犬利什曼原虫病检查与防控

时文贤，赵瑞彬，张继彪

（河南省安阳市殷都区畜牧服务中心，河南 安阳 455000）

利什曼原虫病又称黑热病，是由利什曼原虫引起的人兽共患慢性寄生虫病，虫体寄生于宿主巨噬细胞或网状内皮细胞。病原由吸血昆虫白蛉通过叮咬传播。

1 病原

犬利什曼原虫病由鞭毛虫纲锥体虫科利什曼属的杜氏利什曼原虫引起。利什曼原虫生活史有前鞭毛体和无鞭毛体两个时期。前鞭毛体呈柳叶形，狭长，直径12～16 μm，虫体内有一较大圆胞核和棒状动基体，动基体处有一根弯曲的鞭毛游离虫体外。无鞭毛体呈卵圆形，虫体较小，直径约2～6 μm，多见于感染动物的巨噬细胞或网状内皮细胞内。在姬姆萨或瑞氏染色涂片上，细胞质呈淡蓝色，有一较大胞核呈深红色，位于虫体一端，动基体呈细杆状，位于另一端。

2 流行病学

2.1 易感动物 本病啮齿类动物、犬科动物易感，所有犬种，不分年龄和性别均可发病，人类偶尔感染。

2.2 传染来源 犬是利什曼原虫的天然宿主，病犬是重要感染源。

2.3 传播途径 该病主要通过吸血昆虫—中华白蛉叮咬传染。受气候、季节因素影响，本病多呈地方性流行。

3 临床症状

本病潜伏期较长，发病过程缓慢，犬感染后可能4～5个月才出现症状。皮肤型主要症状是患犬口唇、眼睑、耳朵、四肢、尾部等处皮肤出现丘疹、结节、脓肿、浅层溃疡或脱毛。内脏型主要症状有眼周脱毛、有湿疹，声音沙哑、食欲不振、消瘦等，其他症状有体温升高、贫血、精神萎顿等。

4 病理变化

病犬巨噬细胞大量破坏和增生，细胞增生致使肝、脾、淋巴结肿大，脾功能亢进，血细胞在脾内遭到大量破坏。

皮肤型主要表现为皮肤有炎症，内脏型主要表现为有广泛性皮炎，浆膜、黏膜苍白并有出血斑点，肝、脾肿大或出现腹水，淋巴结肿胀，有的衰弱、呼吸困难。

5 免疫学检查

犬利什曼原虫抗体快速检测卡采用免疫层析技术，能定性检测犬类血清、血浆或全血中的利什曼原虫抗体。

5.1 采样及样品处理 保定犬只，前肢浅皮下头静脉采血1.5～2 mL 后，按每分钟2 000～3 000转离心5 min 分离出血清，也可采用加抗凝剂的全血或未加抗凝剂的全血作检测样本。

5.2 加样及检测 检测卡放于平整、干净的台面上。用吸管向加样孔滴加10 μL 样本，再滴加3 滴样品缓冲液，这时酒红色的液体会流过观察窗，如液体未流动，可轻压加样孔与观察窗之间的区域，帮助液体释放。检测卡室温下放置5～10 min判断结果，超过10 min的结果无效。

5.3 结果判定 如果质控线C 出现一条紫红色或红色条带，在测试T线无紫红色条带出现，则判定为阴性（-）。如果质控线C出现一条紫红色或红色条带，在测试线T出现另一条紫红色条带，则判定为阳性（＋）。如果质控线C未出现紫红色或红色条带，仅T线出现或不出现颜色，则测试失败或试纸失效。

5.4 注意事项 过期或铝箔袋破损的检测卡不可使用。检测卡在室温（低于30 ℃）阴凉处保存即可，如为冷藏保存，需先将检测卡恢复至室温，再打开使用，防止层析膜吸潮。检测卡从铝箔袋中取出后尽快使用，防止试纸条受潮。不要触摸检测卡上加样孔和观察窗处的层析膜。为确保检出结果准确，应尽量采用新鲜、无污染的样本，样本有大量血脂会干扰检测结果，对此应离心处理后，避开油脂层取血清部分检测。采集的血清样本短期（48 h 内）存放置于4 ℃，长期保存置于-20 ℃以下。未加抗凝剂的全血样本应立即进行检测，如已发生部分凝血，应分离血清进行检测。加抗凝剂的全血样本应于24 h 内进行检测，且勿冷冻，冻融会使红细胞破裂溶血，严重影响检测结果。

用过的检测卡、样本及一次性防护用品作无害化处理，防止引起污染。采样滴管不能混用，以免引起交叉污染。

6 诊断

根据犬利什曼原虫病的临床症状、病理变化和病原检查及传播媒介白蛉的分布情况可作出综合诊断。可根据皮肤涂片镜检、淋巴结或骨髓穿刺镜检、快速检测卡检测进行确诊。

7 防控措施

7.1 搞好卫生 定期清理犬只粪污，勤扫犬舍，保持活动场所通风、采光良好、干燥、清洁。

7.2 切断传播 白蛉活动季节开展灭白蛉活动。白蛉活动范围小，飞行能力弱，以药物杀灭成蛉为主要的防制措施。白蛉成虫多栖息于阴暗、无风的场所，如墙角、墙缝或洞穴等，可使用高效低毒的农药，如马拉硫磷、溴氰菊酯、氯氰菊酯等喷洒灭虫或熏杀灭虫，也可以使用灯光诱杀白蛉。圈舍可安装纱窗防白蛉，犬只可佩戴浸渍杀虫药物的项圈防白蛉叮咬。

7.3 无害化处理 本病流行地区加强犬只的管理，定期对犬只进行病原筛查，阳性犬可扑杀，扑杀后无害化处理。不具备无害化处理条件的，扑杀犬可深埋处理，深埋坑远离公共场所、居民区、饲养场、饮用水源地等。深埋坑体大小适当，坑底应高出地下水位，要防渗、防漏，坑底应洒一层生石灰或漂白粉等消毒药，犬尸投入坑内，尸体用生石灰或漂白粉消毒，覆土厚度不少于1～1.2 m，深埋处设警示标志。

定期巡查，防止利什曼原虫病通过流浪犬传播。

7.4 提高犬只抗病力 加强犬只饲养管理，喂给全价日粮，注意维生素、微量元素的添加，以提高犬的抗病力，使机体能抑制、排斥、消灭利什曼原虫。

7.5 治疗措施 首选治疗药物为五价葡萄糖酸锑钠，其对利什曼原虫有强杀伤作用。近年也有应用脂肪微粒结合五价锑剂治疗黑热病的报告。

7.6 联防联控 实现人的黑热病信息与犬黑热病信息互通共享，开展黑热病流行病学调查，快速查明黑热病的流行情况。坚持“人病兽防、关口前移”原则，及时防控犬黑热病向人群传播，维护公共卫生安全。