羔羊大肠杆菌病的诊断要点及防治措施

司天桃，张梦圆，李文彩，王克文，李 文

新疆维吾尔自治区哈密市畜牧工作站（哈密市农村生态工作站），新疆哈密 839000

大肠杆菌病是由致病性大肠杆菌感染而引起的一种急性细菌性传染病[1]，羔羊感染后临床特征主要表现为腹泻、败血症。成年羊感染后，大多呈局部性感染，给养殖者造成严重的经济损失[2]。

1 羔羊大肠杆菌病的发生和传播

大肠杆菌是一种中等大小的革兰氏阴性杆菌，属于肠杆菌科埃希氏菌属，该菌对外界环境的抵抗力较弱，一般常用的消毒药剂或55 ℃加热15 min 均可将其杀死[3]。此病原菌大量存在于外界环境中，此病的发生与气候环境骤变、营养短缺、圈舍潮湿、脏乱等有关。大肠杆菌是条件性致病菌，一般不显示致病性，只在气候骤变、忽冷忽热等环境条件刺激下，该病原菌在机体内大量繁殖，加之羊只抵抗力下降，引起内源性传染。大肠杆菌病也可经过消化道、产道或脐带感染[4]。大肠杆菌菌型复杂多样，一种动物可以感染不同血清型的大肠杆菌，不同地区的同一品种的羊只感染的菌型也有所差异，大多数动物的特定疾病都是由1个至多个主要血清型的大肠杆菌所致，因其复杂多样，又具传染性，若得不到及时防控，会给养殖户造成巨大的损失[5]。

2 诊断要点

2.1 临床诊断

根据临床特征，该病分为败血型和肠型。

1）败血型主要是大肠杆菌侵入血液中，并大量繁殖，引发菌血症，继而又产生大量毒素，毒素随血液至全身组织器官，对脏器、器官功能造成损害，引发败血症。败血型主要发生于2～6 周龄的羔羊，潜伏期可长可短，主要取决于羔羊的单次感染量和实际抵抗力。感染后的羔羊主要表现为体温升高，达41～42 ℃，精神萎靡，视力倒退，头常向一侧倾斜，喜独卧，磨牙，口吐白沫，关节疼痛，呼吸困难，进而导致昏迷，通常发病后24 h 内死亡[6]。

2）肠型主要为大肠杆菌在消化道内大量繁殖，肠道微生物菌群平衡失调，产生毒素，肠黏膜破损脱落，出现炎症[2]。该型多发于2～8日龄的新生羔羊。发病初期，病羊体温可升高至40～41 ℃，食欲下降，随之出现腹泻，呈灰白色稀糊状，并夹带有气泡，偶见混有血液。随疾病的变化发展，肠壁较薄，肠黏膜脱落，血管极易破裂，粪便中带血液。病羊表现为腹痛、精神萎靡，严重虚弱脱水、喜卧、有时出现痉挛，不能站立。如未得到及时救治，可在发病后24～48 h 内死亡，死亡率高达50%[7]。

2.2 病检特点

败血型主要在羔羊的胸、腹腔和心包内出现大量纤维素性渗出液[8]，肘、腕关节肿大，且内有纤维素性脓性絮片和混浊的滑液；脑膜充血且伴有少许出血，常有脑沟脓性渗出物。肠型主要病因在消化道，真胃内乳凝块发酵，肠黏膜水肿充血、出血，小肠黏膜内混有血液和气泡，肠系膜淋巴结切面肿胀充血，伴有出血。可见纤维素化脓性关节炎，肺瘀血或有轻度炎症。

2.3 实验室诊断

1）样品采集处理。在无菌条件下，采集病亡或发病羔羊的脏器、粪便组织，储藏备用。挑取适量采集的样品组织，分别进行分离培养，观察菌落生长情况及其特征。一般培养基平板上会出现表面光滑、湿润，呈半透明状、明显凸起的黄色或者白色的圆形菌落。再次挑取培养生长的单个菌落进行纯化培养，备用。

2）镜检涂片。在无菌条件下，分别挑取适量采集的样品组织，分别制成涂片，并进行革兰氏染色，然后镜检观察涂片，可发现病死和发病羔羊的脏器、粪便组织涂片中存在大量革兰氏阴性杆菌。

3）病菌16S rRNA 序列分析。对分离培养备用的病菌进行DNA 提取，并将分离菌株DNA 作为模板，设计引物和序列，确定PCR 反应体系，进行PCR扩增。经琼脂糖凝胶电泳检测PCR 扩增产物后，送生物工程有限公司进行测序。然后，利用BLAST 分析测序结果，构建系统进化树，并对该病原菌的同源性进行比对。

4）LAMP 技术。蔡树东等[9]发现环介导等温扩增技术（LAMP）是一种恒温核酸扩增技术[10]，它与传统的PCR 技术相比，具有时间短、灵敏性高、特异性强、产物易检等特点。该技术可通过2 对特异性引物对目的序列的6 个区域退火杂交，利用BstDNA聚合酶的催化作用，在恒温（60～65 ℃）条件下，温育30～60 min，实现对目标序列的批量扩增[11]。该技术可直接通过肉眼观察其是否有白色焦磷酸镁沉淀产生来判断该病菌，也可通过添加羟溴化乙淀（EB）、基萘酚蓝（HNB）、钙黄绿素或SYBRGreenI 等荧光染料进行显色观察来判断。

3 防治措施

3.1 加强科学饲养管理

科学的饲养管理技术是防治大肠杆菌病的有效方法。根据羔羊的营养需求，合理喂养，制定科学的饲养标准和方法，以促进羔羊健康和正常发育，防止因营养缺乏而发病。加强饲养卫生，建立良好的生长环境，做好圈舍清洁卫生。圈舍内温度过低过高，潮湿，氨气、二氧化碳浓度过高，都能降低羔羊皮肤黏膜的抵抗力而诱发此病，因此圈舍内一定要做到通风良好、空气清爽，光照充足，冬季保温防寒，夏季凉爽防暑，防止此病发生。饲养初生羔羊，除应保证圈舍有适当的温度外，要尽早使其吃到初乳，提高幼羔羊母源抗体和免疫球蛋白的水平，增强幼羔羊抗病能力[12]。

3.2 做好引进种羊的检疫、防疫工作

自繁自养不仅可以避免购买带病羊只，也有利于羔羊的饲养，引进种羊不能从疫区购买，确实需要引入种羊时，要对买入的羊只进行隔离检疫1～2个月，确定健康无病后，才能与原来的羊只进行混养；隔离检疫期间，应针对此病进行预防接种，以提高羊只免疫力。

3.3 建立合理的防疫制度

羊场（羊圈）应建设在远离公路、村镇、工厂、学校的地方；羊场内的生产区和生活区应分开；入口应设消毒池和更衣室，羊场工作人员和饲养员需更换工作服和鞋后才可进入生产区。饲养员要使用固定的用具和设备，不能混用。工作服、鞋和用具要经常消毒清洗，保持清洁。工作人员要定期及时更换消毒池内的消毒药水，保证有效消毒浓度。禁止在生产区屠宰、解剖病羊，随意乱扔、乱放死亡病羊。

3.4 进行圈舍消毒制

羊圈消毒的目的是为了杀灭外界环境中存在的各种病原体，也是切断病原菌传播途径的一项有效措施。因此，在进行羊圈消毒时，要根据圈舍的大小、墙壁、地面的结构、病原体的种类及其对外界环境的抵抗力，选择适用的消毒药物种类、消毒方法及消毒药的剂量，然后均匀地喷洒羊圈的墙壁、护栏、地面等。消毒完毕后要用清水清洗饲料槽，以除去消毒药味。

3.5 按时预防接种疫苗

在母羊怀孕期或羔羊出生后，按接种程序接种相关疫苗，间接或直接使羔羊获得免疫抗体，从而防止病菌的感染和传播。

3.6 做好检疫

掌握羊群健康水平、了解羊群疫情动态和防治是检疫工作的主要目的。检疫人员要对原有羊只进行定期检疫，从外地引进羊只时应进行临时检疫（变态反应、血清学试验及临床观察等）。及时调查本地民间或牧场羊只中的疫情，有助于分析此病的流行趋势，这些对及时做好大肠杆菌病防疫工作十分重要。

3.7 阻断传染源

当发生羔羊大肠杆菌病时，要及时阻断传染源，创造良好的圈舍环境条件。首先，应做好羊群圈舍环境消杀工作，勤通风、勤打扫，及时清理圈舍中的粪便，避免粪便等排泄物污染饲料和饮水，所有设备及羊只的活动场所及时进行定期消毒。同时，为了避免出现病原菌对消毒剂的抗性，应交替使用不同消毒剂。其次，在养殖过程中要勤观察，若发现疑似病例，应将其隔离并对其给予治疗，及时对圈舍进行彻底消毒，避免扩大疫情。

3.8 病羊的尸体处理

掩埋、焚烧、加工利用等是处置病羊尸体的有效方法，可根据其各自优缺点、具体情况和处置条件进行选择。

3.9 病羊粪便的处理

病羊的粪便中通常含有大量病原体，必须妥善处理。病羊粪便的处理方法主要有烧毁、化学药品处理和堆积发酵。其中，经过数个月的堆积发酵后，可消灭病原体且不损耗肥料，因此，堆积发酵法最为常用。烧毁或化学药品处理，既要花费经费，又会损失大量有价值的肥料，并且通常不能消灭病原体，因此很少使用此方法。

4 药物治疗

治疗该病要做到早诊断、早治疗。常用药物有：氯霉素15 mg/kg，静脉或肌肉注射，2 次/d；新霉素0.6 万单位/kg，内服或肌注，2～3 次/d；多粘菌素，1 万单位/kg，肌肉注射，2 次/d；黄连素，内服0.5～1.0 g，3 次/d；硫酸黏菌素预混剂，内服0.005～0.010 g/kg，2～3 次/d。同时，应注意补充葡萄糖和维生素，保护胃肠黏膜、调整胃肠机能等。此中药方也可治愈该病：生山药50 g；白术15 g；黄连、茯苓、白头翁、诃子肉、白芍各10 g；秦皮、山萸肉各12 g；甘草6 g；干姜5 g；煎汁300 mL，每只病羔羊灌服10 mL，2 次/d，连用3 d。

5 结 语

想要有效防治羔羊大肠杆菌病，必须掌握其发病原因和传播及诊断要点，根据临床诊断或实验室诊断，准确诊断该病。结合实际情况，采用“综合防治”措施，加强检疫和饲养管理、按时接种疫苗、做好圈舍消毒、做好病羊尸体和粪便的处理等；严禁引进病羊，阻断传染源，防患于未然。通过以上防治措施，可有效防治羔羊大肠杆菌病的发生与传播。但因此病抗药性较强，在药物治疗前应进行病菌药敏试验，以达到更高的治疗效果。