2 型糖尿病患者血清sICAM-1、PRL 表达与颈动脉内膜中层厚度的相关性研究

李丹，谭小红，郭菲，刘正，苏湖梅

湖南省株洲市三三一医院内分泌科，湖南株洲 412002

对于2 型糖尿病患者而言， 糖尿病大血管病变是导致患者残疾的重要因素之一，而糖尿病大血管病变的发病机理主要是因为发生动脉粥样硬化[1-2]。血管壁颈动脉内膜中层厚度（intima-media thickness，IMT）增厚可作为预测心血管事件的发生风险的指标[3]。通常检测血清可溶性细胞间粘附分子-1 （soluble intercellular adhesion molecule-1，sICAM-1） 水平反映细胞间粘附因子（ICAM-1）的表达水平[4-5]。sICAM-1 的异常表达与血糖控制程度密切相关[6]。 泌乳素（prolactin，PRL）不仅能促进乳腺增生及泌乳作用，对免疫调节功能以及糖代谢也具有重要作用[7]。有研究发现，血糖水平直接通过下丘脑TRH 的分泌最终调节PRL 的分泌，与T2DM 的发生有关[8]。 但PRL 和糖尿病相关并发症存在联系的相关研究十分少， 所以该次研究通过选取该院2018 年10 月—2019 年10 月收治的糖尿病患者112 例作为研究对象，检测T2DM患者血清sICAM-1、PRL 水平， 探讨二者与颈动脉IMT 水平的关系，以研究血清sICAM-1、PRL 对T2DM患者并发动脉粥样硬化的影响。 现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取112 例2 型糖尿病患者展开分析研究，将并发颈动脉粥样硬化的60 例患者作为CA 组，男34例，女26 例；平均年龄（60.67±6.98）岁；平均病程（6.31±3.97）年。 52 例未合并颈动脉粥样硬化的糖尿病患者作为对照组， 男28 例， 女24 例； 平均年龄（60.23±6.07）岁；平均病程（5.87±3.51）年。 两组研究对象的年龄、性别、糖尿病病程比较，差异无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。纳入标准：所有T2DM 患者符合WHO1999 年提出的糖尿病诊断及分型标准；CA 组患者均有颈动脉粥样硬化斑块 （颈动脉IMT＞1.0 mm 认为颈动脉内膜中层增厚；当患者颈动脉血管壁颈动脉内膜中层厚度超过1.2 mm，同时存在局限性隆起的情况， 则可判定为存在动脉粥样硬化斑块）； 该次研究选取研究对象均签署知情同意书。 排除标准：严重感染及乳酸性酸中毒、酮症酸中毒等糖尿病急性并发症患者；3 个月内出现应激状况，如骨折、手术、急性心脑血管事件等患者；伴发恶性肿瘤者；伴有严重肝肾功能不全者；伴有内分泌疾病，如肾上腺、甲状腺、甲状旁腺等。同时该次研究对象均通过该院医学伦理委员会批准认可。

1.2 方法

1.2.1 试剂与仪器 sICAM-1 ELISA 试剂盒 （货号：70 -EK189 -96）、PRL ELISA 试 剂 盒 （ 货 号：SCA846Hu02）、彩色超声仪（SONOS 5500）。

1.2.2 样本的采集与保存 所选研究对象在禁食10～14 h 以后， 在第2 天清晨抽取静脉空腹血5 mL， 以3 000 r/min 的速度离心处理10 min，取上清液，将其置于-80℃的冰箱中进行保存备用。

1.2.3 酶联免疫吸附法检测血清sICAM-1、PRL 水平 采用酶联免疫吸附（ELISA）法检测血清sICAM-1、PRL 水平， 试剂盒购自杭州联科生物技术股份有限公司及南京赛鸿瑞生物科技有限公司， 实验操作步骤严格按照试剂盒说明书进行。

1.2.4 相关生化指标的测定 所选研究对象在禁食10～14 h 以后，在第2 天清晨抽取静脉空腹血，对血糖、血脂等各项指标予以检测，其中血糖评价指标包括空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c），血脂指标包括三酰甘油（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）以及低密度脂蛋白胆固醇（LDLC），并测定空腹胰岛素（FINS）。 采用葡萄糖氧化酶法测定血糖水平，选用罗氏E170 电化学发光免疫分析仪测定FINS 水平，应用血红蛋白分析仪对HbA1c予以测定。血脂各项指标采用日本日立公司7180 型全自动生化仪进行测定。

1.2.5 颈动脉内膜中层厚度测定 采用彩色超声仪SONOS 5500，7.0～11.0 Hz 探头，轴分辨率为0.1 mm。受试者取仰卧位，放松，颈部侧伸45°，头部偏向检查区对侧，充分暴露其颈部，先从锁骨内侧横向检测颈部总动脉膨大近端1 cm 处IMT，此后顺着行走方向移动探头头部，分别从前、侧、后3 个方向对双侧颈动脉 （common carotid artery，CCA）、 颈内动脉（internal carotid artery，ICA） 及颈动脉分叉（carotid bifurcation，CB）予以观察，分别观察横轴和纵轴的二维图像。 与此同时，对最厚部位和距次近心1 cm 的位置2 点予以测定， 观察值选择左侧和右侧共计4个点的平均值。 冻结颈动脉窦以下1 cm 处，即没有斑块部位的图像，一共进行5 次测量，左右测量一共10 次，取平均值，对颈总动脉IMT 予以评价。

1.3 统计方法

采用SPSS 21.0 软件进行统计学分析，计量资料符合正态分布，采用（±s）表示，组间比较进行t检验，组间有差异时进一步采用SNK-q 检验；计数资料采用[n(%)]表示，组间差异比较进行χ2检验，Pearson法分析血清sICAM-1、PRL 水平与IMT 的相关性，采用多元线性回归法分析影响患者IMT 水平的因素，P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组一般资料及相关生化指标比较

CA 组与对照组患者DBP、HDL-C 差异无统计学意义 （P＞0.05）， 相较于对照组患者，CA 组患者SBP、BMI、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FPG、FINS 水平显著较高，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表1。

表1 两组患者一般资料及相关生化指标比较（±s）

表1 两组患者一般资料及相关生化指标比较（±s）

指标 对照组（n=52） CA 组（n=60） t 值 P 值BMI（kg/m2）SBP（mmHg）DBP（mmHg）TG（mmol/L）TC（mmol/L）HDL-C（mmol/L）LDL-C（mmol/L）HbA1c（%）FPG（mmol/L）FINS（μmol/L）24.38±3.84 131.41±13.17 81.94±10.94 1.93±0.92 5.17±0.87 1.04±0.22 3.58±0.94 7.28±0.76 8.23±2.07 72.47±19.20 25.92±4.01 142.62±15.85 85.77±12.39 2.49±1.36 6.25±0.91 1.01±0.23 4.07±1.19 7.73±0.94 9.48±3.09 82.95±20.58 2.067 4.034 1.722 2.512 6.393 0.702 2.392 2.758 2.475 2.772 0.041＜0.001 0.088 0.013＜0.001 0.484 0.018 0.007 0.015 0.007

2.2 两组血清sICAM-1、PRL 水平及颈动脉IMT 比较

CA 组患者血清sICAM-1、PRL 水平显著高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），与对照组相比，CA 组患者IMT 显著增厚，差异有统计学意义（P＜0.05）。 见表2。

表2 两组患者血清sICAM-1、PRL 水平及颈动脉IMT 水平比较（±s）

表2 两组患者血清sICAM-1、PRL 水平及颈动脉IMT 水平比较（±s）

组别 sICAM-1（μg/L） PRL（μg/L） IMT（mm）对照组（n=52）CA 组（n=60）t 值P 值248.86±57.28 315.70±88.91 4.431＜0.001 18.62±6.33 31.23±8.94 8.491＜0.001 0.81±0.13 1.33±0.18 17.284＜0.001

2.3 血清sICAM-1、PRL 水平及相关因素与颈动脉IMT 水平相关性分析

相关性分析结果显示， 患者IMT 与BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FINS、sICAM-1、PRL 呈正相关（P＜0.05），与DBP、HDL-C、FPG 无显著相关性（P＞0.05）。 见表3。

表3 CA 组IMT 与各因素的相关性分析

2.4 多元线性逐步回归分析

以IMT 为因变量，以BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FPG、FINS、sICAM-1、PRL 为自变量，展开多元线性逐步回归分析， 结果显示sICAM-1、PRL、LDL-C、TG、HbA1c 是T2DM 患者颈动脉IMT 的影响因素（P＜0.05）。 见表4。

表4 T2DM 合并颈动脉粥样硬化的多元线性逐步回归分析

3 讨论

T2DM 是一种以胰岛素抵抗为主要特征的内分泌代谢性疾病，近年来我国人口老龄化加速、生活方式转变，T2DM 发病率逐年上升，严重威胁人民生命健康。随着胰岛素在临床中的广泛应用，糖尿病病死率得到控制，急性并发症明显减少，但慢性并发症仍无法避免，成为了心血管事件发生的主要因素，大血管病变能够导致患者病死风险显著增加[9]。对于2 型糖尿病患者而言，并发大血管并发症的病理基础是动脉粥样硬化，动脉病变受累以内膜开始，继而因脂质积聚、血栓形成，最终导致动脉中层的蜕变和钙化，诱发出现动脉壁增厚变硬和血管腔狭窄， 进一步引发冠心病、脑梗死等严重心脑血管疾病[10]。 IMT 作为观察早期动脉粥样硬化进展的指标具有重要意义，将IMT 作为全身动脉粥样硬化病变的一个征兆性指标，通过分析IMT 及相关因素，可反映出患者病变程度及范围，积极对IMT 相关因素进行控制，可有效预防T2DM 患者大血管病变的发生发展[11]。

ICAM-1 属于跨膜单链糖蛋白之一， 具体可在多个细胞中表达，比如内皮细胞、上皮细胞及淋巴细胞等，属于重要细胞表面粘附分子之一，能够结合多种细胞表面成分，介导白细胞与内皮细胞间的粘附，在很多生理病理过程中均有参与[12-13]。 有研究发现，T2DM 患者血清sICAM-1 水平与正常人相比明显升高， 另有研究表明，T2DM 患者血清sICAM-1 水平与内皮功能损伤明显呈正相关[14]。而sICAM-1 与动脉粥样硬化的相关研究发现， 动脉粥样硬化及冠心病患者血清sICAM-1 水平高表达[15]。因此sICAM-1 与糖尿病及动脉粥样硬化具有一定相关性， 但T2DM 患者血清sICAM-1 水平与IMT 的关系研究较少。该研究结果显示，CA 组患者血清sICAM-1 水平显著高于对照组，提示血清sICAM-1 水平升高与T2DM 患者动脉粥样硬化的发生密切相关。

PRL 是一种由垂体分泌的多肽类激素， 能够参与免疫调节及糖代谢过程，糖尿病患者病程长、血糖控制不理想且伴有慢性并发症的患者易出现高PRL血症[16]。 PRL 在T2DM 患者及糖调节受损患者血清中显著降低，提示生理水平下PRL 水平与代谢异常的发生呈负相关[17]。 有动物实验表明，PRL 干预能减轻小鼠的血清游离脂肪酸水平， 高脂饮食大鼠经PRL 治疗后脂肪细胞体积缩小，证明PRL 对代谢具有保护作用[18]。 但另有研究显示，垂体泌乳素瘤患者会出现糖脂代谢紊乱， 可能与生理状态与病理状态下PRL 水平升高对代谢发挥的作用不同有关[19]。 该研究结果显示，CA 组患者血清PRL 水平显著高于对照组（P＜0.05），提示血清PRL 高表达与T2DM 患者动脉粥样硬化的发生有关，PRL 高表达与T2DM患者机体代谢异常有关， 通过参与患者血糖血脂代谢过程进而影响患者颈动脉粥样硬化的发生发展。CA 组患者BMI、SBP 显著高于对照组，TG、TC、LDLC、HbA1c、FPG、FINS 水平与对照组相比均明显升高（P＜0.05），且相关性分析结果显示，颈动脉IMT 与患者BMI、SBP、TG、TC、LDL-C、HbA1c、FINS、sICAM-1、PRL 呈正相关， 提示CA 组患者相关生化指标较高， 可能是T2DM 合并动脉粥样硬化的发生与患者机体内糖代谢、胰岛素敏感性、氧化应激等多种因素共同作用所致。 对各类因素的影响效果予以明确后发现， 血清sICAM-1、PRL 及LDL-C、TG、HbA1c 是影响T2DM 患者颈动脉IMT 的主要因素，提示上述因素是影响T2DM 患者合并动脉粥样硬化的主要独立因素。

综上所述，T2DM 伴发动脉粥样硬化患者血清sICAM-1、PRL 水平呈高表达，且与颈动脉IMT 呈正相关，临床中应对T2DM 患者血清sICAM-1、PRL 水平进行监测，可对患者血管病变进行预测，以便及早干预病变过程。该研究仍存在不足之处，如研究样本量较小，代表性不足，且对两因子分子层的作用机理并未阐明，仍需进一步扩大样本量进行更深层的研究。