血清α1-MG和NGAL在狼疮肾炎早期诊断中的临床价值

马 珍，杨朝美

重庆市第四人民医院/重庆市急救医疗中心：1.感染与疾病预防控制科；2.检验科，重庆 400014

系统性红斑狼疮(SLE)是一种自身免疫介导的多器官、系统损害的结缔组织病，肾脏是其损伤的主要靶器官之一，部分SLE患者早期或病程中可出现狼疮肾炎(LN)。SLE患者LN的发病率为50%～70%，LN是SLE患者死亡的常见原因[1]。LN是最常见的继发性肾小球肾炎，如能早期发现并采取积极的治疗措施，将有助于LN患者肾功能的恢复[2]。中性粒细胞明胶酶相关载脂蛋白(NGAL)是脂质运载蛋白家族成员之一，主要表达于中性粒细胞、巨噬细胞、脂肪细胞，由肾脏代谢。有研究表明，在肾损伤的早期，血、尿NGAL水平开始升高，因此NGAL在预测肾损伤方面具有较高的特异度和灵敏度[3]。血清α1-微球蛋白(α1-MG)是肝细胞和淋巴细胞产生的一种糖蛋白，其水平可反映肾小球滤过功能，并可早期诊断肾损伤[4]。本研究通过分析LN患者血清α1-MG、NGAL水平变化，探讨其对LN的早期诊断价值，以助于临床早期发现LN并积极采取治疗措施改善SLE患者的预后。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2019年3月至2021年4月本院收治的LN患者102例作为LN组，其中男11例，女91例；年龄20～52岁，平均(32.27±7.11)岁。另选择同期本院健康体检者114例作为对照组，其中男13例，女101例；年龄22～54岁，平均(31.71±7.26)岁。LN组与对照组性别、年龄比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2纳入及排除标准 纳入标准：(1)SLE诊断符合2019年欧洲抗风湿病联盟更新的《系统性红斑狼疮管理指南》标准[5]；(2)LN诊断符合《中国狼疮肾炎诊断和治疗指南》标准[6]，在SLE基础上出现以下1项及以上临床和实验室检查异常时，即可诊断为LN，①尿蛋白持续>0.5 g/24 h，或随机尿蛋白+++，或尿蛋白肌酐比值>50 mg/mmol；②活动性尿沉渣(除尿路感染外，尿白细胞>5个/高倍镜视野，尿红细胞>5个/高倍镜视野)，或红细胞管型，或白细胞管型；③细胞管型包括红细胞管型、颗粒管型、血红蛋白管型、管状管型或混合管型；④肾穿刺活检病理结果为免疫复合物介导的肾小球肾炎；(3)临床资料完整。排除标准：(1)合并其他自身免疫性疾病；(2)合并原发性肾小球疾病或其他继发性肾脏病；(3)合并高血压、糖尿病、肿瘤；(4)合并血液系统疾病；(5)合并泌尿系统感染等其他影响肾功能的炎症性疾病；(6)哺乳期或妊娠期女性。

1.3仪器与试剂 贝克曼AU5821全自动生化分析仪购自美国贝克曼库尔特公司；血清尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、胱抑素C(Cys C)检测试剂由宁波瑞源生物科技有限公司提供；α1-MG、NGAL检测试剂由四川新健康成生物股份有限公司提供。

1.4方法 对所有研究对象抽取清晨空腹静脉血3～4 mL，采血管为促凝管，3 000 r/min离心5 min，取血清检测Urea、Cr、UA、Cys C、α1-MG、NGAL水平。

2 结 果

2.1两组血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、Cys C水平比较 LN组血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、Cys C水平与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)；两组血清UA水平比较，差异无统计学意义(P>0.05)，见表1。

表1 两组血清α1-MG、NGAL、Urea、Cr、UA、β2-MG、Cys C水平比较[M(P25,P75)]

组别nCysC(μmol/L)α1-MG(mg/L)NGAL(ng/mL)LN组1021.31(0.88,3.56)38.90(32.70,59.15)269.70(218.00,421.25)对照组1140.79(0.69,0.87)17.10(14.90,18.70)135.20(111.50,185.60)Z-4.492-4.343-4.590P<0.001<0.001<0.001

2.2LN发生的影响因素分析 将表1中两组比较差异有统计学意义的指标纳入多因素Logistic回归分析模型，结果显示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN发生的独立危险因素(P<0.05)，见表2。

表2 LN发生的多因素Logistic回归分析结果

2.3LN患者血清α1-MG和NGAL水平的相关性分析 Pearson相关分析结果显示，LN患者血清α1-MG、NGAL水平呈正相关(r=0.749，P<0.05)。

2.4血清α1-MG、NGAL对LN的诊断效能 ROC曲线分析结果显示，α1-MG诊断LN的曲线下面积(AUC)为0.723，灵敏度为64.7%，特异度为93.0%。NGAL诊断LN的AUC为0.814，灵敏度为73.5%，特异度为86.0%。两项联合检测的AUC为0.842，灵敏度为73.5%，特异度为86.3%。见表3、图1。

表3 血清α1-MG、NGAL诊断LN的效能

图1 血清α1-MG、NGAL诊断LN的ROC曲线

3 讨 论

LN主要由循环或原位免疫复合物沉积导致肾小球固有细胞增生、基底膜破坏和炎症细胞浸润所致，是最常见的继发性免疫性肾小球疾病[7]。相关文献显示，有75%～90%的SLE患者伴有不同程度的肾损伤，其中有21%左右可进展为尿毒症[8]。肾穿刺活检是明确LN病理类型的“金标准”，但侵入性操作难度大、风险高，患者难以接受，不利于密切跟踪LN进展情况。探讨引起LN的危险因素，寻找灵敏度高、特异性强、非侵入性、便于监测的新型生物标志物，对LN早期诊断、临床治疗效果评估等具有重要意义。

近年来，实验室早期诊断肾损伤的新型生物标志物越来越多[9]。NGAL是一种相对分子质量为25×103的小分子分泌蛋白，其mRNA可在人体中的很多组织和器官中表达，当肝脏、肾脏的上皮细胞受到损伤时会释放核转录因子(NF)-κB诱导NGAL产生并进入血液。有研究发现，在正常生理状态下，在肾组织中NGAL几乎不表达，且肾脏的滤过清除作用可以使血液中的NGAL水平保持相对稳定[10-11]，但是肾脏在发生缺血性损伤或肾毒性药物损伤后，血清及尿液中NGAL水平可明显升高，在肾损伤发生2 h达高峰，其水平变化早于Urea、Cr等生物标志物，能更早地预测肾损伤[12]。NGAL在血液和尿液中的水平变化可早期反映肾小球滤过功能有无损伤，其临床价值已在多种类型肾损伤的临床研究中得到证实，被认为是研究最广泛的肾损伤早期诊断生物标志物之一[13-14]。相关研究表明，血清及尿NGAL水平与LN肾损伤指数有关，在活动性LN中其水平显著升高，提示NGAL在早期诊断LN、预测LN的发生方面具有潜在价值[15]。α1-MG主要是由淋巴细胞和肝脏恒定产生的一种糖蛋白，能自由通过肾小球滤过膜，绝大部分在肾近曲小管被重吸收并代谢，当肾脏重吸收功能障碍或肾近曲小管受损时，血清α1-MG水平快速升高，可作为早期肾损伤的一个特异性标志物，同时α1-MG既有不易受实验检测因素干扰的优势，又可反映肾脏基底膜通透性及肾小球滤过膜损伤程度[16]。

本研究结果显示，LN组血清Urea、Cr、Cys C、α1-MG、NGAL水平与对照组比较，差异有统计学意义(P<0.05)，提示上述指标在LN患者中表达水平异常，可能可作为LN的诊断标志物，但其中部分指标受食物、药物等外源性因素影响较大，用于LN早期诊断的价值有限。如早期肾损伤时，血清Cr、Urea水平往往要在24～72 h后才缓慢升高；血清Cys C 水平尽管与性别、种族、肌肉质量和水合状态无关，但可能受甲状腺功能障碍、吸烟、炎症、某些癌症和糖皮质激素的影响，在肾小球病变早期其诊断灵敏度低于NGAL[17]。UA是嘌呤代谢的终末产物，其由受损细胞产生，可促进免疫炎症反应，受内外源性因素干扰较大，有关研究报道，不同程度肾损伤的SLE患者血清UA水平差异明显，较高的血清UA水平会增加SLE患者发生肾损伤的风险，合并高尿酸血症的SLE患者常伴有严重的肾损伤[18]。本研究中，LN组血清UA水平与对照组比较，差异无统计学意义(P>0.05)，提示血清UA作为LN诊断指标的效果可能并不理想。

本研究中，多因素Logistic回归分析结果显示，血清α1-MG、NGAL水平升高是LN发生的独立危险因素(P<0.05)，此外，LN患者血清α1-MG与NGAL水平呈正相关(P<0.05)。有研究证实，在糖尿病肾病中血清NGAL和α1-MG水平也存在高度相关性，二者对辅助诊断早期肾损伤有重要价值[11,16,19]。ROC曲线分析结果显示，血清α1-MG、NGAL联合检测对LN有较高的诊断效能，优于各指标单独检测。

综上所述，血清NGAL和α1-MG水平升高是LN发生的独立危险因素，且二者对LN的诊断价值较高，可作为早期诊断LN的有效生物标志物。但由于本研究为单中心研究，结果可能存在一定偏倚，结果有待后续多中心、大样本量的临床研究进一步证实。