三黄跌打膏外敷对大鼠急性软组织损伤的疗效

姜新根 孙 赫 赵金花

中医学上，急性软组织损伤属于“急性筋伤”范畴，主要表现为肿胀、局部疼痛、皮肤青紫瘀斑等，严重降低了患者的生命质量[1-2]。对于此症应尽早有效治疗，以减轻病情，缓解伤痛，促进机体恢复，常规治疗方案虽可在一定程度上缓解症状，改善病情，但疗效不佳[3]。近年来，中医治疗该症逐渐取得了明显效果，但目前关于三黄跌打膏外敷对大鼠急性软组织损伤的疗效报道极少，且探讨并不深入。鉴于此，本研究就三黄跌打膏外敷对大鼠急性软组织损伤的疗效进行分析。现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

购买广东斯嘉景达生物科技有限公司的SPF 级SD 大鼠64 只，其中16 只SD 大鼠作为正常对照组，雌雄各8 只，体重182～218 g，平均（200.00±11.95）g。其他大鼠均建成急性软组织损伤模型，以抽签法分为模型对照组（n=16）、三黄跌打膏组（n=16）、狗皮膏药组（n=16）。模型对照组：雌雄各8 只，体重180～220 g，平均（200.00±12.00）g；三黄跌打膏组雌雄各8 只，体重181～220 g，平均（200.50±11.98）g；狗皮膏药组雌雄各8 只，体重182～200 g，平均（200.55±12.01）g。4 组大鼠一般资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 动物模型制备建模前24 h使用8%硫化钠脱去右后大腿鼠毛，10%水合氯醛按体重（0.1 ml/100 g）腹腔注射麻醉后固定于固定台上，用200 g 砝码通过与之直径相同的塑料管自50 cm 高度自由落体落在大鼠右后大腿肌肉丰厚处，连续击打2 次，造成击打部位出现散在出血，打击处肿胀，皮下有瘀斑但皮肤不破损。打击后若有骨折、皮肤破裂者予以剔除。

1.2.2 三黄跌打膏药物制备方法三黄跌打膏（大黄50 g、黄连50 g、黄柏50 g、制天南星50 g、赤小豆150 g、樟脑5 g），将大黄、黄连、黄柏、制天南星混合打粉，过100 目药筛。赤小豆用5 倍量的饮用水浸泡30 min 后大火煮开，之后以小火煎煮，持续30 min，收集药液、过滤。药渣再用5 倍量饮用水煎煮，水沸后，以小火煎煮30 min，过滤药液后，与第一次药液合并，继续煎煮药液，至浓缩成含生药1 g/ml 的浓缩液，之后将樟脑用100 ml 95%乙醇溶解后，与浓缩液混合，再将20 g 蜂蜜溶于混合液中，最终形成配制液，应用配制液将粉碎好的药粉调成糊状，制成贴膏，将其置于4 ℃冰箱中保存，备用。每日贴敷2 次，治疗1 周[4]。

1.2.3 动物分组及干预将造模成功大鼠随机分组，每组16 只，雌雄各半，包括模型对照组、三黄跌打膏组、狗皮膏药组。造模成功后1 h 给予相应的药物包扎，外用特制胶布及纱布固定，每天换药1 次。在建模前用皮尺测量大鼠右后大腿的周长，在第3、7 天给药2 h 后分别每组取出8 只大鼠，雌雄各半，用皮尺测量大鼠右后大腿的周长，然后10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，腹主动脉取血，取部分全血检测血液流变学指标，部分血液分离血清检测炎症介质水平。

1.3 观察指标

1）大腿周长：于给药前，第3、7 天给药后2 h，应用皮尺对大鼠右后大腿的周长进行测量。2）血液流变学指标：于第3、7 天给药后2 h，应用10%水合氯醛腹腔注射麻醉后，于各组大鼠腹主动脉取血，迅速注入肝素抗凝管内，采用血液流变检测仪（济南东方美洋商贸有限责任公司，型号MEN-C80）对大鼠全血黏度、血浆黏度、血细胞比容、血小板黏附率进行测量。3）炎症介质：第3、7 天给药后2 h，腹腔主动脉取血，置于离心管中，室温放置2 h 后，以3 000 r/min 转速离心5 min，分离血清。严格按照酶联免疫吸附剂测定试剂盒操作说明，以酶联免疫吸附试验法检测白细胞介素-1β（IL-1β）、白细胞介素-6（IL-6）、前列腺素E2（PGE2）水平。

1.4 统计学分析

采用SPSS 22.0 统计软件进行数据分析，计量资料以±s表示，组间比较采用F检验，两两比较采用q检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 大腿周长

各组给药前大腿周长比较差异无统计学意义（P＞0.05）；给药第3、7 天，与正常对照组比较，模型对照组大腿周长最长，三黄跌打膏组大腿周长最短，各组大腿周长比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表1。

表1 4 组大鼠大腿周长比较(cm,±s)

表1 4 组大鼠大腿周长比较(cm,±s)

组别 只数 给药前 第3 天 第7 天 正常对照组 16 5.50±0.50 5.51±0.52 5.50±0.51模型对照组 16 6.09±0.43 6.08±0.35 6.80±0.54三黄跌打膏组 16 6.12±0.44 5.71±0.28 5.75±0.56狗皮膏药组 16 6.08±0.46 6.01±0.34 5.89±0.48 F 值 0.039 5.859 18.540 P 值 0.962 0.005 0.000

2.2 血液流变学指标

给药第3 天，4 组低切全血黏度、血细胞比容差异无统计学意义（P＞0.05），4 组高切全血黏度、血浆黏度、血小板黏附率比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；给药第7 天，4 组高切全血黏度、低切全血黏度、血细胞比容、血浆黏度比较，差异有统计学意义（P＜0.05）；与其他各组比较，三黄跌打膏组大鼠第3 天与第7 天的血液流变学指标变化幅度更明显，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 4 组大鼠血液流变学指标比较(±s)

表2 4 组大鼠血液流变学指标比较(±s)

组别 只 数 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 高切全血黏度(mpa·s) 低切全血黏度(mpa·s) 血细胞比容(%) 血浆黏度(mpa·s) 血小板黏附率(%) 正常对照组 16 4.91±0.45 4.92±0.46 30.95±3.02 30.80±2.31 0.41±0.01 0.42±0.02 1.27±0.15 1.27±0.16 50.24±14.36 50.30±14.40模型对照组 16 5.45±0.46 4.96±0.34 38.39±2.96 38.87±2.30 0.50±0.02 0.52±0.01 1.20±0.05 1.20±0.06 44.33±12.64 43.22±14.35三黄跌打膏组 16 5.22±0.31 4.50±0.50* 36.50±4.22 30.42±5.48 0.49±0.04 0.38±0.01 1.22±0.05 1.27±0.06 32.45±13.04 53.52±15.41狗皮膏药组 16 4.92±0.61 4.66±0.52 34.45±7.40 31.89±5.30 0.48±0.03 0.46±0.05 1.25±0.05 1.25±0.06 46.24±10.52 51.20±13.54 F 值 4.987 4.116 2.292 15.428 1.655 87.704 4.053 6.784 6.083 2.236 P 值 0.011 0.023 0.113 ＜0.050 0.202 0.000 0.024 0.003 0.005 0.119

2.3 炎症介质水平

给药第3、7 天，4 组IL-1β、IL-6 水平比较差异有统计学意义，三黄跌打膏组IL-1β、IL-6 水平低于其余各组（P＜0.05）。见表3。

表3 4 组大鼠炎症介质水平比较(ng/L,±s)

表3 4 组大鼠炎症介质水平比较(ng/L,±s)

IL-1β IL-6 组别 只数 第3 天 第7 天 第3 天 第7 天 正常对照组 16 180.02±3.54 179.54±4.02 335.50±40.21 330.05±40.22 模型对照组 16 358.62±3.52 228.52±4.01 434.55±110.20 348.52±40.20 三黄跌打膏组 16 312.34±3.40 180.02±4.84 281.52±104.20 295.52±46.20 狗皮膏药组 16 328.94±2.98 186.68±5.01 358.41±124.01 340.02±50.00 F 值 803.729 513.538 7.322 6.222 P 值 ＜0.050 ＜0.050 0.002 0.004

3 讨论

急性软组织损伤通常是由于肌肉或肌腱、韧带不同程度的损伤，导致出现疼痛、活动受限、僵硬等症状，若未及时得到有效治疗，则会引起肌肉萎缩、关节强直、关节脱位等，威胁患者身体健康与生命安全[5-6]。该病发生的早期，多采用冷敷、抬高肢体、加压包扎等处理措施，初期可有效控制病情发展，但预后不佳[7-8]。

本研究选取64 只SPF 级SD 大鼠作为样本，将其中48 只建模并分组，给予不同治疗方法，研究数据显示，给药第3、7 天，提示不同干预方法干预后大腿周长生长情况亦有所不同，其中三黄跌打膏组治疗效果更佳[9]。研究还发现，与其他各组比较，三 黄跌打膏组大鼠第3 天与第7 天的血液流变学指标变化幅度更明显。提示与其他治疗方法比较，三黄跌打膏外敷法能有效改善大鼠血液流变学情况。IL-6 主要是由T、β 细胞、单核巨噬细胞分泌的细胞因子，为炎症反应的促发剂，可引起β 细胞分化，产生抗体，诱导T 细胞激活增殖及分化，并参与机体免疫应答，可反映组织受损程度[10-11]。IL-1β 为炎症反应中的一个重要介质，组织受损后炎症部位、脊髓水平的浓度明显升高，会诱导其他促炎因子释放，促进、维持炎症反应[12-13]。研究发现，给药第3、7 天4 组IL-1β、IL-6 比较差异有统计学意义，且三黄跌打膏组IL-1β、IL-6 水平均最低，提示三黄跌打膏可显著抑制急性软组织损伤大鼠软组织分泌IL-1β、Il-6 水平，调节炎症介质水平，缓解肿胀、疼痛等症状[14-15]。三黄跌打膏主要由大黄、黄连、黄柏、制天南星、赤小豆、樟脑等成分组成，其中大黄、黄连、黄柏具有清热解毒、泻下攻积、活血化瘀等功效，制天南星具有燥湿化痰、祛风、止痉、散结消肿等功效，赤小豆可清热解毒、利水消肿，樟脑可通窍。诸药合用，外敷于相应部位，可共奏活血祛瘀、凉血止痛、散结、消肿等功效，效果显著。

综上所述，三黄跌打膏外敷治疗大鼠急性软组织损伤效果显著，可明显改善其血液流变学指标，减轻炎症反应，临床价值显著。