血清CXCL12、Lp-PLA2 水平与阿尔茨海默症患者认知功能损害的相关性研究

郑旭杰 董 悦 潘哲拓

阿尔茨海默症（AD）临床症状表现为认知障碍、言语障碍及情感淡漠等[1]。研究发现，AD 患者认知功能损害多与神经内分泌、神经变性及炎性损伤有关[2]。趋化因子C-X-C 基序配体12（CXCL12）与各类脑血管疾病的进展有密切关系[3]。脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）对脑损伤认知功能有一定调节作用[4]。目前关于血清CXCL12、Lp-PLA2 表达水平与AD 患者认知功能的关系研究鲜有报道。本研究通过检测AD患者血清CXCL12、Lp-PLA2 的表达水平，探讨其与AD 患者认知功能损害的相关性，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 以2018 年12 月至2020 年12 月温州医科大学附属康宁医院精神科收治的80 例AD患者为研究对象（病例组），选择同期在医院体检中心体检的60 名健康者作为对照组。病例组：男42例，女38 例；年龄64～87（70.12±4.65）岁。对照组：男31 例，女29 例；年龄65～84（69.57±5.61）岁。本研究经医院伦理委员会审核通过（伦理批件编号：2020KY121）。

1.2 纳入及排除标准 纳入标准：（1）诊断均符合《2018 中国痴呆与认知障碍诊治指南（二）：阿尔茨海默病诊治指南》[5]中相关标准；（2）头颅CT 或MRI 检查显示脑萎缩；（3）认知功能障碍和日常生活能力降低病程≥6 个月；（4）患者家属均知情同意并签署同意书。排除标准：（1）由其他疾病引起的认知功能障碍者；（2）合并心、肝、肾等器官功能障碍及严重躯体疾病者；（3）合并严重的血液系统及自身免疫系统疾病者；（4）患有恶性肿瘤及感染性疾病者；（5）主动放弃治疗或转院者。

1.3 方 法

1.3.1 治疗方法 参照《2018 中国痴呆与认知障碍诊治指南（二）：阿尔茨海默病诊治指南》给予患者胆碱酯酶抑制剂治疗，治疗无效或因不良反应不能耐受时可调换其他胆碱酯酶抑制剂或换作贴剂进行治疗，治疗过程中严密观察患者可能出现的不良反应。

1.3.2 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平检测 采集所有受试者晨起空腹静脉血3 mL，置于乙二胺四乙酸（ethylene diamine tetraacetic acid，EDTA）抗凝管中，静置30 min，以3000 r/min 离心10 min（离心半径为13 cm），收集上层血清，保存于-80 ℃冰箱内待测。使用酶联免疫吸附测定（ELISA）法分别测定两组血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。研究所用试剂盒均由上海酶联生物科技有限公司提供，所有操作均严格按照试剂盒使用说明书进行。

1.3.3 分组方法[6]使用临床痴呆量表（CDR）评估患者认知功能，包括记忆力、判断和解决问题能力、社会事务、家庭生活业余爱好和个人照料6 个项目，得分与认知功能损害程度呈反比。其中轻度组CDR评分≤1 分（45 例），中重度组CDR 评分为2～3 分（35 例）。

1.3.4 影响AD 患者认知功能的相关资料收集 包括[性别、年龄、体质指数（BMI）、病程、文化程度、婚姻状况、既往史（家族史、吸烟史、饮酒史、脑卒中史、高血压史、糖尿病史、头部创伤史）、独居、体育活动少（1 周运动次数＜3 次，每次时间＜30 min）、社交活动少（1 周与人交谈次数＜3 次）、负性生活事件多[汉密尔顿焦虑量表（HAMA）评分为2～4 分]、入院时蒙特利尔认知评估量表（MoCA）评分、简易精神状态量表（MMSE）评分]、既往降压药服用情况（他汀类药物、阿司匹林）及入院24 h 内实验室指标[低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白胆固醇（HDLC）、三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、总胆红素（TBIL）、肌酐（Cre）、血小板（PLT）、空腹血糖（FBG）、空腹胰岛素（FINS）、血清白蛋白（ALB）、全血白细胞计数（WBC）、血清总蛋白（TP）、超敏C-反应蛋白（hs-CRP）]及血清CXCL12、Lp-PLA2。

1.4 统计学方法 应用SPSS 25.0 软件进行统计分析。符合正态分布计量资料以均数±标准差（）表示，组间比较采用独立样本t 检验，计数资料以率（%）表示，组间比较采用χ2检验。采用多因素Logistic 回归分析影响AD 患者认知功能的相关因素；采用Spearman 相关性法分析血清CXCL12、Lp-PLA2水平与影响AD 患者认知功能相关因素的关系；绘制受试者工作特征曲线（ROC）分析血清CXCL12、Lp-PLA2 水平对AD 患者认知功能损害的预测价值。以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 病例组与对照组血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比较 病例组患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 病例组与对照组血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比较（）

表1 病例组与对照组血清CXCL12、Lp-PLA2 水平比较（）

注：病例组为阿尔茨海默症患者；对照组为健康者；CXCL12 为趋化因子C-X-C 基序配体12；Lp-PLA2 为脂蛋白相关磷脂酶A2

2.2 影响AD 患者认知功能的单因素分析 中重度组独居、社交活动少、负性生活事件多占比、入院时MMSE 评分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于轻度组（P＜0.05）；中重度组入院时MoCA 评分低于轻度组（P＜0.05）；两组性别、年龄、BMI、病程、文化程度、婚姻状况、既往史、体育活动少、既往降压药服用情况、LDL-C、HDL-C、TG、TC、TBIL、Cre、PLT、FBG、FINS、ALB、WBC、TP、hs-CRP 比较，差异均无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 影响AD 患者认知功能的单因素分析

2.3 影响AD 患者认知功能的多因素Logistic 回归分析 将AD 患者认知功能损害情况作为因变量（Y），将单因素分析有差异指标独居、社交活动少、负性生活事件多、入院时MoCA 评分、入院时MMSE 评分、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平作为自变量（X），进行Logistic 回归分析赋值，赋值结果见表3。经Logistic 回归分析，结果显示，独居、社交活动少、负性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影响AD患者认知功能的相关因素（P＜0.05）。见表4。

表3 Logistic 回归分析法赋值

表4 影响AD 患者认知功能的多因素Logistic 回归分析

2.4 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平与影响AD 患者认知功能的相关因素的关系 血清CXCL12 与独居、社交活动少、负性生活事件多、Lp-PLA2 均呈正相关（r=0.356、0.361、0.422、0.425，P 均＜0.05）；血清Lp-PLA2 与独居、社交活动少、负性生活事件多均呈正相关（r=0.347、0.363、0.431，P 均＜0.05）。见表5。

表5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平与影响AD 患者认知功能的相关因素的关系

2.5 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平对AD 患者认知功能损害的预测价值 血清CXCL12、Lp-PLA2 预测AD 患者认知功能损害的最佳截断点分别为1.85μg/mL、28.88 μg/L，ROC 曲线下面积（the area under the ROC curve，AUC）分别为0.786（95%CI：0.688～0.892）、0.779（95%CI：0.687～0.875），敏感度分别为85.71%（30/35）、80.00%（28/35），特异度分别为73.33%（33/45）、71.11%（32/45），二者联合检测的AUC 为0.848（95%CI：0.759～0.951），敏感度和特异度分别为77.14%（27/35）、80.00%（36/45）。见图1。

图1 血清CXCL12、Lp-PLA2 水平预测AD 患者认知功能损害的ROC 曲线

3 讨论

当AD 患者脑内老年斑核心成分β 淀粉样蛋白在细胞基质沉淀聚集后，会产生很强的神经毒性作用，使周边神经元变性和坏死，进而影响大脑皮层、海马、杏仁核、基地前脑胆碱能神经系统及脑干单胺类神经核团，损害患者认知功能[7]。本研究结果显示，病例组患者血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均高于对照组，提示血清CXCL12、Lp-PLA2 水平在AD 患者中呈异常表达。一旦局部脑组织出现缺氧、缺血，血管内皮细胞就会大量合成并释放CXCL12，导致机体内CXCL12 含量升高[8]。Shen 等[9]发现，脑出血患者血清CXCL12 浓度显著增加，该指标在一定程度上可反映出血性脑卒中的严重程度及预后情况。Lp-PLA2 通过氧化低密度脂蛋白产生大量的溶血卵磷脂和游离氧化脂肪酸，促进各种炎症因子产生强性致炎物质，大脑中的小胶质细胞和血液中的巨噬细胞受到炎症刺刺激会释放出较多的促炎细胞因子，刺激局部产生更多的Lp-PLA2，使机体内其水平显著升高[10]。张钱林等[11]研究结果亦显示，血管性痴呆患者血清Lp-PLA2 水平显著高于非痴呆患者。本研究结果与上述文献研究结果具有同质性，提示在相关疾病的研究中可重点监测血清CXCL12、Lp-PLA2 水平。

在本研究中，独居、社交活动少、负性生活事件多、血清CXCL12、Lp-PLA2 水平均是影响AD 患者认知功能的相关因素，且血清CXCL12、Lp-PLA2 水平与独居、社交活动少、负性生活事件多因素均呈正相关，这与既往研究结果基本一致，表明血清CXCL12、Lp-PLA2 与AD 患者认知功能损害程度具有一定关系[12-13]。当血清CXCL12、Lp-PLA2 水平分别超过1.85 μg/mL、28.88 μg/L 时，预测AD 患者认知功能损害的灵敏度分别为85.71%、80.00%，二者联合检测时，其特异度可提高至80.00%，再次表明血清CXCL12、Lp-PLA2 参与AD 患者认知功能损害过程。CXCL12 作为一类具有趋化活性的细胞因子，当局部脑组织缺氧、缺血时，其会与其受体CXCR4 特异性结合，通过破坏血脑屏障诱导炎症因子向缺血损伤部位聚集，参与神经炎症反应过程，影响患者认知功能[14]。Lp-PLA2 作为一种血管特异性炎症酶，可与低密度脂蛋白胆固醇结合形成炎症信号传导通路，导致血管损伤，使神经元因缺血而发生坏死，最终导致大脑因结构和功能改变而出现认知功能异常[15]。

综上所述，血清CXCL12、Lp-PLA2 在AD 患者中呈现异常表达，二者均与患者的认知功能损害具有一定关系，并对患者认知功能损害程度有一定的预测价值。