球磨联合碱辅助酶法改善淡竹叶水溶性膳食纤维的物化和功能特性

樊 华，刘夫国，王玉堂，李银霞，刘学波

（西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西 杨凌 712100）

淡竹叶（Herba Lophatheri）通常指禾本科草本植物淡竹叶的干燥茎叶，其含有多种功能性成分，如多糖、黄酮和氨基酸[1]，具有改善发热、尿路炎症等功效[2]。大量研究表明，从传统中药中提取的多糖具有抗氧化、抗肿瘤、抗病毒、抗炎等生物学活性[3]，而多糖的淀粉部分因其可消化性主要用于能量供应。因此，推测属于膳食纤维（dietary fiber，DF）的非淀粉部分是淡竹叶发挥生物学活性的主要因素。然而，目前对淡竹叶DF的研究十分有限，导致人们对淡竹叶的了解不够全面，难以在食品加工中高效利用淡竹叶资源。

DF是指不能在小肠内消化和吸收，但能被大肠内的肠道菌群部分或完全发酵的碳水化合物[4]。研究表明，DF具有改善高血糖[5]、抑制饮食诱导的肥胖[6]、调节肠道菌群[7]和降低心血管疾病风险[8]等一系列生理益处。DF可分为不同类型，其分类标准通常包括原料来源、化学结构、水溶性、黏度和发酵性[9]。根据水溶性，可分为水溶性DF（soluble DF，SDF）和不溶性DF（insoluble DF，IDF）[10]。SDF能在肠道内形成黏性凝胶延迟葡萄糖和脂质的吸收进而调节血糖和血浆胆固醇[9]。IDF则可以通过减少食物在胃肠道中的保留时间和增加粪便体积缓解便秘[11]。目前普遍认为SDF有更好的益生作用，还具有更好的加工特性和感官品质[12]。IDF约占天然植物DF的60%～80%[13]。因此，改性DF以改善其SDF比率、物化特性和功能特性，对获得高品质淡竹叶来源的SDF并提升淡竹叶的应用价值十分重要。

目前，改性DF的主要方法包括物理法（如微波、挤压和球磨）、化学法（如酸、碱处理）、生物法（如发酵、酶水解）和联合法[14-15]。不同方法能通过改变DF的组分和结构影响SDF的得率、结构和功能特性[16]。球磨法能改变DF的粒径、表面积大小和功能特性，该方法易操作、成本低且对环境友好[17-19]。化学处理法能作用于某些特定的官能团，处理时间短，但易在处理过程中引入不需要的成分[14]。酶解法可以打破IDF分子间键的连接，具有较高的选择性、环境友好性，且不需要特殊设备[20-22]。近年来，因联合法能整合不同类型方法的优势并相互弥补不足而被广泛应用，如酶-球磨处理和酶-化学处理。

综上，采用酶法（enzymatic method，E）、球磨辅助酶法（ball milling-assisted enzymatic method，BME）、碱辅助酶法（alkaline-assisted enzymatic method，AE）和球磨联合碱辅助酶法（ball milling combined with alkalineassisted enzymatic method，BMAE）提取淡竹叶来源的SDF，并对其得率、结构特性、功能特性进行测定、表征和分析，旨在探索提取高质量SDF的可行方法，为充分了解淡竹叶及扩大其在食品工业中的应用提供可靠参考。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂

淡竹叶 宁夏华柯农业生态开发有限公司；α-淀粉酶（2 100 U/g）、中性蛋白酶（50 U/mg） 上海阿拉丁生物技术有限公司；1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolinone，PMP） 北京索莱宝科技有限公司；葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖和甘露糖 上海源叶生物科技有限公司；KBr粉末（光谱级） 天津科密欧化学试剂有限公司；2,2’-联氮双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid)，ABTS） 上海泰坦科技股份有限公司；其他试剂均为分析纯。

1.2 仪器与设备

YXQM-2L行星球磨机 长沙米淇仪器设备有限公司；LC-15C高效液相色谱（high performance liquid chromatography，HPLC）仪 日本岛津公司；XDB-C18色谱柱 美国安捷伦科技公司；ZEN3600纳米激光粒度仪 英国马尔文仪器有限公司；DHR-1流变仪、Q2000差示扫描量热（differential scanning calorimetry，DSC）仪 美国沃特世公司；S-3400N扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM） 日本日立有限公司；Vertex70傅里叶变换红外光谱（Fourier transform infrared spectroscopy，FTIR）仪、D8 ADVANCE A25 X射线衍射（X-ray diffractometer，XRD）仪 德国布鲁克公司。

1.3 方法

1.3.1 淡竹叶SDF提取

将淡竹叶原料粉碎后过120 目筛，于4 ℃保存以备后续使用。分别用4种方法（E、BME、AE和BMAE）分别处理淡竹叶粉末，所得IDF和SDF分别标记为EIDF、BMEIDF、AEIDF、BMAEIDF和ESDF、BMESDF、AESDF、BMAESDF。

1.3.1.1 EIDF和ESDF提取

将20 g淡竹叶粉末与400 mL蒸馏水混合。依次添加α-淀粉酶（95 ℃反应30 min）和中性蛋白酶（60 ℃反应30 min）除去淀粉和蛋白质。酶解后，7 000 r/min离心悬浮液10 min，收集沉淀并冷冻干燥，得到EIDF。将上清液与4 倍体积95%乙醇溶液混合，4 ℃静置24 h，再次于7 000 r/min离心10 min，收集沉淀并冷冻干燥，得到ESDF。

1.3.1.2 BMEIDF和BMESDF提取

使用行星球磨机以250 r/min固定转速研磨230 min处理淡竹叶粉末，每次运行中正向和反向旋转均进行30 min，中间间隔10 min，球与粉末的质量比为5∶1。按1.3.1.1节处理球磨后的淡竹叶粉末，得到BMEIDF和BMESDF。

1.3.1.3 AEIDF和AESDF提取

将20 g淡竹叶粉末与400 mL 10 g/L NaOH溶液混合，于60 ℃水浴1 h进行水解。用1 mol/L HCl溶液调节pH值至6.5。按1.3.1.1节处理碱水解后的淡竹叶粉末，得到AEIDF和AESDF。

1.3.1.4 BMAEIDF和BMAESDF提取

根据1.3.1.2节球磨处理淡竹叶粉末后用1.3.1.3节方法对其进行碱水解。后续步骤与1.3.1.1节相同，得到BMAEIDF和BMAESDF。

1.3.1.5 淡竹叶IDF和SDF提取率计算

根据式（1）计算淡竹叶IDF和SDF提取率：

式中：m1为IDF或SDF质量/g；m0为淡竹叶粉末质量/g。

1.3.2 SDF表征

1.3.2.1 单糖组成测定

参考Qin Han’ao等[23]的方法并略作修改。用2 mL 2 mol/L三氟乙酸溶液于110 ℃水解20 mg SDF样品5.5 h后，用3 mol/L NaOH溶液中和，加入去离子水稀释至10 mL。将0.3 mol/L NaOH和0.5 mol/L PMP溶液添加到0.4 mL稀释水解液中，70 ℃水浴100 min后，用0.3 mol/L HCl溶液中和衍生化体系，并添加2 mL去离子水。用2 mL三氯甲烷萃取除去多余PMP，重复3 次。取上层水相用0.45 μm微孔膜过滤后，进行HPLC分析。标准单糖为葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖和甘露糖。

HPLC条件：XDB-C18色谱柱（4.6 mm×200 mm，5 μm）；流速0.8 mL/min；柱温30 ℃；流动相为0.02 mol/L磷酸钾缓冲液-乙腈（81∶19，V/V）；检测波长250 nm。

1.3.2.2 Zeta电位测定

用蒸馏水溶解SDF样品制备质量浓度为5 mg/mL的SDF样品溶液，用移液枪将SDF样品溶液缓慢加入样品池皿中，避免产生气泡。设置平衡时间60 s、温度25 ℃，采用纳米激光粒度仪测定SDF样品的Zeta电位。

1.3.2.3 流动特性测定

用蒸馏水溶解SDF样品制备质量浓度为50 mg/mL和60 mg/mL SDF样品溶液。选用直径40 mm平行板系统于1 000 μm间隙处使用流变仪测定并记录黏度，在剪切速率0.1～1 000 s-1、25 ℃条件下进行剪切实验[24]。

1.3.2.4 微观结构观察

用导电胶带粘取少量SDF样品并固定在真空喷涂机的样品台上，喷涂金层覆盖SDF样品。使用SEM在6 000 倍放大倍数下观察并拍照记录SDF的表面微观结构。

1.3.2.5 FTIR测定

通过FTIR确定SDF样品的官能团和化学键[12]。将1 mg SDF样品与100 mg KBr粉末均匀混合并研磨后压片，在4 000～400 cm-1波数范围内以4 cm-1分辨率扫描32 次进行分析。不含SDF样品的空白KBr片剂作空白对照。

1.3.2.6 XRD测定

将SDF样品过300 目筛后，使用XRD在工作电压40 kV和工作电流40 mA下，于2θ4°～40°扫描测定样品的衍射模式。

1.3.2.7 DSC测定

通过DSC分析SDF样品的热力学性质。精确称量4 mg SDF样品置于铝盘中，以不含SDF样品的空铝盘作为空白对照。使用流速50 mL/min的氮气作为载气，以10 ℃/min的升温速率在20～300 ℃范围内进行分析。

1.3.3 SDF功能特性测定

1.3.3.1 持水力（water holding capacity，WHC）测定

将0.5 g SDF样品与20 mL蒸馏水混合，于室温下静置24 h。9 000 r/min离心20 min后收集沉淀并称质量。按下式计算WHC：

式中：m0为原始SDF样品质量/g；m1为沉淀质量/g。

1.3.3.2 持油力（oil holding capacity，OHC）测定

将0.5 g SDF样品与5 mL橄榄油混合，于室温下静置24 h。9 000 r/min离心20 min后收集沉淀并称质量。按下式计算OHC：

式中：m0为原始SDF样品质量/g；m1为沉淀质量/g。

1.3.3.3 抗氧化活性测定

ABTS与过硫酸钾在室温避光条件下发生化学氧化反应得到ABTS阳离子自由基工作液。用乙醇调节ABTS阳离子自由基工作液浓度至其734 nm波长处的吸光度为0.700±0.020[25]。将400 μL ABTS阳离子自由基溶液与50 μL 1 mg/mL SDF样品溶液充分混合，室温避光孵育5 min后于734 nm波长处测定混合物的吸光度。测定SDF样品（400 μL乙醇与50 μL 1 mg/mL SDF样品溶液）和空白对照（400 μL ABTS阳离子自由基溶液与50 μL乙醇溶液）的吸光度。按式（4）计算SDF样品的ABTS阳离子自由基清除活性：

式中：A0为空白对照吸光度；A1为SDF样品与ABTS阳离子自由基反应后的吸光度；A2为SDF样品吸光度。

1.4 数据处理

2 结果与分析

2.1 不同方法对SDF提取率的影响

图1 不同处理方法下SDF和IDF的提取率Fig. 1 Extraction yields of SDFs and IDFs using different extraction methods

SDF含量超过10%的DF被认为品质较高，加工特性（如作为乳化剂、增稠剂、脂肪替代品和稳定剂）、物化特性（如提高溶解性、形成凝胶）和生物活性（如降低体质量、调节肠道菌群）优良[12,26-29]。研究表明每日DF摄入量的20%～30%应来自SDF[24]。因此，SDF/IDF的比率对DF的应用至关重要。如图1所示，BMAESDF提取率最高（（30.03±1.03）%），其次是AESDF（（26.83±1.46）%）、BMESDF（（9.55±0.09）%）和ESDF（（9.15±0.1）%）提取率较低。IDF含量（BMAE为（35.97±1.07）%、AE为（44.38±2.72）%、BME为（63.72±0.97）%、E为（66.32±1.41）%）与SDF含量的趋势相反。球磨能显著降低样品粒径，而粒径越小SDF含量越高[30]。碱处理能通过水解半纤维素和木质素之间的酯键及打破纤维素和半纤维素之间的共价键增加SDF含量[31]。此外，pH值是从半纤维素中提取SDF的关键因素，强碱性环境能破坏DF中的糖苷键从而影响SDF/IDF比率[32-33]。因此，AE和BMAE处理后SDF含量的显著增加可能是由于IDF键的连接被破坏和pH值的大幅波动，说明球磨和碱处理后部分IDF转化成SDF[17]，提高了SDF/IDF的比率。Wang Kunli等[16]的研究表明单独碱处理的SDF含量高于酶-化学处理，且与ESDF相比，BMESDF含量变化不大。因此，碱处理可能是AESDF和BMAESDF含量增加的主要原因。

2.2 不同处理方法对SDF物化特性的影响

2.2.1 SDF单糖组成分析

由表1可知，4种SDF均含有葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸、木糖，而甘露糖也在除ESDF的其他SDF中检出。这可能是由于球磨和碱处理打破了多糖分子间的糖苷键，形成了一种新的单糖[21]。葡萄糖、木糖和阿拉伯糖是半纤维素的主要成分[34]，它们在ESDF中含量丰富，表明半纤维素可能是ESDF的主要成分。BMESDF、AESDF和BMAESDF的主要单糖组分为半乳糖、木糖和阿拉伯糖，可能是联合处理后DF中的半纤维素和其他组分发生降解所致。BMESDF、AESDF和BMAESDF的阿拉伯糖、半乳糖含量增加。阿拉伯糖是SDF的主要单糖[35]，BMAESDF阿拉伯糖含量最高，与SDF提取率结果一致。此外，半乳糖含量的增加也可能是SDF产量增加的原因[33]。

表1 ESDF、BMESDF、AESDF和BMAESDF的单糖组成Table 1 Monosaccharide composition of ESDF, BMESDF,AESDF and BMAESDF

2.2.2 SDF表面电荷分析

图2 ESDF、BMESDF、AESDF和BMAESDF的Zeta电位Fig. 2 Zeta potential of ESDF, BMESDF, AESDF and BMAESDF

表面电荷与SDF凝胶能力和胶体系统稳定性有关[36-37]。负电荷产生的静电力使胶体系统中分子链充分延展并相互渗透形成分子间交联，因此更多的负电荷对应更强的凝胶形成能力[38]。如图2所示，ESDF的Zeta电位值最大（（-10.25±0.48）mV），其次为BMESDF（（-13.67±0.06）mV）、AESDF（（-18.17±1.25）mV）、BMAESDF（（-22.83±1.95）mV），4种SDF的Zeta电位值差异显著。BMAESDF的Zeta电位值最低，表明其可以诱导产生更多的静电吸引，具有更强的凝胶形成能力，这可能是球磨、碱处理和酶解共同作用的结果。

2.2.3 SDF流动特性分析

图3 50 mg/mL（A）和60 mg/mL（B）SDF的流动特性Fig. 3 Rheological properties of SDFs at concentrations of 50 (A)and 60 mg/mL (B)

黏度与SDF在肠道中形成凝胶有关，其能延迟葡萄糖和脂质吸收从而改善糖尿病和高胆固醇[39]。由图3可知，质量浓度对SDF的流动特性有重要影响，Gu Meidong等[27]的研究也证实了这一点。由图3A可知，当质量浓度为50 mg/mL时，在0.1～1 s-1剪切速率范围内，4种SDF的黏度变化不稳定；在1～1 000 s-1范围内，AESDF和BMAESDF的黏度呈近似线性下降，而ESDF和BMESDF变化较小。由图3B可知，当质量浓度为60 mg/mL时，所有样品均表现为随剪切速率增加而黏度降低，即典型的假塑性特征，也称非牛顿流体和剪切稀化行为[26,39]。缠结分子的减少和聚集体的破坏可导致剪切稀化行为[27]，因此缠结分子链数量的减少可能是高剪切速率区域黏度降低的原因。在低剪切速率区域，AESDF和BMAESDF的黏度较高，而ESDF和BMESDF的黏度相对较低；随着剪切速率的增加，AESDF和BMAESDF的黏度急剧降低，而ESDF和BMESDF的黏度变化较为缓慢，表明剪切速率对AESDF和BMAESDF黏度的影响较大，AESDF和BMAESDF具有较高的剪切敏感性。AESDF和BMAESDF的高黏度表明其内部结构中存在较多的分子链间缠结[29]，这可能是由于碱处理后SDF暴露出更多的疏水基团，这些疏水基团有利于分子间结合，形成多分子聚集体；分子链间的缠结增加，导致黏度显著增强，且随着剪切速率的增加，AESDF和BMAESDF的内部结构中分子链间的缠结被破坏，因此黏度急剧降低，表现出较高的剪切敏感性[40]。

2.2.4 SDF微观结构分析

如图4所示，4种SDF均为块状颗粒结构。ESDF表面相对平整致密且存在一些较小的不规则颗粒，可能是蛋白质和淀粉的残留物[41]。与ESDF相比，BMESDF变化较小，但其表面出现了一些孔隙，这可能是由于球磨产生的机械力破坏了SDF的宏观结构[17]。AESDF和BMAESDF相似，且与ESDF相比变化很大，其表面粗糙不平整且具有较多的空隙和裂缝，形成了疏松多孔的结构，这可能是由于碱处理打破了细胞壁结构[16]。疏松多孔的结构有助于SDF内部基团的暴露、比表面积的增加和活性成分的释放[12,28]。因此，AESDF和BMAESDF可能具有更高的WHC、OHC和ABTS阳离子自由基清除活性。

图4 放大6 000 倍下ESDF（A）、BMESDF（B）、AESDF（C）和BMAESDF（D）的SEM图Fig. 4 SEM images of ESDF (A), BMESDF (B), AESDF (C) and BMAESDF (D) at × 6 000 magnification

2.2.5 SDF的FTIR分析

如图5A所示，除了特定的吸收峰和峰值强度略有差异外，4种SDF具有相似的光谱分布。3 600～3 200 cm-1之间的吸收峰由O—H的拉伸振动引起，其主要存在于纤维素和半纤维素中[42-43]。3 200～2 800 cm-1之间的吸收峰由多糖和羰基的甲基或亚甲基的C—H拉伸引起[12,26,36]。1 741 cm-1处的吸收峰由醛基或酯基中芳香族骨架和C＝O的拉伸引起，其是木质素和半纤维素的重要组成成分，也广泛存在于蛋白质中[27]。1 633 cm-1处的吸收峰由—COOH伸缩振动引起，表明样品中含有糖醛酸[44]，与单糖组成结果一致。1 400 cm-1处的小峰对应于C—H的弯曲振动，可能源于木质素[12,36]。1 200～900 cm-1之间的吸收峰由吡喃葡萄糖中C—O—H和C—O—C的伸缩振动引起[42,45]。AESDF和BMAESDF在1 741 cm-1处吸收峰的消失可能是由于木质素、半纤维素和蛋白质被碱水解。上述结果表明，所有SDF均具有典型的多糖特征结构。

图5 ESDF、BMESDF、AESDF和BMAESDF的FTIR光谱图（A）、XRD图（B）和DSC图（C）Fig. 5 FTIR spectra (A) and XRD curves (B), and DSC curves (C) of ESDF, BMESDF, AESDF and BMAESDF

2.2.6 SDF的XRD分析

如图5B所示，所有SDF均在2θ19°～22°范围内有明显的结晶衍射峰，AESDF和BMAESDF在2θ32°附近存在较窄的衍射峰。纤维素的宏观结构由结晶区和无定形区组成，该结构通常被定义为纤维素I型结构[46]。2θ19°～22°范围内的衍射峰是纤维素的特征结晶区[47]。此外，半纤维素在2θ22.3°附近也有典型的衍射峰，该峰可能与纤维素峰发生重叠[48]。2θ32°附近的衍射峰是纤维素的无定形区域。以上结果表明，碱处理改变了SDF的晶体类型、产生了无定形区域，AESDF和BMAESDF具有典型的纤维素I型结构。此外，ESDF、BMESDF、AESDF和BMAESDF的结晶度分别为21.11%、36.94%、47.06%和44.38%。球磨增加了BMESDF的结晶度，这与Song Liwen等[49]的研究结果一致，他们推测球磨后结晶度的增加与半纤维素、木质素等成分的水解及IDF结构的破坏有关；然而该结果与湿法球磨处理的效果相反，Wen Ya等[48]研究发现使用湿法球磨处理样品使其结晶度下降，这可能由于球磨过程中研磨介质对DF的性质具有不同影响[50]。碱处理显著增加了AESDF和BMAESDF的结晶度，这与Zhang Yue等[51]的研究结果一致，碱处理后结晶度的增加可能是由于淀粉和蛋白质的去除或半纤维素的水解形成了无定形区域[43,48]。

2.2.7 SDF的DSC分析

DSC分析可以通过吸热峰温度和热流揭示SDF的热转变和热稳定性[12]。由图5C可知，所有SDF的吸热峰均在96.5 ℃附近，表明其在结构上具有高度一致性[52]。100 ℃附近的吸热峰主要是非结合水的蒸发和对水有吸附作用的果胶从结晶区到非结晶区的相转变而形成[12,53]。BMAESDF在吸热峰处的热流高于其他SDF，表明其水分含量更少，热稳定性更高[54]。放热峰出现在248～260 ℃范围内，其出现代表聚合物发生了持续热分解和氧化分解，以及挥发性产物的蒸发和消除[55]。250 ℃附近出现的放热峰是果胶热分解的结果[56]。

2.3 不同处理方法对SDF功能特性的影响

2.3.1 SDF的WHC分析

图6 ESDF、BMESDF、AESDF和BMAESDF的WHC（A）、OHC（B）和ABTS阳离子自由基清除活性（C）Fig. 6 WHC (A), OHC (B), and ABTS radical cation scavenging activity (C) of ESDF, BMESDF, AESDF and BMAESDF

WHC是指在施加外力的条件下SDF形成水基胶体后捕获和固定水的能力[57-58]，其能减少食品脱水、防止食品收缩，有助于增加饱腹感和减少食物摄入[37,59]，与DF质量密切相关。由图6A可知，AESDF（（4.71±0.12）g/g）和BMAESDF（（4.86±0.1）g/g）的WHC较高，其次是BMESDF（（2.45±0.16）g/g）和ESDF（（1.78±0.07）g/g）。WHC的变化受粒径、结构、密度、水结合位点的影响。BMESDF的WHC增加可能是由于球磨减小了SDF粒径、增加了比表面积使其暴露出更多亲水基团[30]。AESDF的WHC提高可能是由于碱处理去除了部分纤维素、半纤维素和木质素等IDF成分使纤维的内部结构更加疏松多孔[29,51]。BMAESDF的WHC提高则是物理（球磨）、化学（碱处理）处理共同作用的结果。

2.3.2 SDF的OHC分析

OHC是指SDF吸收脂肪的能力[60]，其能减少加工过程中的脂肪损失、稳定高脂肪食物、降低体内胆固醇水平[21,28,60]。由图6B可知，AESDF（（2±0.04）g/g）的OHC最高，其次是BMESDF（（1.69±0.13）g/g）和BMAESDF（（1.65±0.14）g/g），ESDF（（1.36±0.05）g/g）最低。联合处理后SDF的OHC较ESDF显著提高，与WHC相似。表面性质（如比表面积、疏水性）和结构性质均对OHC有重要影响[59]。增加的表面疏水基团和疏松多孔的结构可能促进了BMESDF和AESDF的OHC提高；而BMAESDF的OHC低于AESDF，可能是物理和化学处理之间复杂的相互作用导致SDF表面疏水基团部分减少，使其OHC略微降低。

2.3.3 SDF的抗氧化性分析

SDF清除ABTS阳离子自由基的理论基础是其氢原子与自由基结合使自由基更稳定并终止进一步反应。由图6C可知，AESDF的ABTS阳离子自由基清除活性（（53.41±1.27）%）最高，其次是BMAESDF（（49.40±0.93）%）、ESDF（（43.46±0.55）%）和BMESDF（（36.71±1.51）%），表明碱处理能提高SDF的ABTS阳离子自由基清除活性，而球磨能降低其ABTS阳离子自由基清除活性。由于木质素和黄酮类化合物具有相似的合成途径，且碱处理引起的木质素结构破坏会使酚类化合物暴露[17]，酚类化合物在碱性条件下易解构并释放多酚[32]，因此AESDF和BMAESDF的ABTS阳离子自由基清除活性增加可能是由于多酚的释放增加。BMESDF的ABTS阳离子自由基清除活性显著下降可能由球磨过程中球与球磨罐内壁高速碰撞产生的高温破坏了暴露的酚类化合物[61]而造成。

3 结 论

采用4种不同处理方法（E、BME、AE和BMAE）从淡竹叶中提取SDF（ESDF、BMESDF、AESDF、BMAESDF）并评估其物化和功能特性。结果表明：所有SDF均含有葡萄糖、阿拉伯糖、半乳糖、葡萄糖醛酸和木糖，且BMESDF、AESDF和BMAESDF中形成了甘露糖。ESDF和BMESDF的晶体类型相似，而AESDF更接近BMAESDF。4种SDF中，BMAESDF的提取率（（30.03±1.03）%）、WHC（（4.86±0.1）g/g）、Zeta电位（（-22.83±1.95）mV）和热稳定性（热流高）最为突出，具有疏松多孔的结构和较好的ABTS阳离子自由基清除活性（（49.40±0.93）%）。综上所述，BMAE可作为提取淡竹叶中高品质SDF的有效方法，为淡竹叶资源的深度开发利用提供一定理论基础。