犬传染性肝炎的诊断与防治

杨美兰，缪祥虎，郑广云，贾柱元

1.云南省曲靖市兽药饲料监察所，云南曲靖 655000；2.云南省曲靖市畜禽改良工作站，云南曲靖 655000

随着生活水平的不断提高，饲养宠物的人群也越来越多。犬的传染性疾病个体发病率也随之增多，而传染性肝炎较为常见和多发，给养犬业造成了极大的危害。因此，对犬传染性肝炎作出诊断并进行综合治疗，对于控制病情的发展、减小养犬业损失有重要的意义。

1 病原与流行病学

犬传染性肝炎（infectious canine hepatitis，ICH）是犬的一种急性、高度接触性败血性传染病，由感染犬传染肝炎病毒（ICHV）引起。犬传染性肝炎病毒又称犬腺病毒（canine adenovirus，CAV），属腺病毒科、乳腺病毒腺病毒属，呈球形，无囊膜，根据血清学可分为犬腺病毒I 型和腺病毒II 型[1]。其中，CAV1 引起多器官出血，以肝脏出血病变最明显，而CAV2 主要引起呼吸道发生病变。犬腺病毒易在犬肾和睾丸细胞内增殖，也可在猪、豚鼠和水貂等的肺和肾细胞中有不同程度增殖，出现细胞脓肿变圆、聚集成葡萄串样典型细胞病变，也可产生蚀斑。感染细胞内常有核包涵体，核内病毒粒子呈晶格状排列[2]。

该病毒在低温条件下抵抗力较强，能长时间存活，对热不耐受，60 ℃3～5 min 即可灭活；对乙醚、氯仿有耐受性，在室温下能抵抗95%乙醇达24 h；苯酚、碘酊、氢氧化钠和甲醛能有效杀灭该病毒。犬传染性肝炎对犬、狐（银狐、红狐）和浣熊易感性较强，可发生于任何季节，但春初、秋末、冬季发病率相对较高。任何种类、性别和年龄阶段的犬都能发生该病，1 岁以内的幼犬病死率最高。病犬及带毒犬是主要传染源。在感染的急性型阶段，病毒分布于犬的全身各组织，通过分泌物和排泄物排出体外污染周围环境。病愈犬虽有终身免疫力，但6 个月后仍能从其尿液中检测到犬腺病毒[3]。

2 临床症状与病理变化

患传染性肝炎的病犬，按其症状发生的程度分为最急性、急性、慢性和无典型症状型4 种，按其临床症状表现分为肝炎型和呼吸型2 种[4]。

肝炎型主要由犬腺病毒I 型病毒引起。病犬多表现出精神沉郁，食欲下降，饮欲增强，腹痛、腹泻、呕吐，粪便中带血，黏膜苍白或者轻度黄染，偶尔可见齿龈发生出血。肝脏损伤严重时会出现黄疸，黏膜可见大面积黄染。急性病犬体温升高达40 ℃以上，体温呈马鞍型变化曲线，出现畏寒，结膜发炎，眼、鼻可见浆性黏性分泌物。犬传染性肝炎病毒进入眼房后，能在角膜表面的内皮细胞中生长，产生包涵体并扩散到内皮细胞中，从而导致病犬或康复犬单眼或双眼出现暂时性角膜浑浊，引起“蓝眼病”的临床症状。肝炎型病犬多出现蛋白尿或胆红素尿，呈现呼吸变快、心搏动增强等症状。较轻的病例无典型临床症状，只见食欲下降、畏寒、体温稍高，持续时间一般2～3 d。肝炎型病犬最突出的病理特征是病犬出现不同程度的皮下水肿，多器官出现充血、出血，其中，消化道和胆囊出血明显。肝脏明显肿大，切面外翻，淤血，呈紫黑色，表面许多暗红色斑点；胆囊肿大，胆汁变黏稠，胆囊壁水肿、增厚、出血。经组织学观察，肝脏出现坏死病灶，肝细胞变性肿大，明显可见包涵体，肝窦发生萎缩；胆囊上皮细胞发生变性、坏死和脱落，固有层出现水肿，黏膜肌层发生萎缩变形；大脑血管周围出血，内皮细胞大量增生，核内可见包涵体[5]。

呼吸型主要由犬腺病毒II 型病毒引起。病犬常出现明显的呼吸道症状，体温多高达41 ℃左右，咳嗽，呼吸加速，流浆液性或脓性鼻液。随着病程的发展，淋巴结和扁桃体发生肿大，心率明显加快，多伴有咽喉炎症状。在体温上升期，血检可见白细胞减少，血细胞沉降率加快，血凝时间延长等变化。最突出的病理变化是体温升高明显，可视黏膜出现潮红，扁桃体和淋巴结肿胀、充血，唾液腺、支气管、肺脏等器官肿大、出血。

3 诊断技术及要点

3.1 临床症状诊断

病犬在发病早期可检测出蛋白尿或胆红素尿，血清中谷丙转氨酶、谷草转氨酶、白蛋白、乳酸脱氢酶和肌酸激酶均明显高于参考范围，随着病程的发展出现“蓝眼”病或在组织内皮细胞观察到包涵体[6]。依据出现的这些典型临床症状和剖检病理变化对该病的确诊有一定的诊断意义。

3.2 病毒分离鉴定

犬传染性肝炎病毒多存在于病犬扁桃体、肝脏、脾脏等组织器官中，无菌采集这些器官用无血清DMEM 制成组织悬液，离心后取上清液接种于MDCK 细胞，37 ℃恒温培养3～5 d，出现典型的细胞病变即可确诊。

3.3 酶联免疫吸附试验

采集分离被检犬血清，用犬传染性肝炎病毒免疫犬获得的血清为标准阳性血清，无犬传染性肝炎病毒的犬血清为标准阴性血清，按照酶联免疫吸附试验的操作步骤进行检测。该方法不仅可用于未接种犬传染性肝炎疫苗病犬的诊断，还可以检测免疫接种疫苗犬的抗体保护水平。

3.4 免疫酶组织化学法

采集病犬肝脏、扁桃体等新鲜组织，按常规方法制作成冰冻石蜡切片，过氧化氢-甲醇溶液37 ℃20 min 去内源酶，用胰蛋白酶溶液消化处理2 min以暴露抗原，漂洗、封闭，加标准血清，漂洗后再加酶标记物，漂洗后苏木精衬染，脱水、封片，观察到被检组织细胞胞浆、偶见细胞核呈黄色至棕褐色着染，即可判定犬传染性肝炎病毒抗原阳性。

3.5 犬传染性肝炎快速检测卡检测

犬传染性肝炎快速检测卡是对犬传染性肝炎方便快捷的一种诊断方法，分为抗原检测试纸和抗体检测试纸，在临床运用中较多用抗原检测试纸来进行检测诊断。传染性肝炎检测方法：用棉签涂抹眼、鼻，口腔流液或伸入肛门内直肠进行采样，插入装有缓冲液的样品管内，混匀成待检液，用传染性肝炎检测卡做样品检测，T 线和C 线同时出现则为阳性，只出现C 线为阴性。该方法是临床上快速检测犬传染性肝炎的重要检测方法。

4 防治措施

1）主要遵循抗病毒、消炎、保肝、补液、解毒的原则进行对症治疗。该病无特效药，主要采取对症治疗的方法。发病初期，给病犬注射犬传染性肝炎特异性高免血清抑制病毒扩散，每天注射葡萄糖盐水，配合使用抗生素、消炎药抗感染治疗，辅助使用三磷酸腺苷、辅酶A、肌苷、干扰素等增强机体的抵抗力，出现出血症状可使用安络血或止血敏对症治疗，高热病犬肌注板蓝根注射液或安乃近注射液，使用肝复肽等药物进行保肝治疗。

2）大量的研究报道也表明，中西医结合治疗法有较好的疗效。在中药方剂中，防风、荆芥、车前子、白菊花、蔓荆子能消风明目，清热解毒为主，川芎、当归尾、红花活血散瘀消肿为辅，龙胆草、黄芩能泻肝火为佐、白芷、厚朴除热湿散肿为使，以上诸药合用，共同起到散风清热、消肿明目的作用。吴登堃等[7]运用中成药明目地黄丸灌服治疗犬传染性肝炎，经过4年的临床试验，该疗法疗效明显、确切，安全，操作方便。

3）加强饲养管理，增强犬的抗病机能。犬传染性肝炎的传播途径主要是直接接触传染，病犬及治愈犬要单独饲养隔离半年以上。定期对犬舍及周围环境进行消毒，按时进行相关疫（菌）苗免疫接种。

4）免疫预防接种。该病没有特效药，及时进行预防接种能取到较好的保护作用。一般推荐对6 周龄或6 周龄以上的幼犬进行首次免疫，连续接种3次，每次间隔3 周，可获得较好的免疫保护效果。