上皮性卵巢癌组织中miR-506-3p及miR-532-5p的表达与临床病理特征及预后的相关研究

林燕玲，王 瑛，张 敏，康 灵，邢维珍，黎先萍（上海儿童医学中心三亚市妇女儿童医院，海南三亚 572000）

上皮性卵巢癌（epithelial ovarian cancer，EOC）是常见的影响女性生命健康的恶性肿瘤，晚期EOC的生存率较低[1-2]。微小核糖核酸(microRNA，miRNA)是一类小分子RNA，参与EOC的发生发展，有望作为EOC的诊断标志物[3-4]。研究发现，EOC存在miR-506-3p及miR-532-5p的异常表达，其可能为EOC的诊断、治疗和预后提供重要的帮助[5-6]。本研究通过检测miR-506-3p及miR-532-5p在EOC组织中的表达情况，分析其预测EOC预后的价值，为EOC的治疗提供指导。

1 材料与方法

1.1 研究对象 选取2017年1月～2019年12月三亚市妇女儿童医院和三亚中心医院收治的118例EOC患者，年龄37～74(54.28±10.35)岁。纳入标准：①符合国际妇产科联合会(FIGO)[7]分类标准，经病理确诊；②符合肿瘤细胞减灭手术指征者。排除标准：①术前已接受其他治疗者；②并发其他恶性肿瘤。术后每3个月对EOC患者随访1次，随访截止时间为2020年12月31日，记录患者的总生存时间（overall survival，OS）和无进展生存时间(progression-free survival，PFS)。本研究符合医学伦理，患者知情同意。

1.2 仪器与试剂 SLAN-96S荧光定量PCR仪（上海宏石医疗科技公司），PCR所有相关试剂盒(上海联迈生物工程有限公司)，离心机(上海电器有限公司)产品。

1.3 方法 采集EOC组织及其相应正常组织，Trizol法提取总RNA，使用荧光定量PCR仪检测。反应体系为20μl：1μl 引物及探针Mix（20×），10μl TaqMan通用混合物溶液（2×），1.33 μl反向转录脱氧核糖核酸，7.67μl双蒸馏水。扩增条件为：95℃预变性10 min，95℃变性15 s，60℃复性60 s。采用2-△△Ct法计算miR-506-3p及miR-532-5p水平。

1.4 统计学分析 采用SPSS 20.0软件。计量资料以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用配对t检验；计数资料比较采用χ2检验。采用COX回归分析影响EOC患者预后的因素。P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同组织miR-506-3p及miR-532-5p水平比较 EOC组织中miR-506-3p的水平为0.31±0.05，miR-532-5p的水平为0.24±0.03，均较癌旁正常组织（1.16±0.42，1.48±0.51）明显减低，差异有统计学意义（t=13.582，16.217，均P＜0.001）。

2.2 miR-506-3p及miR-532-5p水平与临床特征关系 见表1。以miR-506-3p的中位数0.45和miR-532-5p的中位数0.32为临界值，分为miR-506-3p高表达组（miR-506-3p≥0.45，n=57）和miR-506-3p低表达组（miR-506-3p＜0.45，n=61），以及miR-532-5p高表达组（miR-532-5p≥0.32，n=55）和miR-532-5p低表达组（miR-532-5p＜0.32，n=63）。miR-506-3p及miR-532-5p低表达组患者的Ⅲ～Ⅳ期、低分化、淋巴转移及腹膜转移发生率明显高于miR-506-3p及miR-532-5p高表达组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。

表1 miR-506-3p及miR-532-5p水平与临床特征关系[n(%)]

2.3 EOC患者预后与miR-506-3p及miR-532-5p表达的关系 见图1和图2。EOC患者随访时间为9～60个月，中位时间30.4个月。Kaplan-Meier生存分析显示，miR-506-3p低表达组患者OS明显低于miR-506-3p高表达组（χ2=10.758，P＜0.001）；miR-506-3p低表达组患者PFS明显低于miR-506-3p高表达组（χ2=9.658，P＜0.001)，miR-532-5p低表达组患者OS明显低于miR-532-5p高表达组（χ2=12.660，P＜0.001）；miR-532-5p低表达组患者PFS明显低于miR-532-5p高表达组（χ2=10.273，P＜0.001)。

图1 miR-506-3p高表达组与miR-506-3p低表达组EOC患者OS及PFS比较

图2 miR-532-5p高表达组与miR-532-5p低表达组EOC患者OS及PFS比较

2.4 EOC患者预后影响因素分析 见表2。COX回归分析模型显示，淋巴结转移[HR（95%CI）=1.840（1.137～4.105）]，腹膜转移[HR（95%CI）=2.974（2.106～6.113）]，miR-506-3p＜0.45[HR（95%CI）=1.902（1.217～4.533）]及miR-532-5p＜0.32[HR（95%CI）=2.506（1.582～4.905）]是影响EOC患者预后不良的独立危险因素（P＜0.05）。

表2 EOC患者预后影响因素分析

3 讨论

上皮卵巢癌（EOC）是一种好发于女性的恶性肿瘤，其发生发展与基因异常表达高度关联，而miRNA的表达在EOC中发挥了极为关键的作用。早期对EOC患者进行预后预测有助于提高患者的生存率。miRNA作为一类非编码RNA，参与调控EOC的发病机制，有望作为EOC诊断及预后评估的重要指标[8-9]。有研究发现，miRNA在EOC中低表达，其过度表达降低了EOC细胞活力并抑制其迁移、侵袭和增殖，在EOC转移和进展中起着关键作用，为EOC的临床治疗提供潜在的指导[10]。

本研究miR-506-3p及miR-532-5p在EOC组织较正常组织明显降低，提示其低表达可能参与EOC的发生。既往研究显示，miR-506-3p在EOC组织中存在低表达，miR-506-3p可能是一个抑癌基因，对EOC细胞增殖、细胞周期进程和凋亡具有抑制作用，将来可能为EOC的治疗提供新的方向[11]。另有研究发现，miR-532-5p在EOC中的表达降低，其降低与细胞增殖、侵袭及转移有关，是EOC发病中较为关键的作用基因[12]。本研究中miR-506-3p及miR-532-5p表达降低与EOC临床分期大，分化程度低，有淋巴结转移及腹膜转移有关，提示其低表达可能促进疾病的病情进展。SAMUEL等[13]研究认为，EOC组织中miRNA的表达较正常组织减低，其低表达与疾病进展相关，可为EOC的诊断及预后指导提供较大的帮助。

本研究通过分析EOC患者生存情况与miR-506-3p及miR-532-5p表达的关系，发现miR-506-3p及miR-532-5p低表达与EOC患者生存期短有关，提示检测miR-506-3p及miR-532-5p水平有助于指导EOC的预后情况。本研究多因素分析显示，EOC患者预后不良的独立危险因素为淋巴结转移、腹膜转移、miR-506-3p＜0.45及miR-532-5p＜0.32，进一步说明了miR-506-3p及miR-532-5p低表达与EOC预后不良密切相关。XIA等[14]研究指出，EOC组织miR-506-3p表达下调，其高表达可抑制EOC的进展，检测miR-506-3p水平可为EOC的治疗提供重要的指导。WEI等[15]研究认为，miR-532-5p的低表达与EOC的临床分期和转移高度相关，参与促进EOC组织细胞的增殖、集落形成和侵袭，是EOC患者预后不良的独立危险因素，有望作为EOC治疗的潜在靶点及新的预后标志物。另有研究表明，EOC的发生、进展与miRNA的异常表达有关，miRNA作为预测EOC预后的标志物具有很好的应用前景[16]。

综上认为，miR-506-3p及miR-532-5p在EOC组织表达减低，其低表达与EOC患者预后不良有关，对EOC患者预后预测具有一定的指导意义。但本研究随访时间较短，其结果可能存在一定的偏差，尚需更多的前瞻性研究共同来验证。