仁怀大曲酱香基酒中DBP和DEHP含量测定与评估

袁 健，陈梦元，郑 义，樊红鸟

(1贵州省分析测试研究院，贵州 贵阳 550014；2贵州省酒类产品质量检验检测院，贵州 贵阳 550014；3.贵州省检测技术研究应用中心，贵州 贵阳 550002)

邻苯二甲酸酯(PAEs)是一种被广泛使用的塑化剂，能够显著提升塑料制品的柔韧性和延展性[1]，并且占有80%以上的塑化剂市场[2]，常见于塑料玩具，医用血袋以及护理产品等，而在现代餐饮业中广受欢迎的酒水饮品里也能检测到PAEs。酿酒过程中，酒水能通过接触到塑料输送管、塑料酒桶、塑料包装等制品，从而受到PAEs污染，也有违法企业直接向酒水中加入PAEs，以增加酒水粘度，提高口感。研究表明，PAEs能够通过呼吸道、消化道、皮肤以及其他途径进入人体，其原型、代谢产物以及降解产物均可对肾脏、肺脏、内分泌系统以及生殖系统等造成损伤[3]，因此酒水中的PAEs污染一直是国内公共卫生健康的一个关注重点，加强对酒水中PAEs含量的检测力度对改善公共卫生条件具有重大意义。常见的PAEs检测方法包括高效液相色谱法(HPLC)、高效液相色谱质谱联用(HPLC/MS)、气相色谱法(GC)以及气相色谱质谱联用(GC/MS)。大量文献表明了这些方法在检测PAEs时对定性和定量分析展现出的高精准性，如Fan等人通过HPLC在11个红酒样品以及30个烈酒样品中检测出4种PAEs[4]；Dul等人通过GC/MS确定多个茶水样品中的PAEs成分[5]；Xu等人则通过液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)从包括乳制品、蒸馏酒、罐头食品在内的多种食物样品中检测出23种PAEs[6]。除了传统检测方法，近年来也有研究者针对PAEs的检测提出了更快捷简便且精确的新技术，如表面增强拉曼光谱(SERS)[7]和顶空固相微萃取-气质联用(HS-SPME-GC-MS)[8]等，然而传统检测手段发展成熟，应用广泛，依然是多数检测研究的首要选择[9]。

许多国家政府部门都针对食品中的残留PAEs作出了有关规定，以邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)为例，包括欧洲环境局、美国环保署和中国卫生部的政府机构都设定了300 ng/mL的残留限量标准[10]。此外，我国于2016年发布了最新版本的GB 5009.271—2016《食品安全国家标准 食品中邻苯二甲酸酯的测定》，对PAEs的分析检测方法标准做出了明确规范与指导[11]。尽管我国对于酒水食品中的DBP和DEHP含量并未出台明确规定作为限制，但国家食品安全风险评估中心在综合分析了不同国际组织提出的安全限值后，于2014年发布了文件《国家卫生计生委办公厅关于通报成人饮酒者DEHP和DBP初步风险评估结果的函》(国卫办食品函〔2013〕283号)。文件中提出，白酒中塑化剂DEHP和DBP的含量分别在5 mg/kg和1 mg/kg以下时，对饮酒者的健康风险处于可接受水平。本研究依据该项规定，采用GC-MS对贵州省仁怀市某酿酒生产厂近3年生产以及贮存5年至10年的大曲酱香基酒样品进行邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)与邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)含量检测与分析，为仁怀市白酒品质监控与评估提供参考依据。

1 材料与方法

1.1 实验材料

大曲酱香酒轮次基酒样品(采集自仁怀市某酿酒生产工厂)，3年内生产轮次基酒样品140个；贮藏5年基酒样品13个；贮藏8年基酒样品5个；贮藏10年基酒样品5个。

1.2 仪器设备

气相色谱-质谱联用仪(GC-MS)(安捷伦 7890A GC/5975 MSD)；分析天平(0.0001 g，梅特勒托利多)；涡旋振荡器(美国赛默飞公司)等；超声波发生器(昆山市超声仪器有限公司)。

1.3 药品和试剂

邻苯二甲酸二正丁酯(DBP)标准品(Dr.Ehrenstorfer)；邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯(DEHP)标准品(Dr.Ehrenstorfer)；正己烷(色谱纯，Aladdin)；丙酮(色谱纯，Aladdin)；实验室自制超纯水。

1.4 标准溶液配置

邻苯二甲酸酯标准中间溶液(10 μg/mL)配置：准确量取2种标准品(1000 μg/mL)各1 mL，移至100 mL容量瓶中，并使用正己烷准确定容至容量瓶刻度线。

邻苯二甲酸酯标准系列工作液配置：准确量取不同体积的2种邻苯二甲酸酯标准中间溶液(10 μg/mL)，使用正己烷逐级稀释，配置成浓度为0.00 μg/mL、0.02 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.20 μg/mL、0.50 μg/mL、1.00 μg/mL的标准系列溶液，现用现配。

1.5 样品前处理

准确称取轮次基酒样品2.0 g(精确至0.0001 g)置于25 mL具塞磨口离心管中，加入2～5 mL蒸馏水，涡旋混匀；再准确加入10 mL正己烷，涡旋振荡1 min，剧烈振摇1 min；超声提取30 min后，1000 r/min，5 min离心；取上清液，供GC-MS分析。

1.6 色谱条件

Agient HP-5ms色谱柱，30 m×0.25 mm×0.25 μm；进样口温度：260 ℃；程序升温：初始柱温60 ℃，保持1 min，以20 ℃/min的速度升温至220 ℃，保持1 min，以5 ℃/min的速度升温至250 ℃，保持1 min，再以20 ℃/min的速度升温至290 ℃，保持7.5 min。

载气：高纯氦(纯度>99.999%)，流速：1.00 mL/min；进样方式：不分流进样；进样量：1 μL。

1.7 样品溶液的测定

测定样品前，将DBP和DEHP两种邻苯二甲酸酯的标准系列工作液分别注入气相色谱-质谱联用仪中，测定相应的物质的色谱峰面积，以标准工作液的质量浓度为横坐标，以相应的峰面积为纵坐标，绘制标准曲线。绘制完成后，将前处理过的样品溶液注入气相色谱-质谱联用仪中，得到两种待测邻苯二甲酸酯的峰面积，根据标准曲线得到待测液中邻苯二甲酸酯的浓度。

2 结果与分析

2.1 3年内产轮次基酒DBP、DEHP含量测定

在对抽取的近3年生产的140个酱香轮次基酒样品(七个轮次，每轮次20个样品)进行GC-MS检验后得到样品中DBP与DEHP含量，结果如表1、表2所示。140个受检样品中，检出DBP最大平均浓度为第七轮次的0.128 mg/kg，最小平均浓度为第一轮次的0.084 mg/kg；检出DEHP最大平均浓度为第七轮次的0.152 mg/kg，最小平均浓度为第五轮次的0.116 mg/kg。由此可见，DBP和DEHP的含量与轮次数间不存在线性关系，且各自低于5.0 mg/kg和1.0 mg/kg的风险值，两种邻苯二甲酸酯的含量不随轮次的增加而上升。

表1 3年内产大曲酱香轮次基酒DBP含量

表2 3年内产大曲酱香轮次基酒DEHP含量

2.2 贮藏5年至10年酱香基酒DBP、DEHP含量测定

随机抽取酒厂中贮藏5年、8年以及10年的大曲酱香基酒样品共23个，按年份分为3组，并对其进行DBP和DEHP的含量检测，结果如表3至表5所示。各组样品中，检出DBP最大平均浓度为10年基酒组的1.918 mg/kg，最小平均浓度为5年基酒组的1.128 mg/kg；检出DEHP最大平均浓度为5年基酒组的0.234 mg/kg，最小平均浓度为3年基酒组的0.196 mg/kg。由此可见两种邻苯二甲酸酯的浓度并未随贮存年限的增加而上升，各组中DBP平均浓度均显著高于DEHP浓度。

表3 大曲酱香基酒(5年基酒)中DBP、DEHP含量

表4 大曲酱香基酒(8年基酒)中DBP、DEHP含量测定结果

表5 大曲酱香基酒(10年基酒)中DBP、DEHP含量测定结果

3 讨论

本文采用了气相色谱质谱联用分析方法，对大曲酱香基酒中的DBP和DEHP两种塑化剂进行了检测，目前对酱香轮次基酒以及酱香成品酒中的塑化剂含量尚未出台国家标准，因此本研究采用国家食品安全风险评估专家委员会的评估结论，将5 mg/kg和1 mg/kg分别设为DBP与DEHP的风险评估值。从表1和表2的数据发现，近三年生产的大曲酱香基酒中DBP和DEHP的最高含量分别为0.438 mg/kg和0.238 mg/kg，均远低于风险评估值。而从表3～表5的数据中发现，尽管贮存5年至10年的酱香基酒中DEHP含量均低于风险评估值，却存在超过风险评估值浓度的5年基酒样品A1(5.83 mg/kg)以及接近风险评估值浓度的10年基酒样品C1和C2(3.82 mg/kg和3.46 mg/kg)，表明该地所产基酒具有DBP含量超标的潜在风险。

有报道指出白酒中塑化剂来源主要分为两类，一是原料引入，酿酒原料在通过发酵与蒸馏环节后，会自然产生塑化剂成分，有微量的塑化剂进入到白酒中；二是中途接触，即在酿造过程中接触塑料制品，塑化剂从塑料制品表面迁移进入到白酒中，这使白酒中塑化剂含量急剧增加[12]。2012年在仁怀市政府大力推动下，虽然完成了仁怀区域内白酒生产企业涉及酿造过程中接触塑料制品的接酒管、运输管和转运桶等的升级改造，对使用塑料制品全部换成了食品级的不锈钢管制品，但在从原料到成品的过程中依旧存在许多可能接触邻苯二甲酸酯的环节，具体隐患还需进一步调查研究。