前列腺癌患者血液中PSA、TAP、MACC1 的表达及其诊断价值

王 慧，赵 莹，温丽蓉，曹 军，羊继平，原永明

1.上海市徐汇区大华医院检验科，上海 200237；2.上海交通大学医学院附属瑞金医院检验科，上海 200025；3.上海市徐汇区大华医院介入肿瘤科，上海 200237；4.上海市徐汇区大华医院泌尿外科，上海 200237

前列腺癌是发生在前列腺上皮的恶性肿瘤，是男性第二大癌症。该病早期无明显症状，随着疾病的进展可表现为排尿困难、尿流中断、夜尿增多等，严重者还可侵及膀胱，引起血尿、血精、阳痿，严重影响患者的生活质量［1-2］。由于前列腺癌发病早期症状隐匿，导致大多数患者确诊时已是晚期，错过了最佳治疗时间。因此，早期诊断对改善患者预后具有重要意义［3］。前列腺特异抗原（prostate specific antigen，PSA）由前列腺上皮细胞分泌，广泛用于前列腺疾病诊断。有研究［4］显示，肿瘤异常蛋白（tumor abnormal protein，TAP）检测可有效筛查肿瘤高危人群，是病理诊断的“有益补充”，其水平与恶性肿瘤的发生有关，可作为评估患者肿瘤增殖、转移的重要参考指标。有研究［5］显示，前列腺癌患者血液结肠癌转移相关基因1 （colon cancer metastasis related gene 1，MACC1）水平显著升高，能够反映前列腺癌的进展，且与疾病的恶性演变、淋巴结转移及远处转移有关，可作为预测前列腺癌进展、判断恶性程度的潜在血液生物标志物。PSA检测用于前列腺癌诊断已有大量研究，也是前列腺癌诊断的标志物之一，但与TAP、MACC1 联合用于前列腺癌诊断的相关报道较少。因此，本研究拟探讨血液PSA、TAP 及MACC1联合检测对前列腺癌的诊断价值。

1 对象与方法

1.1 研究对象及其资料收集

回顾性分析2019 年1 月—2020 年12 月上海市徐汇区大华医院收治的107 例前列腺癌患者（病例组）病历资料，包括Gleason 评分、T 分期、有无淋巴结转移等。患者平均年龄（58.37±5.29）岁；均参照《中国前列腺癌放射治疗指南》中的诊断标准［6］，经穿刺病理活检确诊，且合并排尿异常、勃起障碍等症状。纳入标准：心、脑、肾等器官无明显障碍；无胰岛素治疗史；相关指标数据完整。排除标准：近期接受过正规免疫调节剂治疗；心功能异常；近3 个月有严重创伤或者接受过手术；有严重自身免疫性疾病；需要肾脏移植；日常生活能力丧失，完全依赖协助护理；无法言语交流。

另选取同期在该院进行健康体检的60 名男性健康体检者作为对照组，平均年龄（58.19±7.38）岁。2组平均年龄比较，差异无统计学意义。

1.2 方法

1.2.1 PSA、MACC1 及TAP 检 测 方 法 ①PSA、MACC1 检测：采集所有患者入院后治疗前、健康体检者体检当日的空腹静脉血5 mL，以2 319×g离心10 min，分离血清，置于离心管中，冷冻保存；其中PSA 采用美国Abbott I4000 全自动化学发光分析仪进行检测；MACC1 采用美国Cell Signaling Technology公司酶联免疫吸附试剂盒，均严格按照仪器及试剂的标准操作规程进行检测。②TAP检测：采集所有患者入院后治疗前、健康体检者体检当日新鲜EDTA 抗凝静脉血2 mL，取25 μL在玻片上制作成厚薄均匀的血涂片，晾干后垂直均匀滴加TAP 试剂3滴，形成圆形斑点颗粒，采用浙江瑞生RS-2011ATAP 集成阅片仪采集颗粒图片并测量斑点颗粒面积，按检测说明书进行结果判读。

1.2.2 Gleason 评分和T 分期 参照《前列腺癌规范化标本取材及病理诊断共识》（2021 版）［7］，由病理科医师根据病理结果进行Gleason 评分；参照《恶性肿瘤的TNM分类法》［8］对肿瘤进行T分期。

1.3 统计学方法

采用SPSS 24.0 软件进行统计分析。呈正态分布的定量资料以±s表示，2 组间比较采用独立样本t检验，多组间比较采用方差分析。采用Spearman 相关性分析评估各项目与Gleason评分和T分期的相关性。采 用 受 试 者 操 作 特 征 （receiver operating characteristic，ROC） 曲线评价血液PSA、TAP 及MACC1 诊断前列腺癌的效能。P<0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组血液PSA、TAP及MACC1表达结果分析

病例组患者血液PSA、TAP 及MACC1 水平均显著高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。

表1 2组患者血液PSA、TAP及MACC1水平比较（±s）Tab 1 Comparison of blood PSA，TAP and MACC1 levels between the two groups（±s >）

表1 2组患者血液PSA、TAP及MACC1水平比较（±s）Tab 1 Comparison of blood PSA，TAP and MACC1 levels between the two groups（±s >）

Case group（n=107）Control group（n=60）t value P value 14.35±5.13 4.16±1.34 15.082 0.000 174.58±19.63 74.29±8.04 37.796 0.000 52.41±12.89 29.84±6.33 12.718 0.000

2.2 血液PSA、TAP 及MACC1 水平与临床病理特征的关系

随着Gleason 评分的升高，前列腺癌患者血液中PSA、TAP 及MACC1 水平逐渐升高；随着T 分期的进展，患者血液PSA、TAP 及MACC1 水平也逐渐升高；有淋巴结转移患者PSA 和MACC1 水平高于无淋巴结转移患者（P<0.05）；有淋巴结转移患者血液TAP 水平低于无淋巴结转移患者（P<0.05）。详见表2。

表2 患者血液PSA、TAP及MACC1水平与临床病理特征的关系分析（±s）Tab 2 Analysis of the relationship between PSA，TAP，MACC1 and clinicopathology in the case group（±s ）

表2 患者血液PSA、TAP及MACC1水平与临床病理特征的关系分析（±s）Tab 2 Analysis of the relationship between PSA，TAP，MACC1 and clinicopathology in the case group（±s ）

Clinic pathologic feature n PSA/（μg‧L-1）TAP/μm2 MACC1/（ng‧mL-1）Age<65 years≥65years t/F value P value Gleason score 2-4 score 5-7 score 8-10 score t/F value P value T satge T1 T2 T3-T4 t/F value P value Lymphatic metastasis Yes No t/F value P value 54 53 14.15±5.08 14.55±5.26 0.400 0.689 175.54±20.15 173.60±20.25 0.467 0.620 52.18±12.91 52.64±13.07 0.183 0.855 7 48 52 9.25±4.12 14.08±5.03 19.31±5.19 20.599 0.000 148.34±18.58 172.18±19.22 201.41±19.34 42.023 0.000 39.95±10.23 50.89±12.83 65.66±13.04 23.543 0.000 29 47 31 9.14±3.26 14.19±4.89 17.79±4.93 27.629 0.000 146.12±19.12 168.58±19.58 199.37±20.12 56.084 0.000 40.16±10.25 51.97±12.78 60.58±12.83 21.247 0.000 62 45 16.58±6.12 11.28±5.89 4.492 0.000 121.48±20.59 147.07±19.87 6.439 0.000 73.53±6.58 37.08±5.03 31.127 0.000

2.3 血液PSA、TAP 及MACC1 诊断前列腺癌的效能

血液PSA 诊断前列腺癌的ROC 曲线下面积（area under the curve，AUC） 为0.764，灵 敏 度 为86.12%，特异度为88.63%，截断值为6.01μg/L；血液TAP 诊断前列腺癌的AUC 为0.796，灵敏度为88.18%，特异度为89.58%，截断值为135.62 μm2；血液MACC1 诊断前列腺癌的AUC 为0.873，灵敏度为78.46%，特异度为80.10%，截断值为37.80 pg/mL；3 项指标联合检测的AUC 为0.941，灵敏度为93.15%，特异度为94.08%，均高于各单项指标（P<0.05）。详见图1。

图1 血液PSA、TAP及MACC1诊断前列腺癌的ROC曲线Fig 1 ROC curve of blood PSA, TAP and MACC1 in predicting prostate cancer

2.4 血液PSA、TAP及MACC1水平与Gleason评分、T分期的相关性分析

Spearman相关性分析结果显示，血液PSA、TAP及MACC1 水平均与Gleason 评分呈正相关（r值分别为0.648、0.513和0.501，均P=0.000），与T分期呈正相关（r值分别为0.616、0.537 和0.542，均P=0.000）。

3 讨论

前列腺癌是临床上较常见的男性恶性肿瘤，通常好发于中老年男性。随着人们生活水平的提高和人口老龄化，亚洲国家的前列腺癌发病率逐年升高，严重影响患者生活质量，甚至危及患者生命。据世界卫生组织国际癌症研究机构统计，2020 年中国前列腺癌发病率约15.6/100 000，新发病例超11 万，死亡人数超5万［9］。由于前列腺癌早期症状不明显，多数患者发现时已开始转移，导致预后不良。因此，早期发现和诊断前列腺癌，始终是临床研究的热点。

PSA是激肽酶家族蛋白，主要由前列腺上皮细胞分泌，正常时仅有极低水平的PSA 存在于血液中，血液中PSA 水平的升高预示前列腺发生病理变化或受到创伤。在绝大多数前列腺癌患者中，PSA水平升高，因此PSA 是诊断前列腺癌的首选标志物［10-11］。但PSA 无肿瘤特异性，在前列腺增生和前列腺炎患者中均升高。PSA 在血液中主要存在结合与非结合2种形式，血液中大部分PSA 与多种内源性蛋白酶抑制剂相结合形成复合PSA，如与α1-抗糜蛋白酶（α 1-antichymotrypsin，α1-ACT） 结合构成PSA-ACT，是血液中复合PSA 的主要构成形式，也是目前免疫学方法能检测到的主要成分。因其他几种结合形式的抗原决定簇被人α2-巨球蛋白所掩蔽，不能被PSA 检测抗体所识别，剩余少部分PSA 在血液中处于游离状态，成为游离PSA（free-PSA，fPSA）。因此，临床检测的总前列腺特异性抗原（total prostate-specific antigen，tPSA）仅是fPSA 与PSA-ACT 之和。tPSA和fPSA 在血液中的半衰期只有几个小时，且随着时间的推移，稳定性下降，尤其是fPSA更不稳定。

TAP是近年来发现的一类细胞癌变初期致癌因子促发原癌基因和抑癌基因突变后的肿瘤标志物。在细胞开始恶化时，细胞膜表面的聚糖结构发生异常，导致TAP 大量释放入体液中，其已在乳腺癌、胃癌等疾病筛查及预后中得到广泛应用［12-13］。有研究［14］显示，TAP水平与恶性肿瘤的发生有关，可作为评估患者肿瘤增殖、转移的重要参考指标。

MACC1是在结肠癌中与转移相关的基因，可诱导肿瘤细胞的转移，是结肠癌患者肿瘤转移和生存预后的预测因子。MACC1 主要通过促进肿瘤血管形成及激活相关信号通路等来维持恶性肿瘤的侵袭性［15］。有研究［16］显示，MACC1 可诱导结肠肿瘤细胞在肺、肝脏出现转移。本研究结果显示，前列腺癌患者血液PSA、TAP 及MACC1 水平显著高于健康人群，提示PSA、TAP 及MACC1 可作为诊断前列腺癌的重要标志物。PSA具有组织特异性，只存在于人前列腺腺泡及导管上皮细胞的胞质中，不表达于其他细胞；但无肿瘤特异性，前列腺炎、良性前列腺增生和前列腺癌均可导致tPSA 水平升高。TAP 为肿瘤细胞增殖过程中细胞膜表面结构中的N-链聚糖分支，在恶性肿瘤发生后，该物质大量释放入血液。MACC1 则通过参与相关血管生成因子的分泌，促进肿瘤血管的形成。本研究ROC 曲线分析结果进一步显示，这3 项指标的联合检测效能显著优于单项检测。

Gleason评分是常用的前列腺癌组织学分级方法，对评估前列腺肿瘤的恶性程度、判断肿瘤侵袭程度具有重要的参考价值［17］。本研究结果显示，血液中PSA、TAP 及MACC1 可随着Gleason 评分及T 分期的升高而升高，可作为评估疾病严重程度的参考指标。本研究进一步进行Spearman 相关分析，结果显示血液中PSA、TAP 及MACC1 水平与Gleason 评分、T 分期均呈正相关。分析其原因，可能是因为前列腺癌T分期、Gleason评分越高，癌组织侵袭范围越大，导致前列腺结构受损更严重，淋巴管壁结构破坏更大，促使PSA弥散进入血液量增多，导致PSA等水平升高。

总之，血液中PSA、TAP 及MACC1 水平均与前列腺癌Gleason 评分和T 分期之间关系密切，对诊断前列腺癌有重要的临床参考价值，且3 项联合检测价值更高。但本研究属于单中心小样本研究，未来仍需进一步扩大样本采集量；同时，也需进一步开展前瞻性研究，以阐明血液中PSA、TAP 及MACC1 在前列腺癌发生中的相关机制。

利益冲突声明/Conflict of Interests

所有作者声明不存在利益冲突。

All authors disclose no relevant conflict of interests.

伦理批准和知情同意/Ethics Approval and Patient Consent

本研究涉及的所有实验均已通过上海市徐汇区大华医院伦理委员会的审核批准（审批号：20210810）。所有实验过程均遵照《药物临床试验伦理审查工作指导原则》的条例进行。受试对象或其亲属已经签署知情同意书。

All experimental protocols in this study were reviewed and approved by the ethics committee of Dahua hospital， Xuhui District，Shanghai （approval No. 20210810）， and all experiments were conducted in accordance with the regulations of the guiding principles for ethical review of drug clinical trials. The subjects or their relatives have signed the informed consent form.

作者贡献/Authors'Contributions

王慧、原永明、曹军参与了研究设计；王慧、赵莹、温丽蓉、羊继平参与了论文的写作和修改；所有作者均阅读并同意了最终稿件的提交。

WANG Hui， YUAN Yongming and CAO Jun participated in the experimental design.WANG Hui， ZHAO Ying， WEN Lirong and YANG Jiping participated in the writing and revision of the paper.All the authors have read the last version of paper and consented for submission.

·Received：2021-12-13

·Accepted：2022-03-09

·Published online：2022-04-28