献血者ALT 检测结果追踪与检测功效的重新评估

冯娟，杨波

（安阳市中心血站，河南 安阳455000）

丙氨酸氨基转移酶 （alanine aminotransferase,ALT）是我国现行献血法规定的无偿献血者必须检测的项目之一，ALT 作为非特异性检测指标，曾作为非甲非乙型肝炎的替代性检测指标， 在血液安全中发挥了重要的作用， 但由于该项检测指标的非特异性使得ALT 成为血液报废的首要原因[1-2]。2013 年8 月血站开始执行卫生部颁布的行业新标准[3]，ALT 参考区间上限由原来40 U/L 调整为50 U/L，在一定程度上降低了由ALT 非特异性升高导致的血液报废[4]。 但随着4 代ELISA 试剂的普遍应用及血液核酸检测的全面覆盖，ALT 引入献血者筛查的意义已经发生了改变,对比国际上许多国家的筛查模式，是否取消ALT 的筛查或调整ALT 的筛查上限成为国内业内人士关注热议的焦点[5]，因此我们应该重新正确评估ALT 在现行血液检测模式中的功效与意义。

1 材料与方法

1.1 研究对象 我站2017 年7 月至2018 年7 月251 例ALT 单项检测不合格再次献血的献血者。

1.2 仪器 奥林巴斯AU400 全自动生化分析仪（日本OLYMPUS），ML-STAR CH.8 全自动加样系统（瑞士HAMILTON），ML-FAME 24/20 全自动酶免后处理系统（瑞士HAMILTON），Uranus AE280 全自动酶免仪 （深圳爱康），ChiTas BSS1200 核酸血液筛查系统 （上海浩源生物科技有限公司），ABI7500 实时荧光定量PCR 仪 （美国应用生物系统公司）。

1.3 试剂 ALT 试剂： 美国贝克曼ALT 速率法；HBsAg 试剂：北京万泰、法国伯乐；抗-HCV 试剂：北京万泰、珠海丽珠；PCR 试剂：上海浩源乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒PCR-荧光法。 以上试剂均有国家批准文号和批批检标识， 且在有效期内使用。

1.4 方法

1.4.1 常规检测 采用酶联免疫吸附法（ELISA）对血液标本分别进行2 次HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、抗-TP 检测， 采用速率法对献血者标本进行1 次ALT 检测（采血前已进行1 次速率法检测）。

1.4.2 核酸检测 采用PCR 方法对酶免检测阴性的血液标本进行乙型肝炎病毒（HBV-DNA）、丙型肝炎病毒（HCV-RNA）、人类免疫缺陷病毒（HIVRNA）定性检测。

1.4.3 追踪检测 2017 年7 月至2018 年7 月期间74 038 名献血者中因ALT 单项检测不合格的251例献血者， 对其再次献血进行ALT、HBsAg、 抗-HCV 和HBV-DNA、HCV-RNA 追踪检测。

1.5 统计学处理 应用SPSS 18.0 软件进行统计分析，计数资料比较采用χ2检验，计量资料采用±s表示， 组间比较采用t 检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 献血者ALT 与肝炎病毒指标相关性比较 结果 988 例ALT 不合格、73 050 例ALT 合格标本与HBsAg、HBV-DNA、抗-HCV、HCV-RNA 相关性结果比较，χ2值分别为2.69、0.32、9.36、0.03。见表1。

表1 献血者ALT 与肝炎病毒指标相关性比较

2.2 献血者ALT 不合格追踪结果比较 251 例ALT 单项检测不合格的献血者6 个月后再次献血ALT 不合格率为26.69%（67/251）；12 个月后再次献血ALT 不合格率为25.71%（27/105）； 肝炎病毒相关性指标检测全部阴性。 见表2。

表2 献血者ALT 不合格追踪结果比较

2.3 重复献血者ALT 不合格次数结果比较 ALT 1次不合格、连续2 次不合格、连续3 次不合格检测值分别为 （57.77±6.85）、（96.86±45.32）、（90.00±37.44）； 不同组别之间比较t 值分别为0.25、6.17、6.83。 见表3。

表3 重复献血者ALT 不合格次数结果比较（±s）

表3 重复献血者ALT 不合格次数结果比较（±s）

ALT 例数（n）1 次不合格连续2 次不合格连续3 次不合格P 60 57 28 ALT 值（U/L） t 57.77±6.85 96.86±45.32 90.00±37.44 0.25 6.17 6.83 P＞0.05 P＜0.05 PP＜0.05

3 讨论

42 例HBV-DNA 反应性和2 例HCV-RNA 反应性标本ALT 检测均为合格，说明ALT 异常升高晚于核酸检测，这与金新莉等研究结果[6]是一致的， 因此ALT 检测对筛查HBV、HCV 窗口期感染无相关性意义。 386 例HBsAg 反应性和169 例抗-HCV 反应性标本中ALT 检测不合格仅为16 例，明显低于非肝炎性ALT 异常升高，16 例病毒性肝炎合并ALT 异常升高者其ALT 值并无规律可寻，这是由于重型肝炎存活的肝细胞较少，ALT 活性反而随着病情的恶化而降低， 因此不能简单地以ALT 升高的程度来判断肝炎病情， 也不能以ALT异常升高而判断受检者是否患有病毒性肝炎[7]。ALT 与肝炎病毒指标统计分析发现，HBsAg、HBVDNA、HCV-RNA 反应性与ALT 不合格之间无统计学意义， 但抗-HCV 反应性与ALT 不合格之间具有统计学意义，提示ALT 检测在HCV 检测中具有一定意义，其影响因素应做进一步研究，完全取消ALT 检测从血液安全角度考虑有失偏颇。

对于251 例ALT 升高献血者追踪6 个月后发现，26.69%献血者ALT 仍升高； 其中105 例ALT升高献血者继续追踪12 个月后发现，25.71%献血者ALT 仍升高，且肝炎相关性指标均为阴性，无1例发展成为病毒性肝炎。 说明251 例ALT 升高人群中约3/4 为非特异性ALT 升高，1/4 为非肝炎特异性升高，均无肝炎相关性，非特异ALT 升高与性别、年龄、献血季节等相关因素有关[8]。 经追踪发现，存在非肝炎性ALT 特异性升高人群，该人群无肝炎感染， 但能较为稳定地维持在正常水平以上的ALT 值，这应与饮酒、睡眠、运动等一过性影响因素无相关性。 有研究表明BMI、肥胖所引起的代谢综合征、 非酒精性脂肪肝病导致的肝细胞损害都是ALT 升高的因素之一[9-10]，该结论需进一步进行非肝炎性ALT 特异性升高人群分布与调查后得以证实。

随机抽取145 份ALT 不合格次数不同的三组重复献血者， 发现连续2 次不合格和连续3 次不合格的献血者ALT 的均值之间无统计学意义，但与一次不合格的献血者ALT 均值比较具有统计学意义。 连续多次ALT 不合格ALT 水平明显高于一次不合格ALT 水平，50 U/L~90 U/L 区间的ALT 升高人群多为非特异性ALT 升高， 由非病理性因素引起且与肝炎病毒无关， 但其报废的血液超过75%， 这与刘如萱发表献血者80%以上的ALT 不合格不是由于急性病毒性肝炎引起的观点[11]比较接近，临床肝炎防治指南[12-13]设定ALT 的2 倍正常值作为参考标准， 因此笔者认为有必要调整血液筛查ALT 检测上限。

综上所述， 目前血液肝炎相关性检测技术已发展较为成熟，且核酸检测已全覆盖，应摒弃过去把ALT 检测作为病毒性肝炎的淘汰依据， 可以增加肝炎特异性检测项目作为血液筛查的依据，应调整非肝炎性ALT 特异性升高人群的检测上限，虽然ALT 血液筛查是一项低成本的检测项目，但其较低的特异性所带来高报废率及负面影响不可估量。