四川山地乌骨鸡大肠杆菌病的诊断与防治

汪熙来，王晓云，鲁志平*

1.成都农业科技职业学院，成都 611130；2.四川省遂宁市大英县农业农村局，四川 遂宁 629300

四川山地乌骨鸡，国家地理标志产品，四川省优良地方品种，是由地方土种乌骨鸡闭锁繁育而成，已有300 年以上历史，该鸡种具有乌皮、乌骨、乌肉等基本特征，是四川省独具特色的品种资源。山地乌骨鸡传统的饲养方式以放养或半舍饲为主，导致细菌性疾病对其影响较大，尤以大肠杆菌病危害严重，在山地乌骨鸡养殖过程中如何对大肠杆菌病进行科学精准防治尤为重要。

1 病原特点

大肠杆菌病通常是感染致病血清型的大肠埃希氏菌引起的细菌性传染疾病。由于鸡品种、阶段、抵抗力以及病菌的致病因子等存在差异，临床上会表现出不同的症状。该病四季都能发生，但多发于秋季和冬春交替季节，雏鸡极易感。该病主要通过消化道传播，还可通过交配、种蛋、污染的饲料和饮水进行传播。该病容易混合感染或继发感染其他疾病，导致死亡率升高。

2 临床症状

大肠杆菌病分为急性型和慢性型。急性病鸡多是无临床症状表现而突然倒地死亡。慢性病鸡往往出现呆立，精神不振，羽毛蓬松杂乱，相互拥挤，采食量陡然下降，身体明显消瘦，个别病鸡还发生呼吸困难、腹泻、粪便较稀呈黄白色、黄绿色。个别病鸡临死前会伴有神经症状，头颈向后仰，关节肿大，患病雏鸡腹部出现肿大。蛋鸡感染大肠杆菌病主要表现为产蛋量明显下降，蛋壳易破碎，多发卵黄性腹膜炎，即蛋子瘟，大部分蛋鸡停止产蛋，解剖后可发现腹腔内有大量破裂的卵黄液[1]。

3 实验室诊断

3.1 涂片镜检

在超净工作台下，取疑似大肠杆菌感染濒死或病死鸡只的血液、心脏、肝脏、脾脏等病料制成待检涂片，用革兰氏染色法染色后镜检，可发现大量红色（即革兰氏阴性菌）、无芽孢，两端钝圆的小杆菌。

3.2 分离培养

在无菌条件下，将经酒精灯灼烧的无菌接种针逐一插入上诉病料，用平板划线法分别接种到无菌的麦康凯培养基中，置于37 ℃恒温培养箱中培养18～24 h，可见麦康凯培养基表面长出光滑的粉红色菌落。挑取单个菌落，接种到无菌麦康凯培养基中进行纯培养。

3.3 细菌鉴定

1）常规鉴定。用肠杆菌科专用细菌生化鉴定管对分离培养的细菌进行鉴定。将细菌接种于细菌生化鉴定管，在恒温箱中37 ℃进行培养，24 h 后观察结果。对所有反应结果均进行生化编码，并根据编码结果与参考表格进行检索即可鉴定。

2）分子生物学鉴定。将疑似大肠杆菌菌落接种到普通营养肉汤培养基中，于37 ℃振荡培养24 h得到新鲜菌体培养物，提取DNA。配置好PCR 反应液，将反应液和提取的大肠杆菌DNA 样品分别加入96 孔板后进行PCR 扩增反应，取扩增后的产物进行琼脂糖凝胶电泳，在凝胶成像系统中读取分析结果[2]。

4 治疗方案

4.1 抗生素治疗

致病性大肠杆菌的耐药性极其复杂，1 个养殖场通常有多种血清型，不同地域流行的血清型不同。据调查和试验证明大肠杆菌对青霉素类、大环内酯类、氨基糖苷类大部分药物有很强的耐药性，在治疗过程中几乎无效。何晴等[3]对四川山地乌骨鸡粪源大肠杆菌的耐药性分析表明，大肠杆菌对头孢类药物、新霉素、米诺环素高度敏感，可以作为四川山地乌骨鸡大肠杆菌病的首选药物。在临床使用时应用多种药物联合或交替使用。随着大肠杆菌的耐药性不断提高，许多抗生素都面临淘汰，为了降低大肠杆菌的耐药性，更好地防控大肠杆菌病，不仅要改进传统用药方法，还需研究新的逆转耐药菌药物。

4.2 中药治疗

五味子、黄连、诃子、小鱼眼草、凉粉草、大青叶等单方中草药加水煎煮，煎煮后滤掉药渣，待药汤温度降至常温后给鸡饮用，连续使用1 周能有效抑菌。黄连解毒汤、清瘟败毒散、银翘散、白头翁汤、双黄连口服液等复方中草药制剂添加到饲料或饮水中，对大肠杆菌均有一定的防治效果。

5 预防措施

5.1 合理选址规划

建设养殖场要合理选址，确保养殖场附近水源充足、无污染，交通方便，远离村庄集镇，方圆3 km没有畜禽养殖场。养殖场内要合理布局，如生活区，生产区，隔离区等，不同区域至少间隔300 m。

5.2 加强饲养管理

养殖员要加强鸡群饲养管理，选择优质且营养全面的饲料科学饲养，合理控制室内温湿度和光照。定时清理粪污、散落的饲料等，保证鸡群适宜的生长环境。合理控制饲养密度，舍内应安装风机通风换气、降低舍内有害气体浓度。饲养环境较差的养殖场容易使鸡群出现应激反应，导致鸡群抵抗力降低，空气中的病原菌（如大肠杆菌等）就会趁机侵入体内而引发各类疫病。

5.3 加强消毒

每个养殖场应根据自身实际情况制定合理的消毒计划并开展消毒工作，避免大肠杆菌等病原菌大面积滋生和蔓延。在饮水中加入0.1%过硫酸氢钾粉进行消毒，饲喂干净无污染的全价饲料，同时加强饲料管理，防止饲料发霉变质。养殖人员还应驱除舍内的蚊蝇鼠虫，防止蚊蝇鼠虫携带的有害病原微生物感染鸡群。

可选择0.3%过硫酸氢钾溶液或0.2%戊二醛癸甲溴铵溶液带鸡消毒，鸡舍墙面用石灰水消毒，养殖场地面可用2%氢氧化钠溶液喷洒消毒。进出养殖区的所有工作人员应进行彻底消毒，不得将生产区的衣物带离生产区。外来车辆人员必须进行彻底消毒后方可进场，一般情况禁止外来人员入场。

5.4 微生态制剂预防

大肠杆菌是一种消化道的共生寄生菌，也是一种条件致病菌。可以在饲料中补充微生态制剂（如枯草芽孢杆菌、乳酸球杆菌等）来保护肠道内的有益菌群，维持肠道内微生物含量动态平衡，也可避免抗生素残留等不良问题。据调查，饲料中添加微生态制剂的养殖场大肠杆菌发病几率普遍降低，对大肠杆菌病有很好的抑制作用[4]。

5.5 科学免疫接种

科学地免疫接种能有效预防各类动物疫病的发生和蔓延，接种疫苗可以提高机体对特定病原微生物的抵抗力，畜禽养殖从业者应高度重视疫苗接种工作。目前，大肠杆菌病常见的血清型有数百种，根据菌体抗原、表面抗原和鞭毛抗原的不同，随机组合会产生多种血清型的大肠杆菌，每个地区流行的大肠杆菌血清型都不一致，甚至1 个养殖场有多种血清型流行。选择疫苗时应与所在地区流行血清型匹配的疫苗进行接种。在预防大肠杆菌的同时还应预防其他疫病继发感染和混合感染。

5.6 禁止滥用抗生素

为了预防大肠杆菌病，养殖户长期违规使用大量抗生素药物，导致大肠杆菌产生耐药性，同时造成鸡肠道内的正常菌群失衡，致使鸡群抵抗力明显下降，终而诱发该病。同时，大量使用抗生素会造成畜产品药残超标，影响畜产品质量。

6 结 语

大肠杆菌病是家禽养殖业中常见易发的细菌性传染病，禽大肠杆菌病是机体免疫力下降或环境中细菌负荷高引起的一种发生在弱体动物身上的疾病，主要诱因有疾病、饲养条件、免疫反应等[5]。发生大肠杆菌病时应及时将发病鸡与正常鸡隔离，并对鸡舍彻底消毒，防止大肠杆菌病蔓延扩散；诊断大肠杆菌病时，应根据地区流行情况及临床症状进行精确诊断。在兽医指导下，选择合理的治疗方案。治疗大肠杆菌病应选择多种药物轮换使用，避免使用单一抗生素，防止细菌产生耐药性。在日常养殖生产中，应采取科学的饲养管理、免疫接种、消毒预防等防控方法，给鸡群提供适宜的生长环境，降低疾病发生几率及养殖成本，确保养殖户获得更高的收益。