子宫内膜CD38、CD138表达水平与不明原因RIF的关系研究

李玉华 邓天勤 韩立薇黄丽艳 吴穗妹

1.国家卫生健康委员会男性生殖与遗传重点实验室/广东省生殖科学研究所（广东省生殖医院），广东 广州 510600；2.深圳市妇幼保健院生殖中心，广东 深圳 518000

随着生物技术的不断发展，体外受精-胚胎移植（IVF-EF）技术在临床中的应用逐渐广泛，大大提高了不孕症患者的临床妊娠率，但在各种因素作用下，仍有部分女性在接受多次优质胚胎移植后，无法获得临床妊娠，出现反复种植失败（RIF）的现象，这不仅给患者带来了沉重的经济负担，也使患者背负着来自社会舆论及家庭的双重压力，严重影响身心健康［1］。因此，提高临床妊娠率是当前医学界辅助生殖技术发展中亟待解决的重难点问题。RIF病因复杂，有研究指出［2］，女性反复不孕、反复流产与子宫内膜的炎性改变密切相关，但是关于RIF与慢性子宫内膜炎的关系的研究尚不多见。基于此，本研究探讨子宫内膜白细胞分化抗原38（CD38）、白细胞分化抗原138（CD138）表达水平与不明原因RIF的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 基础资料 回顾性选取我院与深圳市妇幼保健院生殖中心于2020年1月至2021年3月收治的120例行IVF-EF及单精子卵胞浆内显微注射-胚胎移植（ICSI-ET）助孕的患者的临床资料，根据是否获得妊娠，将行胚胎移植术≥2个周期均未获得妊娠者纳入RIF组（72例）、第一周期行IVF-ET/ICSI-ET后获得妊娠者纳入对照组（48例）。RIF组年龄25～45岁，平均（30.77±3.95）岁；基础卵泡刺激素（FSH）2～8 mIU/mL，平均（5.48±2.02）mIU/mL。对照组年龄25～43岁，平均（30.25±3.48）岁；基础FSH3～8 mIU/mL，平均（5.48±2.12）mIU/mL。两组一般资料经比较无明显差异（P＞0.05），可比较。纳入标准：临床资料完整者；入组前未使用过激素类药物者；月经周期规则、基础内分泌无异常者等。排除标准：合并自身免疫性疾病者；合并其他影响生殖功能疾病者；合并子宫畸形者等。本院医学伦理委员会已审定并批准实施此项研究。

1.2 方法 入组后，所有研究对象均于月经干净2～5d，完善术前检查，行宫腔镜检查并行子宫内膜活检。术中宫内膜活检取材位置，根据慢性子宫内膜炎典型表现形式，内膜呈草莓症、微小息肉、太阳症等典型征象，用活检钳精准取材，免疫组化检查。阳性判读标准：浆细胞膜在CD38、CD138免疫组化染色后，每400倍视野下，子宫内膜间质中显示出5个以上典型浆细胞，即为阳性，每视野下小于5枚浆细胞，则显示阴性。采用免疫组化试剂盒（协和干细胞基因工程有限公司；国械注准20163400781；规格：50人次/盒）测定。

1.3 观察指标 ①比较RIF组与对照组子宫内膜CD38、CD138阳性表达人数。②比较RIF组不同种植失败次数患者CD38、CD138阳性表达人数。③比较RIF组不同种植失败次数患者CD38、CD138表达量。

1.4 统计学方法 应用SPSS 22.0统计软件分析数据，计数资料以［例（%）］表示，采用χ2检验，多组间计数资料比较采用χ2趋势检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 RIF组与对照组子宫内膜CD38、CD138阳性表达人数 RIF组中，子宫内膜CD38、CD138、CD38和CD138表达为阳性的患者占比高于对照组（P＜0.05）。见表1。

表1 RIF组与对照组子宫内膜CD38、CD138阳性表达人数［例（%）］

2.2 RIF组不同移植失败次数患者CD38、CD138阳性人数 在移植失败2次的患者中，CD38阳性人数最高，在移植失败3次的患者中，CD138阳性人数最高，在移植失败＞3次的患者中，CD38和CD138阳性表达率最高（均P＜0.05）。见表2。

表2 RIF组不同移植失败次数患者CD38、CD138阳性表达率［例（%）］

2.3 RIF组不同移植失败次数患者CD38、CD138表达量 与移植失败2次的患者比，移植失败3次、＞3次患者的CD38、CD138表达量均较高，且移植失败＞3次的CD38、CD138表达量高于移植失败3次（P＜0.05）。见表3。

表3 RIF组不同移植失败次数患者CD38、CD138表达量

3 讨论

在IVE-EF周期中，RIF出现的概率在10%左右，既往针对该病的研究中，多从免疫功能、机体代谢水平、子宫解剖结构等角度寻找病因，在筛查出母体免疫水平、机体代谢等问题后，慢性子宫内膜炎引起的胚胎种植失败引起了医学界的关注［3］。子宫内膜炎的发病与病原菌微生物感染密切相关，但慢性子宫内膜炎与急性子宫内膜炎是不同的病原体感染引起。存在炎症的子宫内膜都有免疫球蛋白抗体分泌及浆细胞浸润，子宫内膜的免疫环境被炎性因子破坏，从而促进免疫反应和炎症反应杀灭精子，导致子宫内膜容性下降，胚胎种植、发育受阻［4］。因此早期发现慢性子宫内膜炎，并采取有效的干预措施，对提高RIF患者的妊娠率十分关键。

CD138属于重组蛋白，是浆细胞最特异的指标，是一种分层上皮与简单上皮中表达的跨膜蛋白聚糖，其水平升高提示患者子宫内膜出现炎性改变，不利于胚胎移植、发育，临床中采用免疫组织化学染色可最大幅度提升浆细胞的检出率，其检验结果大多提示机体存在慢性子宫内膜炎症的发生，其阳性表达率越高可导致患者的种植失败次数越多［5-6］。CD38属于定位于膜上的糖蛋白，在细胞及组织中均可被检测到，尤其是在有丝分裂原活化淋巴细胞、分泌免疫球蛋白的浆细胞中含量较高，其可通过调控细胞钙离子，对细胞生长、胰岛素释放、T细胞激活产生影响，进而发挥免疫抑制作用，其水平升高可促进炎性因子表达，加重炎症反应［7］。浆细胞是不具备分化增值能力的终末细胞，由B淋巴细胞分化增殖生成，在正常子宫内膜中，B淋巴位于内膜基底层，且占比较少。当子宫内膜出现炎性改变时，B淋巴细胞在内膜功能层浸润、聚集，导致内膜功能层出现浆细胞浸润。

本研究结果显示，RIF组CD38、CD138、CD38或CD138表达为阳性的患者占比均高于对照组，且在RIF组患者中，移植失败次数越多，CD38或CD138阳性表达率也越高，提示子宫内膜炎性改变的程度越严重，胚胎种植越困难，种植失败次数越多。

综上，CD38、CD138在不明原因RIF患者体内呈高阳性表达率，且随着其水平升高，种植失败次数就越多，可将其作为对行IVF-EF及ICSI-ET助孕的患者胚胎种植结局的评估指标，临床中可通过检测CD38、CD138水平变化，辅助制定防治不明原因RIF措施，值得临床中进一步推广应用。