超微粉催情散提高产后奶牛发情受胎效果的研究

胡婷婷，王翌翀，余斯炅，陈良雷，王 峰，闫俊亮，郭凯军*

（1.北京农学院动物科技学院，北京 102206；2.河南康星药业有限公司，河南郑州 450000）

目前奶牛场普遍使用同期发情提高奶牛发情配种效率，即对奶牛注射某些激素人为调整发情周期，使之在预定时间集中发情，以便有计划地组织配种，集中进行输精，减少发情鉴定工作。为提高奶牛受胎率，很多牧场在产后50～60 d 开展同期发情，以期缩短空怀天数。但由于同期发情频繁使用，许多牧场奶牛对同期发情处理的敏感性降低，牧场空怀天数仍较高，有的甚至超过120 d，实践中同期发情的效率有待提高。

中草药催情散是中兽药典的经典验方，对促进奶牛发情具有很好的效果。催情散使血浆中促卵泡素（Follicle Stimulating Hormone，FSH）增高，诱导奶牛发情。研究表明，催情散对治疗各种家畜的不孕症具有良好疗效，催情散可以调节促炎和抗炎因子，达到治疗持久性黄体的作用，还可使血液FSH、促黄体素（Luteinizing Hormone，LH）等激素显著升高，催情散对不发情奶牛具有很好的催情效果。

超微粉技术是对中药材进行微粉化，将超微粉碎技术与中药理论结合能够在低剂量下取得较好的中药效果。目前超微粉催情散对奶牛促发情效果及同期发情的影响未见报道。本文通过监测试验前期奶牛服用催情散后的发情、受胎率、血清中FSH、LH、孕酮（Progesterone，P）、雌二醇（Estradiol，E）4 种激素水平的变化及试验后期对不发情牛只进行牧场同期发情后的受孕效果，研究催情散超微粉对产后奶牛发情受胎效果的影响，以期解决长期使用同期发情处理导致奶牛同期发情效果低下的问题。

1 材料与方法

1.1 实验药品 实验药品主要包括催情散（河南康星药业有限公司，主要含淫羊藿、羊红膻、阳起石、黄芪、党参、巴戟天、肉苁蓉等）、促性腺激素释放激素（Gonadotropin Releasing Hormone，GHRH，素仕生物科技有限公司）、前列腺激素（Prostaglandin，PG，素仕生物科技有限公司）。

1.2 实验动物 随机选取60 头产后50 d 未发情的健康奶牛（直肠检查无子宫炎症，牛无其他疾病等），按照胎次（2 胎和3 胎牛各30 头）、体况评分（2.75±0.25）相近的原则，随机分为3 组，分别为催情散低剂量组（250 g/次）、高剂量组（500 g/次）和对照组（PG），每组2 胎和3 胎牛各10 头。

1.3 试验时间、地点 2020 年10 月—2020 年11 月在宁夏回族自治区银川市贺兰县洪广镇新荣村奶牛养殖基地，最高气温（14.4±2.3）℃，最低气温（1.3±2.1）℃。

1.4 实验方法 实验分前期（试验开始1～18 d）和后期（试验开始后18～63 d）2 个阶段。在试验前期，低剂量组和高剂量组在产犊后50 d 时选择没有发情的牛只分别灌服催情散250 g/ 次和500 g/ 次，1 d 1 次，连续灌服3 d，对照组（20 头）在试验开始时注射一针PG。试验后期：试验第18 天，对照组和试验组不发情牛只实施牧场同期发情处理，同期发情后第10 天人工授精，人工授精后35 d 后进行妊娠检查。

PG 同期发情技术：采用前列腺素及其类似物处理母牛，主要是诱导黄体溶解，黄体期缩短，导致新的卵泡期出现，达到同期发情的效果。主要方法：第1针注射GHRH，第2 针和第3 针注射PG，第4 针注射GHRH，每次注射剂量均为0.4 mg/头，注射时间分别为0、7、8、9 d，最后在第10 天定时输精。

本次实验的奶牛均采用相同的营养标准即牛只管理制度、饲喂程序、饲喂环境均相同，并按常规进行预防消毒工作。饲料、饲养用具及其他用品均由养牛场提供。同时，给予奶牛充足的运动空间。

1.4.1 发情判定和人工授精 试验前期：从用药开始到用药后的第18 天以内利用计步器和尾根涂蜡法共同进行判定奶牛发情。对发情母牛适时进行人工授精，计算发情率和配种率。

1.4.2 检测受胎率 配种后35 d 用高清兽用B 超机（V20，恒锦莱科技有限公司）检查确定试验牛只是否妊娠，计算受胎率。

1.4.3 采集血样 在第1 次用药之前（记为第0 天）以及在用药后第3、6、9、12、15 天进行尾静脉采血。采血后，将收集于采血管里的全血室温放置2 h，然后3000 r/min 离心20 min，取上清即可，将上清置于-20℃保存，避免反复冻融。检测指标包括FSH、LH、P和E。检测方法：通过放免仪（北京北方生物技术研究所有限公司，XH6080）进行放射免疫检测（利用同位素标记的与未标记的抗原同抗体发生竞争性抑制反应的放射性同位素体外微量分析方法）。

1.5 统计分析 试验数据采用SPSS21 软件对发情率和受胎率进行卡方检验。对血液激素含量进行ANOVA 方差分析，采用Duncan´s 方法对各组间平均数进行多重比较，血液激素结果用平均值± 标准差表示。＜0.05表示差异显著，＞0.05 表示差异不显著。

2 结果

2.1 试验前期催情散对奶牛发情受胎效果观察 试验前期，低剂量组奶牛的发情率显著低于对照组，2 个剂量组间以及高剂量组和对照组间差异不显著，对照组受胎率显著高于低剂量组和高剂量组（表1）。

表1 试验前期发情受胎效果

在试验后期，同期发情后高剂量组受胎率显著高于低剂量组和对照组，对照组和低剂量组之间差异不显著（表2）。

表2 试验后期同期发情受胎效果

综合考虑试验前期和后期，高剂量组的受胎率显著高于低剂量组、对照组（表3）。

表3 试验全期发情和受胎效果比较

2.2 服用催情散前后奶牛血液生殖激素的变化 由表4 可知，试验前期，3 组奶牛血清中FSH、LH 含量无显著差异。试验前期，在第3～6 天试验组奶牛血清中P含量显著或趋于显著高于对照组（＜0.05 或0.05＜＜0.1），第12 天低剂量组奶牛血清中P含量显著低于对照组，第15 天2 个试验组均趋于显著高于对照组（0.05＜＜0.1）。试验第12 天，高剂量组E含量显著高于低剂量组，其余各组在任何时间内均不显著。

表4 试验前期奶牛血清中生殖激素含量变化

3 讨 论

3.1 催情散对奶牛发情受胎率的影响 刘立山等研究表明牧场奶牛的同期发情受胎率为60%～80%，然而，随着同期发情处理普遍应用，部分牧场同期发情受胎率较为低下。梁小军等研究表明，部分牧场奶牛产犊间隔为400～410 d，配准天数为120～130 d。一般牧场在产后60 d 开始同期发情，照此推算，牧场同期发情受胎率仅有30%～40%，影响奶牛的繁殖性能和牧场经济效益。中草药催情散是中兽药典的经典验方，近年来，在家畜养殖生产中应用比较广泛，尤其是对促进奶牛发情具有显著效果。唐斯嘎等研究表明催情散具有解决母畜乏情、卵巢机能疾病的作用，用量适宜时不会对家畜造成毒副作用，但用时较长，起效慢。

本实验所用的超微粉催情散在试验前期的效果不如PG 组，但在试验后期高剂量组能显著提高奶牛的发情受胎率，结果与张建各的试验结果相似。张建各对比了催情散和激素类药物（PG）作用于奶牛后的发情效果，结果显示催情散组作用于奶牛发情的时间明显长于PG，但是奶牛的发情受胎率高于PG（89.6% VS 53.8%）。

3.2 催情散对奶牛血液激素的影响 动物生殖功能是通过生殖激素的调控实现的，在奶牛发情过程中生殖活动的调节主要受FSH、LH、P、E等激素控制。对正常奶牛来讲，当机体P浓度较低时高浓度的E可对下丘脑起正反馈的调节，导致下丘脑释放促性腺激素释放激素（GnRH），通过下丘脑-垂体系统作用到垂体，刺激垂体分泌 FSH 和 LH，随着 LH 浓度的增加产生 LH峰，并在少量 P协同下使奶牛发情，促使卵泡排卵。

催情散是传统的促进发情的中药方剂，其中肉苁蓉具有补肾阳、益精血作用，具有较强的雌激素作用，促进FSH 分泌；方剂中菟丝子、淫羊藿等联合应用促进LH 的分泌，淫羊藿的主要有效成分是淫羊藿苷，常用于治疗阳痿遗精、偏风不遂、小儿雀目等症；中药巴戟天具有补肾壮阳的作用，被誉为“补肾壮阳之要药”；《药性歌诀》中记载：“黄芪入药，为强壮剂，对血虚萎黄、浮肿等疾病疗效显著”。药物联合使用能够使垂体释放LH 的脉冲频率和浓度升高，与FSH共同促进卵泡分泌雌激素，这也是诱发排卵的基础；雌二醇E的增加主要由于方剂中淫羊藿具有小剂量外源雌激素的作用；P下降主要是总黄酮具有外源雌激素的作用，可增加子宫肌对催产素的敏感性，促进子宫收缩，促使前列腺素F2的分泌，起到溶解黄体降低P水平的作用。

刘伟等报道对奶牛使用催情散后，奶牛血液激素E、FSH、LH 含量与PG 组相比显著增加，P含量显著降低。本研究在试验后期均采用相同的同期发情处理，没有研究生殖激素的变化，试验前期各组牛只血液FSH、LH、P和E含量有增加或降低的趋势，个别时间点差异显著，但总体上没有取得显著效果。造成该结果的原因可能有两个方面，一是催情散作为中草药方，其作用主要在于调理，功效见效较慢，而本试验目的是研究催情散对同期发情的调节作用，没有给催情撒发挥作用留有足够的时间；二是由于采用了超微粉工艺，使用剂量与祁生旺相比剂量较低，因此对生殖激素的影响没有达到显著水平。

3.3 超微粉催情散对奶牛发情的影响 祁生旺等对奶牛使用催情散观察奶牛发情情况，所用试验剂量630 g 和950 g，对奶牛发情效果良好。本实验所用的催情散使用超微粉工艺，该工艺对所选用的中药材进行微粉化，从而大大提高中草药的溶出率和利用率。李德成等研究表明中草药经超微粉碎后，减少剂量仍可获得原处方的效果，一般可节省30%～70%的药材。本实验结果表明，当超微粉催情散剂量为500 g 时对奶牛同期发情受胎率的效果显著高于对照组，但是对奶牛生殖激素的影响与对照组相比无显著差异，具体原因有待进一步研究。

4 结 论

本研究结果表明，试验前期两剂量组的发情率与对照组无显著差异，后期高剂量组奶牛同期发情受胎率显著提高，说明超微粉催情散促进发情效果与PG 相似，但能够显著改善奶牛对同期发情处理的敏感性，从而提高奶牛的同期发情受胎率，这在实践中具有一定的意义，一方面可以减少化学激素的用量，另一方面对恢复奶牛繁殖机能有积极的作用。