11浓度，发现SLC7A11针对HCC的检测阳性率可达80.2%，初步确定了其作为HCC肿瘤标志物的潜在价值[13]。

综上所述，血清SLC7A11水平在HCC发展进程中呈现增高趋势，与AFP联合检测可提高HCC诊断性能，尤其在HCC的早期诊断上表现出明显优势，具有良好的临床应用价值。

利益冲突声明：所有作者均声明不存在利益冲突。