清炎方治疗围绝经期复发性尿路感染

汤璐敏，车妙琳，邹寒冰，杨海芸，邵兴华，李 鹤，牟 姗*

（1.上海交通大学医学院附属仁济医院中医科，上海 200127；2.上海交通大学医学院附属仁济医院肾内科，上海 200127；3.上海交通大学医学院附属仁济医院中心实验室，上海 200127；4.上海交通大学医学院附属仁济医院老年科，上海 200127）

复发性尿路感染是指尿路感染6个月内发作2次，或者1年内发作3次。女性因尿道长度短，尿道靠近肛门，阴道细菌定植等生理因素更容易罹尿路感染。围绝经期女性卵巢功能渐进性下降，雌激素缺乏，导致泌尿生殖器官萎缩，泌尿系统感染发生率及复发率更高。复发性尿路感染导致围绝经期女性身体不适、生活质量下降和经济负担加重[1-3]。复发性尿路感染属中医“淋证”“劳淋”范畴。围绝经期女性处于“七七，任脉虚，太冲脉衰少，天癸竭，地道不通”阶段，气血衰少，肾气渐虚，劳淋反复发作，肾虚益甚，湿热之邪久羁难清。“邪气所凑，其气必虚”，肾藏精，肾气不足，气的卫外功能下降，更易引发淋证反复发作，形成劳淋；淋证反复发作，湿热之邪侵犯下焦，损耗气血，气血更虚，不能祛邪外出，导致淋证迁延不愈。故劳淋之为病，其本为气血亏虚、肾气不足，其标为湿邪久留。本研究探讨清炎方对围绝经期复发性尿路感染患者Th17/Treg的调节作用，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择2017年2月－2020年10月在我院治疗的围绝经期复发性尿路感染患者68例，按随机数表法分为治疗组与对照组，各34例。治疗组，年龄（50.27±3.21）岁，病程（3.64±1.05）年；对照组，年龄（49.58±5.39）岁，病程（4.16±1.39）年。2组年龄、病程等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 纳入与排除标准

纳入标准：根据《尿路感染诊断与治疗中国专家共识（2015版）》[4]拟定：1）尿路感染6个月内发作2次，或者1年内发作3次诊断为复发性尿路感染，且属于围绝经期。围绝经期定义参考《围绝经期的治疗策略》[5]。2）签署知情同意书。排除标准：1）合并心脑血管、肝、肾、造血系统等严重疾病者；2）孕妇、哺乳期、精神疾病患者；3）对本研究所用药物过敏者。

1.3 治疗方法

对照组口服乳酸左氧氟沙星片（生产企业：浙江医药股份有限公司新昌制药厂，国药准字H20033922，规格：0.2 g），0.2 g，每日2次，连续2周。治疗组在对照组基础上加清炎方，方药组成：地锦草30 g，凤尾草30 g，石韦15 g，鸭跖草15 g，每日2次，早晚餐后各1次，温水冲服，连续8周。

1.4 疗效评价指标

1.4.1 有效率和复发率评价 有效率：参照《中药新药临床研究指导原则（第一辑）》拟定。治愈：临床症状、体征消失，尿常规检测2次正常，或尿细菌培养阴性；有效：临床症状、体征减轻，尿常规白细胞显著减少，或尿细菌培养偶有阳性；无效：临床症状、体征改善不明显，尿细菌培养仍阳性。复发率：统计6个月内2组复发患者例数。

1.4.2 中医证候积分 中医证候积分参照《中药新药临床研究指导原则（第一辑）》拟定。主症：尿频数，尿急迫感，尿道灼热涩痛、小腹拘急疼痛；次症：腰膝酸软、五心烦热、倦怠乏力、头晕耳鸣、畏寒肢冷。均分为0、1、2三级积分，0分为无症状，1分为症状轻，2分为症状重。对比治疗前后中医证候积分情况，评估清炎方对中医证候的影响。

1.5 外周血Th17/Treg细胞亚群检测

采用流式细胞仪技术检测Th17/Treg细胞亚群。入组患者空腹采血，肝素钠抗凝。Th17检测：抗凝血50 μL 加入含10%胎牛血清/1% 双抗的1 640淋巴细胞培养液，37 ℃细胞培养箱孵育6 h，加入anti-HUMAN-CD3-APC、anti-HUMAN-CD8-FITC各6 μL 混匀避光15 min，加红细胞裂解液1 mL，避光10 min，PBS 洗1 次，加破膜固定试剂盒AB液，避光15 min，PBS 洗1 次，加入anti-HUMAN-IL-17-PE，避光30 min，PBS洗1次，待测。Treg 检测：抗凝血50 μL加入anti-HUMAN-CD4-FITC、anti-HUMAN-CD25-PE、anti-HUMAN-CD127-APC各6 μL，混匀避光15 min，加红细胞裂解液1 mL，混匀避光室温静置10 min，PBS 洗1 次，待测。所有样品均由BD FACSCaliburTMFLOW Cytometer检测。

1.6 血清IL-10和IL-17检测

采用酶联免疫吸附测定（ELISA）检测血清IL-10和IL-17水平。试剂盒购自R&D公司。具体操作流程按照试剂盒说明书进行。

1.7 统计学方法

采用SPSS 20.0软件统计分析研究数据，计量资料以均数±标准差（±s）表示，符合正态分布使用t检验，不符合正态分布使用非参数检验，计数资料以例（%）表示，使用χ2检验，以P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组临床疗效结果比较

见表1。

表1 2组临床疗效结果比较（n = 34） 例

2.2 2组治疗前后中医症候积分变化比较

见表2。

表2 2组治疗前后中医症候积分变化比较（±s，n = 34） 分

表2 2组治疗前后中医症候积分变化比较（±s，n = 34） 分

注：与治疗前比较，# P＜0.05；与对照组比较，△P＜0.05

组别 治疗前 治疗后治疗组 8.51±3.67 2.29±1.68#△对照组 7.63±4.05 3.64±1.50#

2.3 2组治疗前后外周血Th17/Treg细胞亚群水平比较

见表3。

表3 2组治疗前后外周血Th17/Treg细胞亚群水平比较（±s，n = 34） %

表3 2组治疗前后外周血Th17/Treg细胞亚群水平比较（±s，n = 34） %

注：与治疗前比较，# P＜0.05；与对照组比较，△P＜0.05

组别 时间 Th17 Treg治疗组 治疗前 11.29±4.13 7.03±2.14治疗后 7.04±2.57#△ 8.24±2.67#对照组 治疗前 10.56±3.85 7.16±3.45治疗后 8.62±2.90# 7.83±3.22

2.4 2组血清IL-17和IL-10水平变化比较

见表4。

表4 2组治疗前后血清IL-17、IL-10水平变化比较（±s，n = 34） pg·mL-1

表4 2组治疗前后血清IL-17、IL-10水平变化比较（±s，n = 34） pg·mL-1

注：与治疗前比较，# P＜0.05；与对照组比较，△P＜0.05

组别 时间 IL-17 IL-10治疗组 治疗前 9.21±1.46 4.65±2.83治疗后 3.73±1.34#△ 5.72±1.06#△对照组 治疗前 8.96±1.52 4.92±2.59治疗后 5.69±1.18# 4.84±1.67

3 讨论

临床治疗复发性尿路感染使用抗生素是首选措施，但不良反应多，耐药性增加，复发较多。尿路感染反复发作可能与自身免疫功能失衡有关[6-8]。围绝经期女性卵巢功能退化，雌激素水平下降，泌尿生殖系统逐渐萎缩，局部免疫功能呈现下降态势[9-11]。T淋巴细胞是细胞免疫的重要参与者。Th17 细胞主要分泌IL-17A、IL-17F、IL-21、IL-22，需要特定的细胞因子，如转化生长因子-β（TGF-β），联合IL-6或IL-21和转录因子ROR-γt进行分化，是促进炎症的关键调节因子。Treg细胞分泌IL-10和TGF-β需要特异性细胞因子TGF-β和转录因子FoxP3分化，起到抑制促炎效应T细胞的增殖，维持免疫耐受、免疫稳态，抑制炎症反应并保护组织免受感染性疾病损伤的作用。Th17和Treg是由T细胞在微环境中接受不同的信号刺激分化而来，两者不平衡会导致炎症的发生和持续[12-14]。多种慢性炎症性疾病存在Th17/Treg失衡，如炎症性肠炎、慢性阻塞性肺疾病、动脉粥样硬化等[15-17]。多种中药可以通过不同的信号通路调节Th17/Treg失衡改变炎症性疾病的预后。白桦多糖通过调节结肠炎小鼠p-STAT1、p-STAT6、p-STAT3表达的调节作用，促进Th1/Th2、Th17/Treg平衡，缓解肠道慢性炎症[18]。中药苦参提取物苦参碱显著减少TNF-α和IL-17A的产生，上调FOXP3和下调RORγt，调节Treg/Th17，对类风湿关节炎有保护作用[19]。

围绝经期复发性尿路感染患者处于“正虚邪恋”的病理状态，正虚即免疫功能失调，邪恋即尿路反复感染，病邪久留不去。治疗上，需以扶正固本，佐以祛邪，方能稳定疗效，减少复发。中药清炎方可以抑制IL-17分泌，提高IL-10表达，调节 Th17/Treg平衡，维持免疫稳态，培补正气，减少复发性尿路感染发作。