任艳华,张隽美,隋修磊,周传江,孟晓林,聂国兴,张玉茹
( 河南师范大学 水产学院,河南 新乡 453007 )
表1 每种营养指标测定所用的样本数
取试验鱼的背鳍,用线粒体DNA中COⅠ基因核实其物种。PCR扩增后产物送到武汉天一辉远生物科技有限公司测序。测序结果用BLAST进行搜索并下载进化过程中代表物种以及相似度较高的序列,用MEGA-X[12]作系统演化分析。
先对鱼进行麻醉处理,并将表面水分吸干,测量全长,称量体质量。营养性能指标测定先将其解剖分离出需要称量的皮肤、性腺、鳃、内脏及鳍条,然后将剩余部分擦干后,拿纱布裹起来,转移至沸水中煮至骨肉分离为止。取出后吸干水分去除肌肉,称其骨骼质量。计算其含肉率(wR,%)、肥满度(CF)和性腺指数(wGSI,%):
wR=m1/m×100%
(1)
CF=100m/L3
(2)
wGSI=m2/m×100%
(3)
式中,m为鱼体质量(g),m1为肌肉质量(g),L为体长(cm),m2为性腺质量(g)。
wZC=(m3-m4)/m3×100%
(4)
wDC=(m5-m6)/m5×100%
(5)
wZZ=(m7-m8)/m7×100%
(6)
式中,m3为处理(1)的初始样品质量(g),m4为处理(1)的终末后样品质量(g);m5为处理(2)的初始样品质量(g),m6为处理(2)的终末后样品质量(g);m7为处理(3)的初始样品质量(g),m8为处理(3)的终末后样品质量(g)。
wSF=[m9-(m10-m11)]/m9×100%
(7)
wCZ=(m12-m13)/m9×100%
(8)
wHF=(m15-m14)/m9×100%
(9)
(10)
式中,m9为样品质量(g),m10为(105±2) ℃烘干后试样及称量瓶的质量(g),m11为已干燥的称量瓶的质量(g);m12为滤纸和样品质量(g),m13为提取烘干后滤纸和样品质量(g);m14为坩埚质量(g),m15为灰化后坩埚和样品质量(g);V1为消化液稀释容量(mL),V2为稀释液蒸馏用量(mL),V3为滴定试样时所需盐酸标准滴定溶液体积(mL),V0为滴定空白时所需盐酸标准滴定溶液体积(mL),C为盐酸标准滴定溶液的浓度。
肌肉氨基酸的测定依据GB/T 18654.11—2008,以及参考文献[18]中的方法进行测定。在耐高温和带盖的玻璃管中加入0.1 g肌肉样品和10 mL的1∶1盐酸溶液;氮吹5~10 min后将瓶盖拧紧;置于110 ℃烘箱中水解(24±1) h后,将其冷却过滤转移定容至50 mL容量瓶中;吸取容量瓶中的样品1 mL,用真空脱酸仪60~70 ℃将其脱至底部痕渍或固体极少为脱酸成功;脱酸完成加入1 mL缓冲液并混合均匀后,用0.22 μm过滤器和1 mL注射器将样品吸取过滤入1.5 mL氨基酸专用上样瓶中;使用全自动氨基酸分析仪(德国曼默德的A300)分析测定其氨基酸成分和含量。氨基酸评价方法是国际通用的1973年联合国粮食及农业组织/世界卫生组织推荐的全鸡蛋蛋白质的氨基酸模式[19]与氨基酸评分标准模式[20],按下式计算氨基酸评分(AAS)、化学评分(CS)和必需氨基酸指数(EAAI):
(11)
(12)
(13)
式中,wAA为试验样品的氨基酸含量(mg/g);wFAO/WHO为联合国粮食及农业组织/世界卫生组织评分标准模式中同种氨基酸的含量(mg/g);AEgg为全鸡蛋蛋白质中同种氨基酸的含量(mg/g);n为比较的必需氨基酸个数;A,B,C,…,I为鱼肌肉蛋白质的必需氨基酸含量(mg/g);AE,BE,CE,…,IE为全鸡蛋蛋白质的必需氨基酸含量(mg/g)。
(14)
式中,wAA为肌肉中氨基酸的含量;wMP为肌肉中蛋白质的含量。
肌肉中脂肪酸的营养品质评价采用致动脉粥样硬化指数(IA)和血栓形成指数(IT)[22],计算公式如下:
(15)
(16)
式中,∑PUFA为多不饱和脂肪酸总量,∑MUFA为单不饱和脂肪酸总量,C12:0为月桂酸含量,C14:0为肉豆蔻酸含量,C16:0为棕榈酸含量,C18:0为硬脂酸含量,∑ω-6为ω-6系列脂肪酸总量,∑ω-3为ω-3系列脂肪酸总量。
试验数据的分析处理使用Excel 2010,除脂肪酸成分之外的数据,使用SPSS 22.0作显著性检验;由于脂肪酸提取过程中少量试验数据缺失,致使各组织脂肪酸数据个数不完全一致(非均衡数据),无法用方差分析进行统计分析,因此使用SAS 9.0软件包对不同组织脂肪酸成分进行最小二乘分析和多重比较,用最小二乘均数±标准误表示不同组织的脂肪酸成分和含量;本试验中,除脂肪酸外的其他数据均表示为平均值±标准差。本试验所获得的常规营养成分数据均按照鲜样计算,与其他鱼类对比时的文献数据(粗蛋白、粗脂肪和灰分)中的干样经过公式转换为鲜样,如:粗脂肪鲜样=粗脂肪干样×(1-水分质量分数)。
表2 可量可数性状(n=9)
图1 尖头大吻外观
图2 COⅠ基因序列邻接系统进化树
表3 尖头大吻肌肉氨基酸组成及含量(n=6,鲜样)
表4 尖头大吻肌肉中必需氨基酸组成及评价
图3 尖头大吻7种组织中不饱和脂肪酸和饱和脂肪酸含量比较
表5 尖头大吻7种组织中脂肪酸组成及含量(n=23,最小二乘均数±标准误)
表6 尖头大吻肌肉不同条件失水率(平均值±标准差) %
表7 尖头大吻和其他几种经济鱼类含肉率的比较(平均值±标准差)
表8 尖头大吻肌肉营养成分与其他鱼类比较(湿基)