血清CD5L、补体C3 在肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿中的表达水平及临床意义

鲁连海 张苗苗 汪香君

（河南省南阳南石医院儿科，河南 南阳 473000）

哮喘是常见的呼吸系统疾病，临床上表现为反复发作的咳嗽、胸闷、喘息等症状。大多数研究认为气道慢性炎症反应、气道高反应等与哮喘的发病机制相关[1]。近年来发现，肺炎支原体是呼吸道感染重要的病原体，由其引起的肺炎支原体肺炎患儿呼吸道损伤机制与哮喘的发病、气道炎症反应存在内在联系[2]。肺炎支原体肺炎合并哮喘起病急，发展快，可引发多器官衰竭。因此临床上需要能准确反映气道炎症变化的指标指导肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿临床治疗，评估预后。CD5 抗原样蛋白（CD5 molecule-like，CD5L）属于富含半胱氨酸的清道夫受体超家族，CD5L 是辅助性T 细胞17（T helper cell 17，Th17）细胞功能调节因子，而Th17 在维持组织免疫功能稳定性发挥作用，战海涛等[2]研究发现血清CD5L 水平在重症哮喘通气死亡患者中显著高于存活患者。补体C3（Complement component 3，C3）是人体内大分子物质，可以通过不同途径被激活，能直接参与体液免疫应答。

本研究探讨CD5L、补体C3 对肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后的关系，旨在为及早筛查肺炎支原体肺炎合并哮喘不良预后患者并给予相应预防性治疗。

1 资料与方法

1.1 一般资料

本研究经本院医学伦理委员会批准。选取2018 年3 月至2020 年1 月在本院儿科确诊的86例肺炎支原体肺炎患儿作为研究对象，按照是否合并哮喘将所有患儿分为肺炎合并哮喘组（n=40）和单纯肺炎支原体肺炎组（n=46）。

纳入标准：符合诸福棠《实用儿科学》第7 版中关于肺炎支原体肺炎的诊断标准[3]；符合《儿童支气管哮喘诊断与防治指南(2016 年版)》中对支气管哮喘的诊断标准[4]；患儿及家长能配合完成此次实验；患儿及家长均同意本研究实验，并签署知情同意书。排除标准：合并严重肝、肾功能障碍者；近3m 内服用糖皮质激素、抗过敏药物者；先天性心脏病或肿瘤者；合并有自身免疫性疾病者。

单纯肺炎支原体肺炎组男27 例，女19 例；年龄8 个月~12 岁，平均年龄6.26±2.91 岁。肺炎合并哮喘组男24 例，女16 例；年龄8 个月~12岁，平均年龄6.15±3.02 岁。另选择同期来本院体检的50 例健康儿童作为对照组；其中男26 例，女24 例；年龄8 个月~12 岁，平均年龄6.53±2.83岁。三组患儿一般资料差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。

1.2 方法

所有患儿入院时清晨空腹时采取静脉血3~5 mL，对照组在体检当天采取静脉血3~5 mL，所有血液样本在4℃条件下4000 rpm 离心10 min，分离上清，冻存于-80℃冰箱中，待测。

1.3 观察指标

1.3.1 CD5L、补体C3、IL-17、IL-10 水平检测

采用酶联免疫吸附（ Enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）法检测血清中CD5L、补体C3、人白介素-17（Interleukin-17，IL-17）、人白介素-10（Interleukin-10，IL-10）水平，操作步骤严格依据CD5L ELISA 试剂盒（货号：xy-A12224，上海信裕生物科技有限公司）、补体C3 ELISA 试剂盒（货号：JK-(a)-5207，上海晶抗生物工程有限公司）、IL-17 ELISA 试剂盒（货号：JK-(a)-4957，上海晶抗生物工程有限公司）、IL-10 ELISA 试剂盒（货号：XF16183Q，上海信帆生物科技有限公司）进行。

1.3.2 复发情况

对肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿随访半年，观察患儿病情复发情况。复发指随访期间发生反复肺炎支原体呼吸道感染；哮喘再次发作；或二者都有发作。并根据复发情况将患儿分为未复发组（29 例）和复发组（11 例）。

1.4 统计学分析

数据采用SPSS 25.0 软件进行统计学分析。计数资料以例数（%）表示，采用χ2检验。计量资料以均值±标准差（±SD）表示，两组间采用独立样本t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两比较采用SNK-q 检验。采用Pearson 法分析血清CD5L、补体C3 与IL-17、IL-10 相关性。受试者工作特征曲线（ Receiver operating characteristic curve，ROC）法分析CD5L、补体C3水平及二者联合对肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后的诊断价值。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组的血清CD5L、补体C3 水平比较

与对照组相比，单纯肺炎支原体肺炎组、肺炎合并哮喘组患儿血清补体C3 水平较高，血清CD5L 水平较低（P＜0.05）；与单纯肺炎支原体肺炎组相比，肺炎合并哮喘组患儿血清补体C3 水平较高，血清CD5L 水平较低（P＜0.05）见表1。

表1 三组血清CD5L、补体C3 水平比较（±SD）

表1 三组血清CD5L、补体C3 水平比较（±SD）

注：与对照组相比，*P＜0.05；与单纯肺炎支原体肺炎组相比，＃P＜0.05。

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2.2 未复发组和复发组血清CD5L、补体C3、IL-17、IL-10 水平及其相关性分析

复发组患儿血清补体C3水平为3.61±0.68 g•L-1，未复发组为2.98±0.52 g•L-1，复发组明显高于未复发组（P＜0.05）；复发组患儿血清CD5L 水平 为 161.56±20.37 pg•mL-1，未 复 发 组 为182.67±22.69 pg•mL-1，复发组明显低于未复发组（P＜0.05）；复发组患儿血清IL-17 水平为218.67±31.58 pg•mL-1，未复发组为155.62±19.34 pg•mL-1，复发组明显高于未复发组（P＜0.05）；复发组患儿血清IL-10 水平为207.39±25.74 pg•mL-1，未复发组为237.58±33.26 pg•mL-1，复发组明显低于未复发组（P＜0.05）；复发组患儿血清IL-17/IL-10 比值为 1.35±0.57，未复发组为0.96±0.35，复发组明显高于未复发组（P＜0.05）。

Pearson 法分析显示CD5L 与IL-10 呈正相关性（r=0.684，P＜0.001），与IL-17、IL-17/IL-10 呈负相关（r=-0.735，r=-0.726，P＜0.001）；补体C3与IL-17、IL-17/IL-10 呈正相关性（r=0.692，r=0.714，P＜0.001），与IL-10 呈负相关性（r=-0.728，P＜0.001）。

2.3 CD5L、补体C3 水平及二者联合对不良预后的诊断价值分析

ROC 结果显示，CD5L、补体C3 水平诊断肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后的曲线下面积（Area under curve，AUC）分别为0.796、0.824，灵敏度分别为75.90%、90.90%，特异度分别为72.70%、65.60%。截断值168.81 pg•mL-1、0.99 g•L-1，二者联合对肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后曲线下面积AUC 为0.893，灵敏度为100.00%，特异度为72.70%。

3 讨论

图1 血清CD5L、补体C3 水平及二者联合对不良预后诊断的ROC 曲线

哮喘是由于T 淋巴细胞、嗜酸粒细胞等参与的慢性气道炎症，哮喘病情的发展与Th17/Treg 细胞平衡密切相关[1,2,5]。赖其廷等研究发现重度哮喘患者血清IL-17 水平明显高于中度哮喘患者，血清IL-10 水平明显低于中度哮喘患者[5]。本研究发现肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿复发组血清IL-17 水平显著高于未复发组，血清IL-10 水平显著低于未复发组，提示肺炎支原体肺炎合并哮喘不良预后患儿可能存在免疫紊乱。

CD5L 是一种控制炎症反应的调控蛋白，可参与感染、动脉粥样硬化和癌症等过程。各种小鼠疾病模型支持CD5L 通过阻止巨噬细胞和其他细胞类型的凋亡参与炎症过程[2,5]。高伟霞等报告哮喘患儿血清CD5L 水平明显低于正常健康儿童[6]。本研究结果推测CD5L 可能参与肺炎支原体肺炎合并哮喘的发生，进一步研究发现CD5L 与IL-10 呈正相关性，与IL-17、IL-17/IL-10 呈负相关性，提示CD5L 可能通过调控Th17/Treg 细胞稳态平衡，调控肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿的预后。

补体是一类经活化后具有生物活性，可介导炎症的蛋白质。研究显示补体C3 是连接机体炎症和免疫反应的重要枢纽，高水平补体C3 可介导炎症反应，从而引起气道组织损伤和气道上皮重塑[5-7]，韩晨鹏等报告肺炎支原体感染患儿血清补体C3 水平明显高于健康儿童，且重症肺炎支原体感染患儿血清补体C3 水平明显高于轻症肺炎支原体感染患儿[7]。本研究结果提示补体C3 可能参与肺炎支原体肺炎合并哮喘的发生及预后。进一步研究发现补体C3 与IL-17、IL-17/IL-10 呈正相关性，与IL-10 呈负相关性，提示补体C3 参与肺炎支原体肺炎合并哮喘预后可能与通过Th17/Treg 细胞稳态平衡途径。CD5L 与补体C3二者联合对肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后曲线下面积AUC 为0.893，灵敏度为100.00%，特异度为72.70%，二者联合灵敏度皆高于二者单独诊断时，提示CD5L 与补体C3 肺炎支原体肺炎合并哮喘患儿不良预后具有一定的临床价值。

综上所述，CD5L 在肺炎支原体肺炎合并哮喘不良预后患儿中下调，补体C3 在肺炎支原体肺炎合并哮喘不良预后患儿中上调，可能是评估肺炎支原体肺炎合并哮喘预后的生物指标。但本研究也有不足之处，本研究尚未深入探讨CD5L、补体C3 与肺炎支原体肺炎合并哮喘不良预后发生的机制。