不同炮制方法对路路通中挥发性成分的影响

刘杰英 杨长福 张明 张娜 李玮 张雪丽 林昶

摘要 [目的]研究路路通清炒法、砂燙法对路路通中挥发性成分的影响。[方法]采用顶空-固相微萃取法（HS-SPME）提取路路通生品及炮制品挥发性成分，运用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）分析并鉴定其挥发性成分，经峰面积归一化法计算各成分的相对质量分数。[结果]从路路通生品、清炒品和砂烫品中分别鉴定出65、71和80种化合物，分别占其挥发性成分总含量的74.08%、71.45%和74.14%。与生品相比，清炒品、砂烫品中烯类成分种类及相对质量分数显著增加;清炒品、砂烫品中酮类相对质量分数显著减少。清炒后挥发油中烯类成分种类从22种增加到29种，相对质量分数从19.15%增加到40.61%;砂烫后挥发油中烯类成分种类从22种增加到36种，相对质量分数从19.15%增加到43.62%。清炒后挥发油中酮类成分相对质量分数从22.27%减少到9.10%，砂烫后挥发油中酮类成分相对质量分数从22.27%减少到6.51%。清炒路路通新产生了7种萜烯类成分，砂烫路路通新产生了14种萜烯类成分，砂烫法较清炒法多增加7种萜烯类成分。[结论]清炒法、砂烫法炮制后，路路通挥发油中烯类成分的种类及相对质量分数显著升高，酮类成分相对质量分数显著降低，砂烫品中新增萜烯类成分较清炒品多。研究结果为不同炮制方法的炮制工艺研究提供试验依据。

关键词 路路通;炮制方法;顶空-固相微萃取;气相色谱-质谱联用;挥发性成分

中图分类号 R283.3  文献标识码 A

文章编号 0517-6611（2022）10-0152-05

doi：10.3969/j.issn.0517-6611.2022.10.034

Effect of Different Processing Methods on Volatile Components in Liquidambar formosana Hance

LIU Jie-ying1，YANG Chang-fu1，2，ZHANG Ming3 et al （1.Guizhou University of Traditional Chinese Medicine，Guiyang，Guizhou 550025;2.Research Center of Traditional Chinese Medicine under Forest of Guizhou University of Traditional Chinese Medicine， Guiyang，Guizhou 550025;3. Key Laboratory of Natural Product Chemistry， Chinese Academy of Sciences，Guiyang，Guizhou 550002）

Abstract [Objective]To study the effect of stir-frying and sand-scorching on volatile components of Liquidambar formosana.[Method]Headspace solid-phase microextraction （HS-SPME） was used to extract the volatile components of Liquidambar formosana raw and processed products， and the volatile components were analyzed and identified by gas chromatography-mass spectrometry （GC-MS）， and the relative mass fraction of each component was calculated by the peak area normalization method.[Result]65，71 and 80 components were respectively identified from Liquidambar formosana，the stir-fried product of Liquidambar formosana and the sand-scorched product of Liquidambar formosana accounted for 74.08%，71.45% and 74.14% of the total content of volatile components，respectively.The types and the relative mass fraction of alkenes in the stir-fried product and the sand-scorched product of Liquidambar formosana were significantly higher than those in raw product;the relative mass fraction of ketones in stir-fried products and sand-scorched products of Liquidambar formosana were significantly reducer than those in raw product. After stir-frying，the types of alkenes increased from 22 to 29 in the volatile oil， and the relative mass fraction increased from 19.15% to 40.61%.After sand-scorching，the types of alkenes increased from 22 to 36 in the volatile oil， and the relative mass fraction increased from 19.15% to 43.62%. After stir-frying ，the relative mass fraction of ketones decreased from 22.27% to 9.10% in the volatile oil， and after sand-scorching，ketones decreased from 22.27% to 6.51% in the volatile oil.Compared with Liquidambar formosana，7 kinds of terpen ingredients were produced in stir-fried products，14 kinds of terpen ingredients were produced in sand-scorched products，sand-scorched method increased 7 terpen ingredients more than stir-fried method.[Conclusion]After stir-frying and sand-scalding，the types and relative mass fractions of alkenes in the volatile oil of Liquidambar formosana are significantly increased， while the relative mass fractions of ketones is significantly decreased，more terpenes ingredients are added in the sand-scorched product than in the stir-fried product.The results provides experimental basis for the study on processing technology of different processing methods.

Key words Liquidambar formosana Hance;Processing method;HS-SPME; GC-MS;Volatile components

基金项目 贵州食品药品监督管理局项目（DBYP52524）。

作者简介 刘杰英（1995—），女，山西吕梁人，硕士研究生，研究方向：中药及民族药的基础研究与开发。通信作者，副教授，硕士，硕士生导师，从事中药、民族药产地加工、炮制工艺及机理研究。

收稿日期 2021-12-05

路路通为金缕梅科植物枫香树（Liquidambar formosana Hance）的干燥成熟果序，主产江苏、浙江、江西、福建、广东等省，具有利水除湿、祛风通络、明目通乳的功效[1]。路路通多用于炎症、关节痛、脑血管病、肿瘤等治疗[2]。路路通中存在大量的挥发油[3]，具有抑制微生物作用[2]。目前，关于路路通挥发性成分的研究主要集中在不同产地成分分析[4]、药理药效研究[2]等方面，而关于炮制对路路通中挥发性成分的影响方面的研究鲜有报道。路路通常用炮制方法为清炒法，砂烫法为贵州特色炮制方法[5-6]。该研究采用顶空-固相微萃取法（HS-SPME）和气相色谱-质谱联用法（GC-MS）对路路通生品及炮制品中的挥发性成分进行分析， 探寻清炒法和砂烫法对路路通中挥发性成分的影响。

1 材料与方法

1.1 仪器 HP 6890/5975 C气相色谱-质谱联用仪（美国安捷伦公司）;HP-5 MS弹性石英毛细管柱（60 m×0.25 mm×0.25 um）;手动固相微萃取装置（美国Supelco公司）;萃取纤维，2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS Stable Flex;电子天平（梅特勒-托利多仪器（上海）有限公司）;多功能粉碎机（永康市金穗机械制造厂）。

1.2 药材

路路通采于湖北，由贵州同济堂有限公司提供，经贵州中医药大学孙庆文教授鉴定为金缕梅科植物枫香树 （Liquidambar formosana Hance）的干燥成熟果序。炮制品为实验室自制。

1.3 试验方法

1.3.1 样品制备。

（1）路路通生品。参照2020年版《中国药典》一部路路通炮制方法，除去杂质即得。

（2）路路通清炒品（以下简称清炒品）。取原药材，除去杂质，洗净泥沙，干燥，放入烧热的锅中，用微火加热，炒脆时取出，用木板搓去刺尖，簸净[5]。

（3）路路通砂烫品（以下简称砂烫品）。取净河沙置锅内，用武火加热至滑利状态，投入路路通生品，不断翻动，炒至表面酥脆、鼓起并呈深棕色或较原色加深时，取出，筛去沙，放凉，干燥即得[6]。

1.3.2 顶空-固相微萃取条件。

取路路通生品、清炒品和砂烫品粗粉各0.3 g，置于50 mL顶空采样瓶中，采用2 cm-50/30 μm DVB/CAR/PDMS Stable Flex纤维头在55 ℃的平板加热条件下顶空萃取40 min，在温度250 ℃下热解析5 min进样。

1.3.3 气相色谱-质谱条件。

1.3.3.1 气相色谱条件。

色谱柱为HP-5MS弹性石英毛细管柱（60 m×0.25 mm×0.25 μm）;载气为高纯度He（99.999%）;载气流速1.0 mL/min;汽化室温度250 ℃;进样模式为不分流进样;升温程序：初始柱温40 ℃内保持2 min，以3 ℃/min升温至208 ℃，再以10 ℃/min升温至268 ℃，总运行时间为64 min。

1.3.3.2 质谱条件。

离子源为EI源，离子源温度230 ℃，四极杆温度150 ℃，电子能量70 eV，发射电流34.6 μA，倍增器电压1 894 V，接口溫度280 ℃，质量范围29～500 amu，溶剂延迟3.0 min。

2 结果与分析

采用HS-SPME技术萃取路路通生品、炒制品和砂烫品样品中挥发性化合物，并应用GC-MS对其进行分离分析，分别得到总离子流图（图1）。对总离子流图的各峰通过Nist 14和Wiley 275质谱数据库进行检索，确定挥发性化学成分，按照面积归一化法确定路路通生品及炮制品中化合物相对质量分数，具体结果见表1所示。从路路通生品鉴定出65种成分，占挥发性成分的74.08%;从清炒品中鉴定出71种成分，占挥发性成分的71.45%;从砂烫品中鉴定出80种成分，占挥发性成分的74.14%。生品与炮制品路路通挥发油中主要含有烯类、酮类、醇类、醛类、烃类、酯类、酸类等成分，其中烯类相对质量分数最高，在所有组分中占比达19.15%～43.62%;

生品及炮制品中相对质量分数大于1%的主要萜烯类成分有α-蒎烯、β-蒎烯和柠檬烯，且其在炮制品中的含量高于生品。其次为酮类、醇类、醛类、烃类成分，相对质量分数分别为6.51%～22.27%、10.15%～16.02%、 5.95%～10.21%、2.23%～7.28%。酯类、酸类成分相对质量分数最低，分别为0.24%～0.54%、0.03%～0.05%。

进一步分析生品、清炒品、砂烫品挥发性成分的种类和相对质量分数（图2～3）发现，与生品相比，清炒品和砂烫品中烯类成分的种类及相对质量分数显著增加，酮类成分相对质量分数显著减少。清炒品中烯类成分种类从22种增加到29种，新增7种萜烯类成分，相对质量分数从19.15%增加到40.61%;砂烫品中烯类成分种类从22种增加到36种，新增14种萜烯类成分，相对质量分数从19.15%增加到43.62%，砂烫品较清炒品多增加7种萜烯类成分。清炒品中酮类相对质量分数从22.27%减少到9.10%，砂烫品中酮类相对质量分数从22.27%减少到6.51%。

3 结论与讨论

该研究发现，炒制前后显著增加的烯类成分变化为清炒后烯类相对质量分数从19.15%增加到40.61%，砂烫后烯类相对质量分数从19.15%增加到43.62%;清炒后酮类相对质量分数从22.27%减少到9.10%，砂烫后酮类相对质量分数从22.27%减少到6.51%，路路通清炒品和砂烫品中烯类成分相对质量分数均增加，酮类成分相对质量分数均减少，可能与酮类成分高温分解为烯类成分相关[7]。清炒路路通新产生了7种烯类成分;砂烫路路通新产生了14种萜烯类成分，砂烫法较清炒法多增加7种萜烯类成分;唐文文等[8]研究发现，升高温度可使当归萜烯类成分的种类较生品显著升高，这与该研究的结果相类似。砂烫温度较清炒温度高[9]、受热更加均匀，是导致砂烫品萜烯类成分的种类较清炒品显著增加的原因，推测在路路通的炮制中，砂烫法因受热均匀，又因火力强， 温度高，质地变为酥脆， 以便于粉碎和有效成分的溶出[10]。

生品及炮制品中相对质量分数大于1%的主要萜烯类成分有α-蒎烯、β-蒎烯和柠檬烯，且其在炮制品中的含量高于生品。α-蒎烯具有镇咳、抗炎、祛痰的作用[11-12]，β-蒎烯具有抑菌、抗炎、抗癌的作用[13]，柠檬烯具有抗菌、消炎和抗肿瘤等生物功能[14]，炮制后新增成分中香桧烯具有消炎、镇痛、抑菌、驱虫等功效[15];3-蒈烯对铜绿假单胞菌有抑制作用[16]。这些结果说明炮制品比生品具有更强的抑菌、抗炎作用，陈婧[17]研究发现挥发性成分的抗炎活性随给药剂量的增加而增强，该试验为路路通及炮制品的抗炎活性研究提供研究思路。

该研究采用HS-SPME和GC-MS对路路通不同炮制品的挥发性成分进行分析，路路通生品、清炒品、砂烫品中分别鉴定出65、71和80种成分，分别占挥发性成分的74.08%、71.45%和74.14%。清炒法、砂烫法炮制后，路路通挥发油中烯类成分的种类及相对质量分数显著升高，酮类成分相对质量分数显著降低，砂烫品中新增萜烯类成分较清炒品多。研究结果为不同炮制方法的炮制工艺研究提供试验依据。

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