OPG、RANK、RANKL及血液学指标水平变化与股骨头坏死的相关性研究*

李文茜，郭永昌，田亮玉，沈彩红，冯小艳，张大鹏，郭家巧，曹玉举

(郑州中医骨伤病医院，河南 郑州 450000)

股骨头坏死(ONFH)是一种致残率高的临床常见骨科疑难性疾病[1]。骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子(RANK)是肿瘤坏死因子-α受体超家族成员[2]。OPG、核因子κB受体活化因子配体(RANKL)、RANK信号在骨重建中具有重要作用，激活后促进破骨细胞分化，影响骨吸收[3]。RANKL与RANK结合使破骨前体细胞接收信号分子，促进破骨细胞分化。RANKL/OPG比值是评价骨健康与调节骨吸收平衡的重要杠杆指标[4]，其增加则增强骨质吸收，促进成骨细胞凋亡，使骨形成延迟。OPG能抑制破骨细胞分化和活性，延缓破骨前体细胞活化，维持骨代谢平衡[5]。据文献报道，激素和酒精能诱导骨髓间充质干细胞分化为脂肪细胞而引起血脂代谢异常[6]。本研究探讨了ONFH病因、中医证型与OPG、RANKL、RANK、血液学指标的关系，寻找一种能判断影响ONFH发生、发展和防治的方法，对早期诊断、治疗及远期疗效的评定具有重要意义。

1 资料与方法

1.1资料

1.1.1一般资料 选取2019年7-12月郑州中医骨伤病医院收治的ONFH 患者84例作为ONFH组，符合ONFH治疗指南诊断标准[7]，通过X射线、MRI等影像检查确诊。其中男67例，女17例；年龄18～70岁，平均(43.33 ± 10.37)岁；青年(18～<40岁)32例(青年组)，中年(40～<60岁)47例(中年组)，老年(≥60岁)5例(老年组)；病因：激素性14例(激素组)，酒精性44例(酒精组)，特发性21例(特发组)，创伤性5例(创伤组)；肝肾亏虚证36例(肝肾亏虚组)，湿热蕴结证48例(湿热蕴结组)。选取同期健康体检者81例作为对照组，其中男55例，女26例；平均年龄(41.19±11.96)岁。ONFH组患者性别、年龄等一般资料与对照组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。本研究经郑州中医骨伤病医院伦理委员会审批(审批号：20190702)。

表1 ONFH组和对照组一般资料比较

1.1.2中医证型标准 参照国家中医药管理局制定的1994年版《中医病证诊断疗效标准》[8]和国家药品监督管理局2002年编写的《中药新药临床研究指导原则(试行)》[9]，初步拟定中医证候诊断标准：(1)肝肾亏虚证。症见髋部隐痛，腰膝酸软，行走乏力，伴或不伴心烦失眠、口苦咽干、面色潮红，关节活动受限、腹股沟区压痛等，舌红，苔白或黄，脉细数为肾虚血瘀之象。(2)湿热蕴结证。湿热内蕴所致的症候，证见脘腹胀闷、口渴少饮、呕恶纳呆、肢体困重、便溏不爽等，舌苔黄腻。

1.1.3排除标准 (1)合并其他大关节病变者；(2)合并高血压、糖尿病、冠心病等慢性疾病者；(3)妊娠或哺乳期妇女；(4)严重肝、肾功能损伤者。

1.1.4主要试剂及设备 OPG、RANK、RANKL试剂盒(南京卡米洛生物工程有限公司，批号：H-KMLJ37638，H-KMLJ386111，H-KMLJ36021)，全自动生化分析仪(AU680，Beckman Coulter，Japan)，酶标仪(Multiskan FC，Thermo，USA)等。

1.2方法

1.2.1OPG、RANK、RANKL和血液学指标检测 血液标本取ONFH组和对照组研究对象晨间肘静脉血。迅速送至郑州中医骨伤病医院检验科分析凝血4项[包括凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(Fg)]和血脂6项[包括总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)、载脂蛋白A(ApoA)和载脂蛋白B(ApoB)]。采用酶联免疫吸附测定法检测血清OPG、RANK、RANKL等，操作均严格按仪器和试剂盒说明书进行。

1.2.2观察指标 观察各组研究对象OPG、RANK、RANKL及血液学指标，并分析OPG、RANK、RANKL及血液学指标与ONFH、中医证型的相关性。

2 结 果

2.1ONFH组和对照组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较 与对照组比较，ONFH组患者血清OPG水平明显降低，RANK、RANKL水平，以及RANKL/OPG比值均明显增加，TC、TG、LDL ApoB水平明显升高，ApoA、HDL水平均明显降低，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 ONFH组和对照组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较

2.2不同年龄ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较 84例ONFH患者中青年人占55.95%(32/81)，老年人占6.17%(5/81)。中年组患者RANKL/OPG比值明显高于老年组，青年、中年组患者LDL、ApoB水平及APTT均明显低于老年组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 不同年龄ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较

2.3不同病因ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较 酒精组患者RANK、RANKL、OPG水平明显高于创伤组，RANK水平明显高于激素组，激素组、酒精组和特发组患者APTT、PT、TT均明显高于创伤组，差异均有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 不同病因ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较

2.4不同中医证型ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较 湿热蕴结组患者RANKL水平明显高于肝肾亏虚组，差异有统计学意义(P<0.05)；肝肾亏虚证组患者血液学指标与温热蕴结组比较，差异均无统计学意义(P>0.05)。见表5。

表5 不同中医证型ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较

续表5 不同中医证型ONFH组患者OPG、RANK、RANKL和血液学指标比较

3 讨 论

ONFH是一种临床常见的骨科疾病。RANK、RANKL、OPG是控制成骨细胞和破骨细胞分化和活性的关键调节机制[10]。由于激素使用不当、长期大量饮酒和原发性因素引起股骨头内血液循环障碍，最终导致髋关节功能受损和残疾[11]。在此基础上引起血脂代谢紊乱，使体内脂肪分解，血液中游离脂肪酸增多，血管内皮受损，激活血管内凝血机制形成血栓，造成股骨头动脉灌注不足，静脉回流障碍，导致股骨头缺血、坏死[12]。有研究表明，酒精性ONFH患者LDL、ApoB增高而HLD、ApoA较低。

本研究结果显示，ONFH组患者RANK、RANKL、OPG水平及RANKL/OPG值，TC、TG、HDL、LDL、ApoA、ApoB水平与对照组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)。ONFH组的老年组患者RANKL/OPG比值最低，而LDL、ApoB、APTT较高，差异均有统计学意义(P<0.05)，表明影响了血脂和凝血功能。ONFH组的酒精组患者与创伤组比较，差异均有统计学意义(P<0.05)，表明酒精可引起RANK、RANKL、OPG改变。酒精和激素可引起凝血指标即PT、TT、APTT、Fg改变。ONFH组的湿热蕴结组患者RANKL水平明显升高，差异有统计学意义(P<0.05)。

ONFH患者血管内脂肪栓子形成和血管外脂肪组织蓄积均有可能导致血流学改变，血管损伤是由于在高凝状态下凝血障碍导致血管闭塞。ONFH患者脂质代谢异常是一个重要的危险因素，自身免疫性疾病或炎性疾病患者长期应用糖皮质激素的血脂水平与对照组存在明显差异。本研究结果显示，酒精对RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG比值影响较为显著，激素和酒精能触发血管内凝血机制，导致ONFH，在治疗过程中应关注此项指标。肝肾亏虚证和湿热蕴结症患者RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信号、血脂代谢过程影响不大，可不作为参考指标。在后期的研究中将RANK、RANKL、OPG、RANKL/OPG信号及凝血4项异常指标作为微观生物标记，为深入的临床疗效评价提供客观依据。