肿瘤标志物联合TCT与HPV DNA检测对子宫颈癌及癌前病变的诊断价值

孙俊

受到环境等因素影响，恶性肿瘤发病率在我国日趋上升，极大影响了患者的生命健康。临床常见恶性肿瘤为子宫颈癌，原发部位为子宫颈，50～55 岁为高发年龄段，患病早期无典型症状，随着疾病进展，部分群体出现排液、接触性出血及阴道流血等症状，流行病学显示，此病在我国的患病率为20%，发病率在女性恶性肿瘤中位居第2 位[1-2]。该疾病不仅使患者的生命安全受到较大的影响，同时加重家庭、社会的负担，为控制子宫颈癌的发生与发展，保护女性生殖健康，选择高效、科学的手段积极筛查宫颈癌及癌前病变，及时干预，提高预后质量，对保障患者的身体健康具有重要的意义。李丽娟[3]学者认为，目前筛查子宫颈癌及癌前病变的常见方式为液基薄层细胞学检查（thin-prep cytology test，TCT），该方法借助显微镜下对癌变的宫颈细胞进行直观显示，具有操作简便、图像情绪及细胞分布均匀等优势，但实际检测时易受多因素干扰，易有误诊或漏诊等情况出现，影响检测结果的准确性。鉴于此，本文选择莱州市妇幼保健院2019 年5 月—2020 年5 月收治100 例妇科患者为研究对象，分析子宫颈癌及癌前病变患者行联合检测的价值，报告如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料

回顾性研究，样本取自本院2019 年5 月—2020 年5 月收治100 例妇科患者，其中宫颈上皮内瘤变（50 例）为甲组，年龄23～54 岁，均值（38.62±4.15）岁；身体质量指数（body mass index，BMI）19～26 kg/m2，平均BMI（23.58±0.62）kg/m2；其中未婚30 例、已婚20 例；学历：初中及以下17 例，高中18 例，大专及以上15 例；其中子宫颈癌（50 例）为乙组，年龄24～55 岁，平均（38.84±4.26）岁；BMI 值18～25kg/m2，平均BMI（23.23±0.51）kg/m2；学历：初中及以下18 例，高中12 例，大专及以上20 例；其中未婚29 例，已婚21 例。另择取同期收治的50 名健康体检者为丙组，年龄25～57 岁，平均（38.89±4.34）岁；BMI 18～24 kg/m2，平均BMI（23.12±0.24）kg/m2；学历：初中及以下17 例，高中13 例，大专及以上20 例；其中未婚27 例，已婚23 例。3 组基线资料比较差异无统计学意义（P＞0.05）、有可比性。本研究经医院伦理委员会审批同意。甲组及乙组纳入标准：（1）经检查患有妇科疾病。（2）呈阴道流血、排液及接触性出血等临床表现。（3）意识清晰、能够与医师正常交流者。（4）年龄20～55 岁。（5）相关临床资料无遗漏者。（6）对本研究知情且同意者。甲组及乙组排除标准：（1）心肝肾功能异常。（2）患有免疫系统疾病、凝血功能异常。（3）伴有传染性疾病、其他恶性肿瘤。（4）存在可能影响研究结果的妇科疾病者。（5）依从性差者。

1.2 方法

入院后所有对象均肿瘤标志物、TCT 与人乳头瘤病毒脱氧核糖核酸（human papillomavirus deoxyribonucleic acid，HPV DNA）检测，具体检测方式如下：（1）肿瘤标志物检测：采集受检者晨间、空腹时肘部静脉血3 mL，按照台式离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司，TGl6-ws 型）按照4 000 r/min 速率持续离心3 min 分离血清，利用化学发光法检测糖类抗原CA125（carbohydrate antigen 125）、鳞状细胞癌相关抗原（squamous cell carcinoma antigen，SCCA）、癌抗原15-3（cancer antigen 15-3，CA15-3）、细胞角质蛋白19 片段抗原21-1（cyto-keratin 19 fragment antigen 21-1，CYFRA21-1），严格按照试剂盒说明书操作。（2）TCT 检测：在受检者宫颈管鳞柱交界处、利用专用取样刷采集疑似病变区域的标本，装有细胞保存液的小瓶中浸入标本（医师应于规定时间内完成检测），液基薄层细胞制片分析系统（陕西高源医疗器械服务有限公司，McT-Ⅱ型）实行程序化处理，利用巴氏染色法处理后、行晾干、封片操作。（3）HPV DNA 检测：采用无菌棉拭子插入受检者宫颈口提取HPV DNA，均匀、用力旋转5 圈，取出棉拭子放入无菌试管，定性聚合酶链式反应（polymerase chain reaction，PCR）基因扩增仪（德国，型号Biometra 系列）完成扩增，依次进行杂交、洗膜及显色等过程。（4）病理活检：由专业医师进行阴道镜检测，取材处为宫颈内可疑位置，若无则选3、6、9 及12 点位置，所采集标本利用甲醛固定后，由2 名临床经验较丰富的病理医师共同判别诊断结果。检测异常结果涉及5 种，即为：轻度宫颈上皮内瘤变（mild cervical intraepithelial neoplasia，CIN Ⅰ）、中度宫颈上皮内瘤变（moderate cervical intraepithelial neoplasia，CIN Ⅱ）、重度宫颈上皮内瘤变（severe cervical intraepithelial neoplasia，CIN Ⅲ）、子宫颈癌（cervical cancer，CIS）。

综合判定患者的病情，所有对象均行肿瘤标志物（具体涉及CA125，阳性判断标准＞35 IU/mL；SCCA，阳性判断标准＞1.5 ng/mL；CA15-3，阳性判定标准＞31.3 IU/mL；CYFRA 21-1，阳性判定标准＞2.08 ng/mL）联合TCT 与HPV DNA（每批试验设HPV16 阳性对照、阴性对照）检测，对于疑似病例，接受病理活检，再次明确病情。联合诊断的判断标准：若肿瘤标志物、TCT 与HPV DNA 检测项目，三者任意一项检测结果为阳性，则可判定最终结果为阳性[4]。

1.3 观察指标

肿瘤标志物水平：记录3 组CA125、SCCA、CA15-3、CYFRA21-1。

不同检测方法的阳性诊断结果：记录肿瘤标志物、TCT、HPV DNA 检测方法检出CIN Ⅰ、CIN Ⅱ、CIN Ⅲ、CIS 的例数。

诊断效能：统计灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值[5]；灵敏度=真阳性例数/（真阳性例数+假阴性例数）×100%、特异度=真阴性例数/（真阴性例数+假阳性例数）×100%、阳性预测值=真阳性例数/（真阳性例数+假阳性例数）×100%、阴性预测值=真阴性例数/（真阴性例数+假阴性例数）×100%、阳性检出率=（真阳性例数/总例数×100%）。

1.4 统计学方法

数据经Excel 表整理，所有获取文本数据应用SPSS 24.0统计学软件，计量资料使用（）表示，行t检验；计数资料使用n（%）表示，开展χ2检验。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 肿瘤标志物水平

与丙组比较，甲组、乙组CA125、SCCA、CA15-3、CYFRA21-1 指标更高，且乙组高于甲组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 肿瘤标志物水平比较（）

表1 肿瘤标志物水平比较（）

注：t1 为甲组、乙组比较，t2 为甲组、丙组比较，t3 为乙组、丙组比较。

2.2 不同检测方法的阳性诊断结果

各检查方法比较HPV DNA 检测阳性率差异无统计学意义（P＞0.05）；100 例妇科患者经病理检查发现，CIN Ⅰ有22 例，CIN Ⅱ、Ⅲ有45 例，CIS 有33 例；联合检测阳性率高于单项检测阳性率，但差异无统计学意义（P＞0.05），见表2。

表2 不同检测方法的阳性诊断结果比较[例（%）]

2.3 诊断效能

各单项检测比较阴性预测值差异无统计学意义（P＞0.05）；与各单项检测诊断效能比较，HPV DNA 检测诊断效能更高；联合检测灵敏度、特异度、阳性预测值高于各单项检测，差异有统计学意义（P＜0.05），见表3。

表3 诊断效能比较（%）

3 讨论

现阶段较常见妇科恶性肿瘤为子宫颈癌，具有患病率高、病程长及预后差等特征，经流行病学显示，此病在女性生殖器官中的患病率位居首位，具体病因尚未明确[6]，可能与性生活频繁、早育、生活习惯及遗传等方面有关且包皮垢中的胆固醇经细菌作用后向致癌物质转变、也是引起子宫颈癌的重要原因，患病后患者呈阴道流血、阴道排液等不适程度，若疾病发展到晚期，则表现为肛门坠胀、下肢肿痛及尿频尿急等，增加尿毒症发生风险，甚至危及生命，故早期提供针对性诊治措施有积极作用[7-8]。与普通妇科疾病对比，子宫颈癌以及癌前病变患者的临床指标往往会出现较大的变化，所以发生不良结局的风险比较高。所以重点研究该病检出率对于保证患者的预后质量，延长存活时间意义重大。

根据大量临床数据显示：子宫颈癌病例5 年存活率不足70%，若子宫颈癌于早期阶段被筛查出来，则患者存活率可达90%[9]。近几年，如何有效筛查子宫颈癌及癌前病变成为人们研究的热点。

有文献报道，肿瘤标志物、TCT 与HPV DNA 检测子宫颈癌及癌前病变能提高诊断准确性[10-11]，具体分析发现：（1）CA125、SCCA、CA15-3、CYFRA21-1 为常见的肿瘤标志物类型，其中SCCA 是鳞状细胞癌较特异的标志物，其判断病情时，患者年龄、妊娠及月经周期等因素均不会影响其表达量，机体有鳞癌病症出现，则SCCA 编码的酸性产物合成产生亢进性、最终导致SCCA 在血清中的含量升高；正常群体中，机体内无法对CA125 含量检测，其在胚胎发育形成抗原物质中发挥着重要作用，若机体有子宫颈癌变情况发生，则可对CA125 含量检测[12]；目前较常见糖链抗原类标志物为CA15-3，机体患有子宫颈癌疾病后，此指标在血清中的含量明显升高；CYFRA21-1属角蛋白家族成员，广泛分布于正常组织表层，若机体有恶性上皮病变出现，激活蛋白酶加快细胞降解速度，且血液中融入大量细胞角蛋白片段、引起此指标明显升高[13]；子宫颈癌病例体内常常伴有过高的CA125 以及SCCA 等肿瘤因子水平，该情况贯穿于治疗全程，所以监测肿瘤因子水平不仅能够有效筛查子宫颈癌以及癌前病变，同时还对于治疗该类疾病具有重要的指导意义。（2）TCT 检测是新型、高效的宫颈疾病检测手段，具有较高的灵敏度、特异度，通过检测制作的薄片清晰显示细胞结构，有效识别、归类相关细胞，尽早发现宫颈上皮内瘤病变，以薄层液基细胞学为基点、切实检测宫颈细胞，通过分类判别细胞学、为子宫颈癌前期诊疗提供病理参考数据，该项检测方式为制片技术的重大改革，其完善了常规巴氏细胞学检测的取材方式和标本处理步骤，不仅提高了标本的质量，同时还降低了漏、误诊率。该手段按固定手法取材、旋转式刷拭，确保取材方式的有效性，刷头全部放在细胞保存液、避免细胞标本丢失，尽早发现异常细胞、属于筛查子宫颈癌较理想的技术。宫颈外口等部位的细胞能够利用TCT 手段充足获得，且涂片细胞分布良好，细胞形态、边缘清晰。但实际对宫颈样本采集时，取材方式、制作薄片过程、诊断医师水平等因素均会引起临床误差，影响最终检测结果[14]；所以在临床实际工作中，人们较多选择TCT 技术联合其他方式进行综合诊断。（3）HPV DNA检测是目前诊断子宫颈癌的常见方式，因机体持续感染人乳头瘤病毒（human papilloma virus，HPV）是引起子宫颈癌变的重要因素，HPV 感染引起的疾病发展通常经过潜伏感染期、亚临床感染期、临床症状期及HPV 相关肿瘤期，通过检测HPV存在、可尽早明确疾病，其与癌前病变、浸润性子宫颈癌有关，经流行病学显示[6]，约有80%低度子宫颈癌前病变者体内均能分离出HPV，约有90%高度子宫颈癌前病变者体内可分离出HPV，基本所有子宫颈癌女性可分理出HPV，因此临床认为HPV 是导致子宫颈癌的致癌因素，具有较高的灵敏度及特异度，可尽早预测病变进展、切实反映HPV 感染与宫颈病变间的关系，利于尽早明确病情情况，因此联合上述检测方式可早期诊治子宫颈癌，提高疾病检出率，减少误诊或漏诊，达到早期预防子宫颈癌的目的，为疾病早期防治提供重要参考、达到改善预后作用，具有实践价值。笔者认为，在对患者问诊时，医师应及时进行相关检验工作，并通过测定结果制定相应的治疗方案，这不仅有利于减小疾病误诊率，另外还提高了整体治疗水平。本研究显示：（1）与丙组比较，甲组、乙组肿瘤标志物更高，且乙组高于甲组，差异有统计学意义（P＜0.05），表示肿瘤标志物作为辅助检测可提高疾病检出率、尽早明确病情。（2）联合检测阳性率高于单项检测阳性率，但差异无统计学意义（P＞0.05），分析结果显示为单项检测也能达到预期的检验结果，利于为疾病治疗提供参考，但与联合检测比较阳性率略低、故本研究提出联合检测可早期明确患者疾病严重程度、为子宫颈癌预防提供参考数据，同时避免了漏误诊带来的不必要的医疗纠纷。（3）联合检测的灵敏度、特异度、阳性预测值高于各单项检测，差异有统计学意义（P＜0.05），联合检测、各单项检测的阴性预测值比较，差异无统计学意义（P＞0.05），因此联合检测具有较高的灵敏度、特异度，提高诊断符合率、效果较理想。此外，除了利用上述手段检测外，临床医师还应根据临床表现、影像学结果等进行综合诊断。对于筛查的子宫颈癌及癌前病变病例来说，医师应提前与其介绍具体情况和可能发生的风险等，使其做好心理准备，若出现异常，以便及时干预，降低病情恶化的风险。此外，本研究仍伴有一定不足，如样本数目少等，这在后续研究中应进行完善改进。

笔者认为，高危妇女群体应注意以下几点：保持合理的生活方式，保证营养的均衡，适量运动训练，注意休息以及保暖，加快病情的快速康复；并且对可能发生的风险进行预见性分析，及时采取措施消除可能存在的危险因素。同时做好相关检查，除了影像手段诊断外，必要时应进行肿瘤标志物、TCT 与HPV DNA 等检查，从而有利于及时发现异常。对于怀疑存在子宫颈癌及癌前病变的病例，医师应及时进行上述检验工作，这不仅有利于医师通过测定结果制定相应的治疗方案，同时还减小了疾病误诊率，提高了整体治疗水平。

综上所述，子宫颈癌具有较高的患病率，肿瘤标志物、TCT 与HPV DNA 检测子宫颈癌及癌前病变可提高诊断阳性率、诊断效能，尽早确诊疾病，为疾病治疗提供参考数据、利于达到改善患者预后的目的。