抵抗素、和肽素、氧化型低密度脂蛋白在急性缺血性脑卒中患者中的表达及临床意义

高善玉 尤年兴

扬州大学附属常熟市第二人民医院神经内科，江苏常熟 215500

目前临床上主要通过影像学检查等来检测病情严重程度，有可能会延误病情治疗的最佳时机。早期诊断并评估患者病情，能够制定针对性治疗方案改善患者病情，提高预后。血清标志物具有良好敏感性与特异性，所以在排除其他疾病的情况下，利用血清标志物检测有利于急性脑梗死患者的治疗。抵抗素是一种炎症因子，在糖尿病、缺血性心脏病等疾病中均有表达，并参与其疾病的发展，还与其预后密切相关。和肽素属于下丘脑分泌的激素，而氧化型低密度脂蛋白（oxidized low-density lipoprotein，ox-LDL）是缺血性脑卒中发病的重要标志物，能够通过促进血管壁炎症反应等，在急性缺血性脑卒中发生及发展过程中发挥着重要作用。因此推测血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平与急性缺血性脑卒中患者可能存在一定程度相关性。鉴于此，本研究回顾性分析江苏省扬州大学附属常熟市第二人民医院收治的85 例急性缺血性脑卒中患者临床资料，探讨血清抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平与急性缺血性脑卒中患者疾病严重程度、神经损伤等的关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019年6月至12月扬州大学附属常熟市第二人民医院收治的85 例急性缺血性脑卒中患者作为急性缺血性脑卒中组，选取同期在江苏省扬州大学附属常熟市第二人民医院进行健康体检的85 名健康人作为健康对照组。急性缺血性脑卒中组中，男45 例，女40 例；年龄55～72 岁，平均年龄（64.42±2.10）岁；根据美国国立卫生研究院卒中量表（National Institutes of Health stroke scale，NIHSS）评 分：轻 度43 例，中度25 例，重度17 例；入院时脑梗死面积：腔隙性脑梗死34 例，中等面积脑梗死26 例，大面积脑梗死25 例。健康对照组中，男43 例，女42 例；年龄55～72 岁，平均年龄（64.53±4.33）岁。两组的性别、年龄等一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本研究经过医院伦理委员会批准，且所有患者家属均知情并签署家属知情同意书。纳入标准：①急性起病符合《中国急性缺血性脑卒中诊治指南2018》中对急性缺血性脑卒中患者的诊断；②本次发病前患者的改良Rankin 量表（modified Rankin scale，mRS）评分＜1 分。③健康对照组均无急性缺血性脑卒中病史，急性缺血性脑卒中家族史，变态反应性疾病史，近期感染史。排除标准：①肝、肾功能障碍者，非急性缺血性脑卒中者；②重大器官损伤者；③患有免疫性疾病者。

1.2 方法

1.2.1 样本采集 取两组研究对象发病24 h 内静脉血液，置一次性的抗凝管中保存，使用3000 r/min 转速离心机离心，离心半径10 cm，离心10 min 后分离上清，在-80℃环境中保存。

1.2.2 抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平检测 采用双抗体酶联免疫吸附法对抵抗素、和肽素进行检测，采用酶联免疫吸附法对ox-LDL 进行检测。取50 mmol 碳酸盐包缓冲液（北京索莱宝科技有限公司，货号：G0220；规格：500 ml）对ox-LDL 进行稀释，且加入聚苯乙烯的反应孔中，加盖处理后，在4℃下置留24 h，次日洗涤3 次后，抛干，在每孔中均加入稀释液（pH 值=7.4，0.02 mol/L Tris-HCl 缓冲液）稀释待测标本0.1 ml，加入阳性、阴性对照标本，在42℃下置留60 min，将液体移除并洗涤3 次后，抛干，在每孔中加入ox-LDL抗体0.1 ml，再次置留60 min，将液体移除并洗涤3次，抛干，并在每孔中加入底物液（0.1 mol/L 的NaHPO，0.05 mol/L 的枸橼酸）混匀，且加入0.1 ml 邻苯二胺，遮光20 min，再次加入2 mol/L HSO0.05 ml 放置各孔内，终止反应。使用酶标仪检测A450，分析ox-LDL 水平。

1.3 观察指标及评价标准

对急性缺血性脑卒中组患者进行抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平、脑梗死面积、神经功能缺损程度、预测值及ROC 曲线进行分析。①比较不同梗死面积患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平。①采用MRI 检测脑梗死灶最大层面直径＜1.5 cm，为腔隙性脑梗死；梗死灶最大层面直径1.5～5 cm，为中等面积脑梗死；梗死灶最大层面直径＞5 cm，为大面积脑梗死。②神经功能损伤程度检测：采用NIHSS 对急性缺血性脑卒中患者神经功能评估，0～1 分表示正常，2～4 分表示轻度卒中，5～15分表示中度卒中，＞15 分表示重度卒中。

1.4 统计学方法

2 结果

2.1 两组研究对象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较

急性缺血性脑卒中组患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 两组研究对象抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较（±s）

2.2 不同梗死面积患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较

不同梗死面积患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。中等、大面积脑梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性脑梗死患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。大面积脑梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面积脑梗死患者，差异有统计学意义（P＜0.05）（表2）。

表2 不同梗死面积患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较（±s）

2.3 不同神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较

不同神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。中度、重度神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于轻度神经功能损伤程度患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。重度神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神经功能损伤程度患者，差异有统计学意义（P＜0.05）（表3）。

表3 不同神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平的比较（±s）

2.4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指标联合检测对急性缺血性脑卒中的预测价值

ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指标联合检测预测急性缺血性脑卒中的曲线下面积分别为0.850、0.949、0.921、0.986，见表4、图1（封三）。

表4 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指标联合检测对急性缺血性脑卒中的预测价值

图1 抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指标联合检测诊断急性缺血性脑卒中的ROC 曲线（见内文第87页）

3 讨论

急性缺血性脑卒中是一种急性脑血管疾病，其发病机制复杂，其主要是由于由血液循环障碍和脑缺血缺氧引起的缺血性坏死或脑组织软化。急性缺血性脑卒中又称为急性脑梗死，具有发病急、起病快、预后差等特点，是临床上严重威胁人类健康的常见疾病。

抵抗素属于半胱氨酸分泌蛋白家族，是由脂肪细胞分泌的一种炎症因子，能够参与糖尿病、缺血性心脏病等疾病的发展。抵抗素在缺血性脑血管疾病中也发挥着重要作用，有研究表明，抵抗素是一种炎症因子，在动脉粥样硬化患者机体中其水平的变化与炎症标志物超敏C-反应蛋白呈正相关。抵抗素能够通过激活三磷酸肌醇使血管外平滑肌加速增殖，进而使动脉粥样硬化过程加快。其能够通过巨嗜细胞分泌，不仅能够诱导平滑肌细胞的迁移，加速动脉粥样硬化的发展，还能够促使纤维细胞因子的表达，致使纤维帽变薄，导致不稳定斑块风险。本研究结果显示，急性缺血性脑卒中组患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于健康对照组，差异有统计学意义（P＜0.05）。中等、大面积脑梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于腔隙性脑梗死，差异有统计学意义（P＜0.05）；大面积脑梗死患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中等面积脑梗死，差异有统计学意义（P＜0.05）。中度、重度神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL水平高于轻度神经功能损伤程度患者，差异有统计学意义（P＜0.05）；重度神经功能损伤程度患者抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平高于中度神经功能损伤程度患者，差异有统计学意义（P＜0.05）。提示急性缺血性脑卒中组患者抵抗素水平参与急性缺血性脑卒中的发生，与患者梗死面积、神经功能损伤有关。ROC 分析抵抗素、和肽素、ox-LDL 及三指标联合预测急性缺血性脑卒中的曲线下面积分别为0.850、0.949、0.921、0.986，提示3 种指标联合预测急性缺血性脑卒中价值高。

和肽素是由神经垂体分泌的一种糖基化肽，由30 多个氨基酸组成。和肽素属于精氨酸加压素末端的一部分，是一种生物活性肽，是由多个氨基酸残基组成，具有调节渗透压和维持血流动力的生物学功能。和肽素能够参与机体应激反应，属于应激反应标志物，当机体发生急性缺血性脑卒中时，其机体内精氨酸加压素水平急剧上升，导致血容量大幅度升高，且直接导致细胞水肿。有研究表明，其在急性脑梗死、脑出血等重症疾病的早期诊断及预后判断中发挥着重要作用，是检测临床疾病指标的重要因子。本研究显示血清和肽素在预测急性缺血性脑卒中风险方面表现出较高的效能，提示和肽素水平升高是急性缺血性脑卒中风险预测因子。

ox-LDL 是动脉粥样硬化斑块特有的成分，脑动脉粥样硬化及血栓形成是缺血性脑卒中的主要发生原因。脑梗死早期是由于脑组织内大量缺血和缺氧，使免疫系统滋生大量炎症细胞导致LDL-C 转换形成ox-LDL。有研究发现，在急性缺血性脑卒中患者机体内，其水平明显升高。王春阳等研究发现，血浆ox-LDL 是急性缺血性脑卒中合并颈动脉斑块患者预后的影响因素，尤其对大动脉粥样硬化型、小动脉闭塞型脑卒中患者预后有影响；血浆ox-LDL 水平越高，患者预后越差。当急性缺血性脑卒中发生时，其氧化反应急剧加重，并导致神经功能进一步损伤。ox-LDL属于缺血性脑卒中的预后不良重要的检测指标。较多的ox-LDL 会对动脉壁内皮细胞、平滑肌细胞造成严重的毒副作用，使血管内皮细胞大量受损，同时还能够促进血小板的聚集增加内皮细胞的粘附作用，进一步加快血管壁的损伤。赵连江等研究表明，血清CAM、GDF-15、ox-LDL 水平在急性缺血性脑卒中患者中明显增高，且与NIHSS 评分均呈正相关，可作为判定病情严重程度的重要指标，且3 种指标联合检测对于急性缺血性脑卒中更具有重要意义。

综上所述，抵抗素、和肽素、ox-LDL 水平在急性缺血性脑卒中患者中高表达，且与患者脑梗死面积大小、神经功能损伤严重程度有关，高水平的抵抗素、和肽素、ox-LDL 是急性缺血性脑卒中的风险预测因子，3 种指标联合预测急性缺血性脑卒中具有一定的价值。