新生儿ABO同型血交叉配血不合原因及安全输血分析

党创伟 李自锋 刘钊锋 丁帅 周峰 李红娜 宋惠娜

禹州市人民医院(许昌市感染性疾病病原体研究重点实验室)，河南省禹州市 461670

输血是临床重要的治疗方法，伴有贫血、先天性心脏病、血液病等新生儿通常需要接受输血治疗以维持身体健康、挽救生命[1]。随着社会经济快速发展、医疗水平的不断提升，输血安全受到更为广泛的重视。交叉配血试验的主要目的是检查供血者、受血者红细胞血型抗原与抗体成分能否相容，从而为受血者提供适宜血液，是保证输血安全的根本前提与有效途径[2-3]。但在交叉配血过程中常出现ABO同型血交叉配血不合现象，严重影响临床用血[4]。因此，对交叉配血不合问题进行综合分析，找出其中原因并采取合理输血策略和措施，才能有效减少输血不良反应。本研究选取我院收治的105例ABO同型血交叉配血不合新生儿为研究对象，对交叉配血不合的主要原因进行了分析并制订了相应的输血策略和措施，使患儿得到安全的输血治疗。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年6月至2020年4月我院收治的ABO同型血交叉配血不合新生儿105例为研究对象。纳入标准：经Coomb′s试验证实为ABO同型血交叉配血不合；家属签署干预研究知情同意书。排除标准：有出血倾向或血液处于高凝状态；伴发感染性疾病；有严重并发症；正在接受免疫抑制剂与激素治疗。纳入分析的105例新生儿中女48例、男57例；日龄1～28 d，平均(14.13±6.46)d；体质量2.9～4.3 kg，平均(3.48±0.22)kg；疾病类型：血液病21例、先天性心脏病45例、早产儿贫血23例、意外伤10例、其他6例。

1.2 方法

1.2.1 仪器及试剂 (1)仪器。血液学离心机(日本久保田公司，型号：KA-2200)、恒温水浴箱(常州市国旺仪器制造有限公司，型号：HHW-420.600.)、全自动血型及配血分析系统(美国强生公司，型号：Ortho Autovue)。(2)试剂。抗Jk、抗Le定型试剂，购自BIOSCOT®公司；RhD、ABO、抗人球蛋白检测卡，购自瑞士达亚美公司，抗N、抗C、抗E、抗A、抗AB、抗B、抗D、抗H、抗M、抗P1、抗e、抗c、ABO血型反定型细胞、抗体鉴定谱细胞、抗体筛选细胞、抗人球蛋白试剂，购自上海市血液生物医药有限责任公司。

1.2.2 方法 采集新生儿EDTA抗凝血2 mL、不抗凝血3 mL，2 000 r/min离心5 min分离红细胞、血浆。以微柱凝胶法实施ABO血型正反定型，进行Rh血型检测、自身抗体检测、Coomb′s试验、不规则抗体筛选及特异性鉴定、冷凝集素检测：(1)自身抗体检测。使用37 ℃的生理盐水对新生儿红细胞连续洗涤3次，实施ABO血型正向定型；用洗涤后的红细胞吸收血清中自身抗体，再行ABO血型反向定型与同种抗体检测。(2)不规则抗体筛选及特异性鉴定。对ABO血型正反定型不相符的血标本，以含有10个稀有血型系统抗原的1、2、3号抗体筛选细胞实施不规则抗体筛选；对结果阳性血标本，以10个谱细胞对抗体进行特异性鉴定；对有特异性抗体的血标本，以含有相应抗原红细胞实施效价检测。(3)冷凝集素检测。将新生儿血清与自身红细胞混合，4 ℃放置3 h，用于冷凝集素试验。(4)Coomb′s试验。使用37 ℃的生理盐水对新生儿红细胞连续洗涤3次，以氯化钠溶液将红细胞制备成20 mL/L悬液，行Coomb′s试验。若结果呈阳性，将红细胞置于56 ℃水浴箱中放散10 min，使用放散后Coomb′s试验结果呈阴性的红细胞开展ABO、RhD血型检测，并行交叉配血试验。采用凝聚胺法验证交叉配血不合血标本，分析交叉配血不合的主要原因，并为患儿制订相应的输血策略。

2 结 果

2.1 交叉配血不合主要原因 105例新生儿ABO同型血交叉配血不合的主要原因有不规则抗体37例(35.24%)、冷凝集素24例(22.86%)、自身抗体阳性20例(19.05%)、溶血病13例(12.38%)、血浆蛋白异常7例(6.67%)、扩容与止血药物4例(3.81%)。

2.2 配血方法对交叉配血结果的影响 对105例新生儿交叉配血不合的血标本，采用微柱凝胶法进行交叉配血的结果显示，主侧配血不合72例、次侧配血不合19例、主次侧配血均不合14例；采用凝聚胺法进行交叉配血的结果显示，主侧配血不合72例、次侧配血不合19例、主次侧配血均不合14例。

2.3 交叉配血不合输血策略 (1)不规则抗体：鉴定抗体特异性，为患儿选取抗原为阴性的血液。(2)冷凝集素：4 ℃下吸收自身抗体，并在37 ℃下进行交叉配血。(3)自身抗体：行自身抗体吸收试验。(4)血浆蛋白异常：洗涤红细胞。(5)溶血病：行抗人球蛋白试验、吸收放散试验。(6)扩容与止血药物：洗涤红细胞。

3 讨 论

输血在临床治疗中发挥着重要作用，尤其是在急诊抢救患者中具有不可替代的地位[5]。输血前行交叉配血试验是保证输血有效性与安全性的重要举措，若出现ABO同型血交叉配血不合现象，应立即找出原因并制订出相应的策略和措施，为患者安全输血提供保障[6]。

本研究结果显示，由不规则抗体引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占35.24%。不规则抗体多为输血或妊娠时Rh血型不合形成的IgG型抗体，是引发新生儿溶血病、溶血性输血反应、ABO血型正反定型不符与交叉配血不合主要因素[7-8]。针对这种情况，可在了解新生儿临床诊断、输血史、母亲妊娠史等情况的前提下，以谱细胞、抗体筛选细胞实施不规则抗体筛选及特异性鉴定，选取无相应抗原供血标本对患儿进行交叉配血。

本研究结果显示，由冷凝集素引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占22.86%。当新生儿患有某种疾病时，其血清中含有高效价冷凝集素，温度较低时具备活性，会干扰血型鉴定与交叉配血试验结果[9-10]。针对这种情况，可使用37 ℃的生理盐水对新生儿红细胞进行连续洗涤，置于4 ℃下，在吸收血清中冷凝集素后再进行血型鉴定及交叉配血试验可有效消除冷凝集素干扰。

本研究结果显示，由自身抗体阳性所引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占19.05%。早产儿胎内骨髓外造血过早停止，胎儿出生后机体快速生长发育，易引起新生儿贫血；贫血新生儿红细胞被自身抗体致敏后会引发Coomb′s试验结果阳性，与所有供血者红细胞进行交叉配血试验均不合[11-12]。针对这种情况，可使用红细胞吸收自身抗体后的血清及特异性抗体对抗原呈阴性的红细胞进行间接Coomb′s试验主侧配血；对抗体特异性不能确定的新生儿，在病情危重必须及时输血时，可少量缓慢输注主侧配血凝集最弱的Rh、ABO血型或与新生儿同型的洗涤红细胞。

本研究结果显示，由溶血病所引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占12.38%。患有溶血病的新生儿，其红细胞可与不规则抗体、IgG型抗A(B)结合，或因其血清中含有不规则抗体、IgG型抗A(B)，在交叉配血时会引发主侧与次侧不合[13]。在这种情况下，溶血病新生儿的红细胞直接Coomb′s试验结果呈阳性，次侧配血多不合，因此可只行主侧配血，不行次侧配血；对ABO新生儿溶血病患儿可选择O型红细胞与新生儿血清行主侧配血，对非ABO新生儿溶血病患儿可选择不含相应抗原红细胞与新生儿血清进行主侧配血，从而成功配血为患儿进行输血治疗。

本研究结果显示，由血浆蛋白异常所引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占6.67%。这是由于供血者血标本在未充分抗凝或新生儿血浆内含有大量纤维蛋白原，在行交叉配血试验时纤维蛋白原被激活，凝集时形成凝块；或新生儿血清球蛋白大量增加导致红细胞间Zeta电位降低而形成假凝集，会对交叉配血结果造成严重影响[14]。针对这种情况，可在配血试管中添加少许生理盐水消除凝集，若凝集仍难以消除，可将血标本放置于37～43 ℃下孵育10 min，离心处理，并连续洗涤红细胞3次，然后再行交叉配血试验；也可使用血清标本行交叉配血，这样可有效消除纤维蛋白原的干扰，从而成功配血为患儿进行输血治疗。

本研究结果显示，由扩容与止血药物所引发的新生儿ABO同型血交叉配血不合占3.81%。扩容药物能吸附于红细胞表面，形成假凝集，而止血药物能使得血小板聚集，两种药物均会对交叉配血试验结果造成干扰[15]。针对这种情况，可在配血试管中添加少许生理盐水消除凝集，或连续洗涤红细胞3次再行试验，也可在输注扩容与止血药物前采集血标本，可有效排除药物对血型鉴定、交叉配血的影响，从而成功配血为患儿进行输血治疗。

本研究结果显示，采用微柱凝胶法进行交叉配血，105例患儿的血标本中主侧配血不合、次侧配血不合、主次侧配血均不合分别有72、19、14例。微柱凝胶法虽然具有操作简单、灵敏度高等优势，但也易引发假阳性，造成交叉配血不合，当出现ABO同型血交叉配血不合时需对血标本适当处理，同时采用凝聚胺法进行验证试验。新生儿ABO同型血交叉配血不合主要由冷凝集素、自身抗体、不规则抗体、血浆蛋白异常、溶血病、扩容与止血药物等因素引发，采取相关策略和措施，开展相关试验，可为患儿选择合适血液进行安全输血治疗。