电针对慢性阻塞性肺疾病大鼠肺组织形态学及肺功能的影响

许金森 黄培炜 林静瑜 郑淑霞 朱小香 萨喆燕

[摘要]目的探究電针尺泽穴对慢性阻塞性肺疾病（COPD）模型大鼠的肺组织形态学、肺功能的影响。方法将24只 SD 大鼠随机分为正常对照组和模型组，正常对照组8只，模型组16只。适应性饲养1周后，开始对模型组进行造模，采用烟熏+脂多糖（LPS）气道滴注，共11周。模型复制成功后，将模型组分为模型对照组和尺泽干预组各8只。电针干预尺泽穴30 min，强度1mA，1次/d，连续干预4周。模型对照组每日同等造模，同时固定抓取，不干预。观察三组大鼠的肺组织形态学、肺功能的变化。结果与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺每分通气量下降，差异有统计学意义（ P <0.01），肺弹性阻力下降，差异有统计学意义（ P <0.01）;电针尺泽穴干预后，肺每分通气量、肺弹性阻力明显提高，差异有统计学意义（ P <0.01）;与正常对照组比较，模型对照组肺组织外观、气管呈肺气肿改变及炎性细胞浸润，尺泽干预组的肺、气管组织外观、病理形态明显改善。结论电针刺激尺泽穴能够改善 COPD 大鼠肺组织形态学和肺功能。

[关键词]慢性阻塞性肺疾病;尺泽穴;电针;肺功能;肺组织形态学

[中图分类号] R245.97  [文献标识码] A   [文章编号]2095-0616（2022）09-0019-05

Effects of electroacupuncture on the morphology of lung tissues and lung function in rats with chronic obstructive pulmonary disease

XU  Jinsen   HUANG  Peiwei（2）   LIN 3Jingyu    ZHENG  Shuxia（1）   ZHU 1Xiaoxiang    SA 1Zheyan

1. Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian Key Laboratory of Propagated Sensation Along Meridian， Fujian， Fuzhou 350003， China;2. Fuzhou Dermatosis Prevention Hospital， Fujian， Fuzhou 350025， China;3. Institute of Materia Medica， Fujian Academy of Chinese Medical Sciences， Fujian， Fuzhou 350003， China

[Abstract] Objective To investigate the effects of electroacupuncture at Chize （LU5） on the morphology of lung tissues and lung function in a rat model of chronic obstructive pulmonary disease （COPD）. Methods A total of 24 Sprague-Dawley rats were randomly divided into the normal control group （n=8） and the model group （n=16）. With one-week adaptive feeding， rats in the model group were started to be modeled through the airway instillation of sootiness and lipopolysaccharide for a total of 11 weeks. After the successful model establishment， the rats in the model group were further divided into the model control group and the Chize intervention group， with 8 cases in each group. The electroacupuncture at Chize （LU5） was lasted for 30 minutes， with an intensity of 1 mA once a day for continuous 4 weeks. Rats in the model control group received the same modeling and grasping approach every day without intervention. Changes in the morphology of lung tissues and lung function of rats were observed in three groups. Results Compared with the normal control group， the ventilatory capacity of the lung per minute was decreased in the model control group， with statistically significant differences （P <0.01）. The elastic recoil resistance of lung decreased， with statistically significant differences （P <0.01）. After electroacupuncture intervention at Chize （LU5）， the ventilatory capacity of the lung per minute and elastic recoil resistance of the lung significantly increased， with statistically significant differences （P <0.01）. In comparison to the normal control group， lung tissues in the model control group showed emphysema changes and inflammatory cell infiltration， and the appearance of lung and tracheal tissues， and pathology in the Chize intervention group were significantly improved. Conclusion Electroacupuncture at Chize （LU5） can improve the morphology of lung tissues and lung function in COPD rats.

[Key words] Chronic obstructive pulmonary disease; Electroacupuncture; Chize; Morphology of lung tissues; Lung function

慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease， COPD）是一种危害人类健康的常见病、多发病，严重影响患者的生活质量，病死率较高。2018年中国成人肺部健康研究（C P H S ）曾对10个省市50991名人群调查显示，20岁及以上成人的 COPD 患病率为8.6%，40岁以上则高达13.7%，首次明确我国 COPD 患者人数近1亿， COPD 将位居世界疾病经济负担的第5位[1]。目前西医对该病主要采用对症治疗的策略，而针灸穴位是中医治疗 C O P D 较为有效的手段之一[2]，并以其“简、便、廉、验、效”而受到广大患者的青睐。因此，在中医尤其是针灸方面探讨对本病的治疗措施和方案，则显得尤为重要。本研究在前期基础研究工作的基础上，观察电针尺泽穴对 C OP D 模型大鼠的肺组织形态学、肺功能的影响，以期为针灸治疗该病提供实验依据。

1材料与方法

1.1实验动物

选用 SPF 級雄性 Sprague Dawley 大鼠，体重180～220 g，共24只;来自杭州医学院[许可证号： SCXK（浙）2019-0002]。在实验动物房适应7 d 后造模。按组分笼，在恒温（20±2）℃和恒湿（50±5）%条件下饲养，自由饮食。实验过程严格遵守科技部《关于善待实验动物的指导性意见》中相关规定。

1.2主要仪器

多道生理信号采集处理系统（型号： RM 6240 B ，成都仪器厂）;自制的烟熏箱（80 cm×50 cm×100 cm）、气管滴管以及大鼠柔软固定器等。

1.3药物及试剂

脂多糖（lipopolysaccharide，LPS，中国生物检验检定所）;白色七匹狼牌香烟（福建中烟工业有限责任公司，焦油量12 mg，烟碱0.9 mg，一氧化碳13 mg）;二甲苯（国药集团化学试剂有限公司，批号：20150409）;甲醇（国药集团化学试剂有限公司，批号：20200827）;生理盐水（福州海王福药制药有限公司）。

1.4造模与干预

所有大鼠适应性饲养1周后，随机分为正常对照组（8只）和模型组（16只），模型组采用烟熏联合 LPS 气管内滴注的方式造模[3]。造模成功后，将模型组大鼠随机分为模型对照组和尺泽干预组各8只。

1.5干预方式

尺泽干预组：取尺泽穴（大鼠前肢肘横纹外侧凹陷处，在肱二头肌肌腱外侧）[4]，穴位常规消毒，以0.25 mm×13 mm 华佗牌无菌毫针直刺该穴，连接 SDZ-Ⅱ电针仪，强度1 mA，以针体轻微抖动为度，疏密波，频率2/10 Hz，30 min/次，1次/d，共干预4周（28 d）;正常对照组和模型对照组同等抓取固定在自制鼠套里。

1.6观察指标

肺功能：主要观察两项内容，即肺弹性阻力（cmH2O/ml），肺每分通气量（ml）。肺组织形态学：主要观察肺组织的色泽、质地，肺间质是否有炎症细胞浸润以及支气管管壁是否增厚。

1.7统计学处理

本研究数据用 SPSS 17.0统计软件进行分析处理，进行正态检验，符合正态分布计量资料以均数±标准差（ x ±s）形式表示，进行方差分析、 LSD 检验， P <0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1各组大鼠一般状况比较

造模前各组大鼠毛色亮白、有光泽，体型、进食饮水正常，排泄物正常，各项指标及体重等比较，差异无统计学意义（ P >0.05），具有可比性。

2.2电针尺泽穴对COPD大鼠肺通气功能的影响

与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺弹性阻力下降，每分通气量明显下降，差异均有统计学意义（ P <0.01），提示模型大鼠肺通气功能受损。与模型对照组比较，尺泽干预组肺弹性阻力上升，差异有统计学意义（ P <0.01），每分通气量明显上升，差异有统计学意义（ P <0.01）;与正常对照组比较，尺泽干预组肺弹性阻力、每分通气量无明显变化，差异无统计学意义（ P >0.05）。见表1。

2.3电针尺泽穴对COPD大鼠肺脏外观及肺组织形态学的影响

正常对照组大鼠肺色泽粉嫩，质地柔软，模型对照组大鼠肺色泽略有苍白，肺脏边缘质地较僵硬有塑料感，呈现轻微纤维化倾向。见图1。

正常对照组大鼠的肺组织肺泡大小均一，肺泡壁结构完整。与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺组织内出现轻度肺气肿改变，肺间质炎症细胞浸润。见图2。

从外观上看，正常对照组大鼠肺色泽粉嫩，质地柔软，模型对照组大鼠肺色泽苍白，组织质地较僵硬有塑料感，呈现纤维化倾向;尺泽干预组大鼠肺色泽鲜红，质地较模型组柔软，少部分见纤维化倾向。见图3。

正常对照组大鼠的肺组织肺泡大小均一，肺泡壁结构完整。与正常对照组比较，模型对照组大鼠肺泡结构紊乱肺泡高度扩张，肺泡间隔变窄甚至断裂合成肺大疱（肺气肿改变），肺间质炎症细胞浸润。模型对照组支气管管壁增厚，杯状细胞数目增多，腺体增生肥大。

与模型对照组比较，尺泽干预组肺泡扩张融合程度明显改善，局部仅有轻度间质性炎症、间质增生以及少量炎症细胞浸润;支气管壁轻微增厚，少量杯状细胞增生。见图4。

3讨论

COPD 是一种具有气流受限特征的肺部疾病，这种气流受限不完全可逆，且呈进行性发展，它的发生与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关。随着病情反复发作、急性加重，导致肺功能逐渐下降，出现日常活动甚至休息时也感到气短[5-9]。由于 COPD 病因未完全阐明，临床上主要以预防、综合治疗和治疗措施个体化等对症治疗原则，目前仍缺乏有效的病因治疗方法。

西医多采用 COPD 全球策略（GOLD）分级治疗方法[10]，但不能逆转肺功能进行性降低，且带来较大的副作用。近年来，随着人们对 COPD 认识的逐步加深，针灸在治疗 COPD 方面取得了显著的疗效。手太阴肺经，上膈属肺，尽管肺经上的每一个穴位都可以用以治疗肺和肺系的病变，但不同的穴位还具有相对特异性[11]。尺泽为手太阴肺经五俞穴之“合穴”，《素问至真要大论》言：“尺泽绝，死不治”，强调了尺泽穴的重要性;在《经穴解》中指出：“穴名尺泽者，在肘而知尺……水之所聚为泽，故曰尺泽”，强调了尺泽为肺经之“合穴”，有“合主逆气而泄”的作用;而在《针灸甲乙经》中则提出了尺泽可治胸肺部“气逆”诸症。可见，尺泽穴历来都被医家用之于主治与 COPD 临床表现相关的“胀满”“喘”“咳”这三种的典型症状。

肺功能是判断 COPD 病情进展的一个非常重要的指标，目前国内外学者认为 COPD 肺功能下降是一个渐进的过程，这也为针灸治疗该病提供了一个很好的途径。本研究的 COPD 模型大鼠肺功能下降表现为每分通气量降低，肺弹性阻力下降，这与人类 COPD 的临床表现的特点基本一致，也进一步证实了本研究的 COPD 模型是成功的。对模型大鼠进行4周的电针尺泽穴干预后，COPD 大鼠肺弹性阻力上升，每分通气量也明显上升;肺弹性阻力，每分通气量的恢复程度与正常老鼠无差异。中医经络学说认为，经脉内属于腑脏，外络于肢节，行气血而通阴阳。既往的研究发现，电针刺激穴位不仅能够引起经脉线上相关的能量代谢发生改变，而且还可以调节其相应的脏腑功能[12-20]，经络在调控脏腑疾病过程中起到极其重要的作用。尺泽穴属于手太阴肺经，经脉所过，主治所及，电针刺激尺泽穴能够改善 COPD 大鼠肺功能也进一步说明了这一点。

从肺脏外观图片看，正常对照组大鼠肺色泽粉嫩，质地柔软;模型对照组大鼠肺色泽苍白，外表皱缩，组织质地较僵硬有塑料感，呈现纤维化，有些分布有黑色斑点。根据模型对照组肺部组织形态学的变化，进一步证实了本实验采用烟熏+LPS 气道滴注的造模方式是成功的。众所周知，经络是以十二经脉为主体，网络遍布全身的一个复杂体系，是人体机能的联络、调节和反应系统，针灸刺激穴位通过经络的传导途径到达其相应的脏腑，从而达到治疗疾病的作用[21-22]。本实验电针尺泽穴可使 COPD 模型大鼠肺保持色泽鲜红，质地较模型对照组柔软，少部分见纤维化倾向，无黑点分布。尽管尚未完全达到正常对照组水平，但与模型对照组比较，尺泽干预组肺泡融合程度有所改善，局部间质仅少量炎症细胞浸润和少量杯状细胞增生，支气管壁略微增厚。实验结果表明，电针尺泽穴能够减低 COPD 大鼠的肺部组织炎症细胞的浸润，从而改善 COPD 大鼠肺组织形态学。

综上所述，针灸对 COPD 仍然是一种绿色、有效的治疗方法，它不仅能够改善 COPD 大鼠的肺功能，而且还能进一步改善 COPD 大鼠肺组织形态学，从而达到有效治疗 COPD 的作用，值得进一步推广与运用。

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（收稿日期：2021-11-01）