Th1/Th2亚群细胞因子联合中性粒细胞CD64和人白细胞DR抗原评估慢性阻塞性肺疾病急性加重的价值

朱彩平，周世新，贺小红

（东莞康华医院呼吸与危重症医学科，广东东莞 523000）

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease，COPD）是呼吸科常见的肺部气道慢性炎症性疾病，患者支气管细胞坏死，形成溃疡，导致正常支气管组织细胞结构被破坏，气道壁代偿性修复，引发气道管壁厚度增加，气道管壁阻力上升，出现不可逆气流受限，肺功能减退[1]。由于大气污染、吸烟、细菌感染及病毒感染等不良因素的影响，诱发慢性阻塞性肺疾病急性加重（acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease，AECOPD），患者短期内出现剧烈咳嗽、呼吸困难加重、痰量增多呈脓性，且常伴发热等炎症反应，对患者健康造成严重威胁，病死率、致残率较高[2]。临床多采用外周血白细胞、C反应蛋白（CRP）对AECOPD进行鉴别，但其敏感度及特异度较低、局限性较大。Th1/Th2亚群细胞因子含量与机体免疫功能相关，有助于反映患者是否感染[3]。中性粒细胞CD64是新发现的穿膜糖蛋白，在机体发生感染时会急剧上升，是有效的炎症标记物[4]。人白细胞DR抗原（HLA-DR）是单核巨噬细胞抗原重要分子，在免疫应答中起到关键作用[5-6]。基于此，本研究分析Th1/Th2亚群细胞因子联合中性粒细胞CD64和HLA-DR对AECOPD的评估价值，以期为此类患者的诊断提供帮助，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料选取2020年7月至2021年12月东莞康华医院收治的296例AECOPD患者设为观察组，另选取同期院内322例COPD稳定期复诊患者设为对照组进行回顾性分析。观察组患者中男性194例，女性102例；年龄41～65岁，平均年龄（55.64±7.18）岁；病程1.5～12年，平均病程（7.28±2.14）年。对照组患者中男性201例，女性121例；年龄42～68岁，平均年龄（56.27±7.61）岁；病程2～10年，平均病程（7.45 ±2.03）年。两组患者性别、年龄、病程等一般资料比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05），组间具有可比性。本研究经东莞康华医院医学伦理委员会批准。纳入标准：①均符合《慢性阻塞性肺疾病基层诊疗指南（2018年）》[7]中COPD和AECOPD的诊断标准；②年龄＞40岁。排除标准：①近期使用过激素、免疫抑制剂治疗者；②患恶性肿瘤、癌症等疾病者；③合并自身免疫系统疾病者；④合并心、肝、肾功能严重异常者。

1.2 检验方法①Th1/Th2亚群细胞因子检测方法：观察组患者于入院时及治疗7 d后，对照组患者于复诊时抽取其清晨空腹静脉血5 mL，采用流式细胞仪（美国Becton Dickinson公司，型号：FACS Canto II）检测白细胞介素-6（IL-6）、γ干扰素（IFN-γ）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平，试剂盒均购于R&D公司。②CRP、降钙素原（PCT）测定：采用电化学发光全自动免疫分析仪（德国罗氏公司，型号：ELecsys 2010）及其配套试剂盒测定血清PCT、CRP水平。③CD64指数、HLA-DR表达率测定：采用流式细胞仪检测中性粒细胞CD64、HLA-DR水平，并计算CD64指数、HLA-DR表达率。

1.3 观察指标①比较观察组患者入院时及治疗7 d后，对照组患者复诊时Th1/Th2亚群细胞因子、炎症因子及CD64指数、HLA-DR表达率。②分析入院时IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率对AECOPD发生的预测价值。③进行一致性分析。IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率中任意一项指标预测AECOPD为阳性则结果判定为阳性。

1.4 统计学分析采用SPSS 22.0统计学软件进行数据处理。计量资料以（±s）表示，两组间比较行独立样本t检验；多组间比较行方差分析，其两两比较行LSD-t检验。计数资料以[例(%)]表示，组间比较行χ2检验。采用受试者工作曲线（ROC）分析入院时IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率对AECOPD发生的预测价值。一致性分析采用Kappa检验。以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组患者检测指标比较观察组患者入院时CRP、PCT、IL-6、IFN-γ、TNF-α水 平 及CD64指数显著高于观察组治疗7 d后及对照组复诊时，HLADR表达率显著低于观察组治疗7 d后及对照组复诊时，差异有统计学意义（P＜0.05）；观察组患者治疗7 d后IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数显著高于对照组复诊时，HLA-DR表达率显著低于对照组复诊时，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组患者检测指标比较（±s）

表1 两组患者检测指标比较（±s）

注：与同组入院时比较，*P＜0.05。IL-6：白细胞介素-6；IFN-γ：γ干扰素；TNF-α：肿瘤坏死因子-α；CRP：C反应蛋白；PCT：降钙素原；HLA-DR：人白细胞 DR 抗原。

组别 例数 时间点 IL-6(pg/mL) IFN-γ(pg/mL) TNF-α(pg/mL) CRP(mg/L) PCT(ng/mL) CD64指数 HLA-DR(%)观察组296 入院时 109.79±25.53 18.27±3.61 51.37±12.48 100.15±12.04 1.11±0.15 7.72±2.19 45.98±6.89治疗7 d后 85.12±17.24*15.24±3.01* 35.14±10.01* 45.92±7.68* 0.05±0.01*4.42±1.15*68.27±5.24*对照组322 复诊时 30.04±5.89 13.56±3.24 28.51±9.17 44.82±7.54 0.06±0.02 3.28±1.14 80.63±8.07 F值 602.547 160.684 374.758 2.820 26.617 663.149 202.34 P值 ＜0.05 ＜0.05 ＜0.05 ＞0.05 ＞0.05 ＜0.05 ＜0.05

2.2 入院时相关指标预测AECOPD的ROC分析经ROC分析，入院时IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率预测AECOPD的ROC的曲线下面积分别为0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，差异均有统计学意义(均P＜0.05)，见表2。入院时IL-6、 IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率预测AECOPD的ROC曲线，见图1。

图1 入院时相关指标预测AECOPD的ROC曲线

表2 入院时相关指标预测AECOPD的ROC分析

2.3 联合检测的一致性分析入院时IL-6≥73.991 pg/mL、IFN-γ≥15.458 pg/mL、TNF-α≥38.295 pg/mL、CD64指 数≥5.145、HLA-DR表达率≤70.438%判定为阳性，联合预测中任一指标为阳性则结果判定为阳性。经一致性分析，296例纳入对象中联合预测阳性268例，敏感度0.905，特异度为0.894，准确率为0.900，Kappa为0.799，见表3。

表3 联合检测的一致性分析

3 讨论

COPD是危害人类健康的常见疾病之一，多与大气污染、粉尘、遗传、病原菌感染等因素相关。随着人类生活方式的改变及环境因素的影响，患者疾病程度加重，发病率上升，导致患者上呼吸道病菌感染、气道细菌负荷增加及气道新菌株产生，出现AECOPD，且发病率增加，病死率上升[8]。另外，临床对AECOPD多使用抗生素治疗，导致抗生素滥用，影响细菌耐药性，导致病情加重，治疗难度增加。因此，寻找合适的生物标记物及早预测AECOPD，对病情的诊断及指导抗生素的使用具有十分重要的意义。

本研究结果显示，AECOPD患者Th1/Th2亚群细胞因子及CD64指数、HLA-DR表达率均处于异常状态，提示Th1/Th2亚群细胞因子及CD64指数、HLA-DR表达率的敏感性高于常规炎症因子指标。其原因分析如下：Th1细胞分泌 TNF-α、IFN-γ等因子，在细胞免疫、抗感染方面发挥重要作用，Th2细胞通过分泌IL-6抑制机体免疫，降低免疫功能[9]。CD64具有较高的特异度、敏感度，在细胞吞噬、呈递抗原、炎症释放等过程发挥重要作用[10]。HLA-DR是MHC-Ⅱ类分子，具有传递抗原肽给淋巴细胞、增强免疫应答的功能[11]。COPD患者机体受细菌组织、集落刺激因子、INF-γ等促炎因子的影响，CD64表达迅速上升，通过细胞毒性作用，加重炎症反应[12]。AECOPD期间受到细菌、病毒感染，机体细胞交叉调节功能异常，Th1 /Th2动态平衡被破坏，免疫功能受损，HLA-DR表达率下降，可及时反映患者病情进展程度[13]。同时，CD64指标及HLA-DR表达率受药物、种族等因素的干扰较小，作为实验室检测指标预测AECOPD具有一定的参考价值[14]。

经ROC分析，入院时IL-6、IFN-γ、TNF-α水平及CD64指数、HLA-DR表达率预测AECOPD的ROC的AUC分 别 为0.950、0.935、0.948、0.918、0.811，最 佳 截 断 值 为73.991 pg/mL、15.458 pg/mL、38.295 pg/mL、5.145、70.438%。经一致性分析，Kappa值为0.799。上述结果提示Th1/Th2亚群细胞因子及CD64指数、HLA-DR表达率可作为AECOPD的生物标记物。

综上，Th1/Th2亚群细胞因子及CD64指数、HLA-DR表达率联合可及时反映AECOPD病情的严重程度，对预测AECOPD具有一定的参考作用，值得临床应用。