蒲丁颗粒解热抗炎药效作用的研究*

杨庆芳彭 彦刘 辉娄 懿

1 浙江中医药大学附属第二医院 浙江 杭州 310005

2 杭州市食品药品检验研究院 浙江 杭州 310022

3 杭州市余杭区第三人民医院 浙江 杭州 311115

4 浙江省肿瘤医院 浙江 杭州 310005

蒲丁合剂由蒲公英、紫花地丁组方，具清热解毒之功效，主治热毒所致的上呼吸道感染、急慢性扁桃体炎、咽喉炎等，是一种有多年临床应用实践的医院制剂，组方简单合理，功效确切，无明显不良反应，广受医生、患者信赖[1]。在原有合剂的基础上，前期通过全新提取、制剂工艺研究开发了颗粒剂型。本研究通过经典的解热抗炎药效评价方法来研究蒲丁颗粒剂的药效。

1 材料与方法

1.1 实验动物：健康SPF级雌性ICR小鼠，体质量20±2g，6周龄，共50只（购于杭州医学院实验动物中心，质量合格证号：20200622Abzz0118065189）。新西兰家兔40只，普通级，雄性，体重2.0±0.2kg。动物使用许可证号为：SYXK(浙)2018-0011。

1.2 试剂与仪器：蒲丁颗粒剂(本课题组自制)，二甲苯溶液（分析纯，国药集团化学试剂有限公司，批号：20201021）；吲哚美辛片（上海金不换兰考制药有限公司，批号：20200815）；脂多糖（LPS）（Sigma-Aldrich公司，批号：0000081275）。JA2003型天平（购自上海力辰邦西仪器科技有限公司）；ME204E型分析天平（购自瑞士梅特勒-托利多公司）；AWH-SA天平（购自上海英展机电企业有限公司）；T28型体温计（购自松下电器机器有限公司）。

2 方法

2.1 抗二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀药效作用的研究：蒲丁颗粒剂给药剂量：低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠每日给药剂量分别为1.34g/kg、2.68g/kg、5.36g/kg，使用纯净水充分溶解后经口灌胃给药。随机分为5组，每组10只。分别为模型组，蒲丁颗粒低、中、高剂量组，阳性药组。除模型组灌胃同容积生理盐水外，其他组小鼠每天灌胃给药，连续7天，1次/d。末次给药后1h，小鼠右耳双侧涂抹二甲苯溶液50μl，1h后将小鼠脱颈处死，沿耳廓基线剪下左右耳片，用8mm直径打孔器分别在同一位置取下圆耳片，使用分析天平称重，计算耳肿胀度与肿胀率，计算公式：肿胀值=右耳质量-左耳质量，肿胀率=（右耳质量-左耳质量）/左耳质量×100%。

2.2 抗内毒素LPS诱导家兔发热药效作用的研究：蒲丁颗粒剂给药剂量：低剂量组家兔每日给药剂量为0.33g/kg、中剂量组家兔每日给药剂量为0.67g/kg、高剂量组家兔每日给药剂量为1.34g/kg，使用纯净水充分溶解后经口灌胃给药。家兔饲养3d后，第3d测定肛温2次，将体温不正常及变化大（＞0.3℃）的家兔剔除。实验前禁食12h，可自由饮水。实验当日测量肛温3次，取平均值为其基础体温。除正常组保留7只家兔外，其余家兔均按1ml/kg经耳缘静脉注射无菌LPS（2mg/L)，正常组经耳缘静脉注射给予1ml/kg无菌氯化钠注射液。LPS注射30min后，测量家兔肛温，剔除体温升高大于0.8℃的家兔6只，将造模成功的27只家兔按照体温高低随机分为模型组、蒲丁颗粒低剂量组、中剂量组、高剂量组，除高剂量组为6只外，其余各组每组7只。各给药组经口灌服蒲丁颗粒剂，正常组与模型组给予相应体积的纯净水。于给药后0.5、1.5、2.5、3.5、5.0、8.0h检测家兔肛温，肛温与基础体温的差值即为体温变化值。

2.3 统计学方法：SPSS软件20.0中文版本。采用单因素方差分析检验方差齐性，若方差齐，则两两比较采用LSD-T法；若方差不齐，则两两比较采用Dunnett T3法；P＜0.05为差异有统计学意义。

3 结果

3.1 抗二甲苯诱导小鼠耳廓肿胀药效作用的研究：分述如下。

3.1.1 体重变化情况：详见表1。

表1 各组小鼠体重变化比较（±s，g，n=10）

给药1周体重25.60±1.28 26.80±1.74 26.34±1.12 26.12±1.39 25.80±1.23组别模型组低剂量组中剂量组高剂量组阳性药组分组体重21.11±0.36 21.09±0.42 21.05±0.46 21.06±0.42 21.10±0.45给药前体重23.12±0.89 24.06±1.37 23.72±0.90 23.50±0.94 23.38±1.09

3.1.2 肿胀值与肿胀率：二甲苯刺激后，模型组小鼠右耳出现明显肿胀，蒲丁颗粒剂中、高剂量给药组较模型组肿胀率显著下降（P＜0.05），阳性药（吲哚美辛）耳肿胀率与模型组比较呈极显著降低（P＜0.01）。见表2。

表2 各组小鼠耳肿胀值与肿胀率结果（±s，n=10）

表2 各组小鼠耳肿胀值与肿胀率结果（±s，n=10）

注：与模型组比较，*P＜0.05，**P＜0.01。

肿胀率（%）25.15±8.94 22.68±8.81 16.94±7.22*17.08±5.54*10.30±5.45**组别模型组低剂量组中剂量组高剂量组阳性药组肿胀值（10-2g）0.22±0.09 0.22±0.08 0.16±0.07 0.15±0.04*0.09±0.04**

3.2 抗内毒素LPS诱导家兔发热药效作用的研究：模型组注射LPS后0.5～8.0h体温相较于对照组显著上升（P＜0.01），蒲丁颗粒高剂量组在1.5～5.0h时，体温下降明显（P＜0.01），中剂量组在2.5～5.0h时较模型组体温降低，低剂量组在2.5h时较模型组体温有显著性降低（P＜0.05）。见表3。

表3 各组家兔体温变化情况（±s，℃）

表3 各组家兔体温变化情况（±s，℃）

注：与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与模型组比较，#P＜0.05，##P＜0.01。

组别对照组模型组低剂量组中剂量组高剂量组8.0h温差0.10±0.14 0.71±0.26**0.75±0.32 0.78±0.49 0.46±0.17例数7 7 7 7 6 0.5h温差0.10±0.04 1.00±0.19**1.08±0.16 0.98±0.47 1.02±0.20 1.5h温差0.13±0.07 1.77±0.41**1.48±0.25 1.17±0.65 0.88±0.20#2.5h温差0.17±0.12 1.72±0.32**1.36±0.28#1.10±0.55#0.81±0.17##3.5h温差0.09±0.07 2.25±0.19**1.89±0.39 1.06±0.53##0.68±0.14##5.0h温差0.18±0.10 1.62±0.30**1.67±0.27 0.91±0.50##0.57±0.17##

4 讨论

蒲丁颗粒组方中紫花地丁抗炎[2，3]、抗菌[4]、抗肿瘤[5]与抗病毒[6-8]的药效逐渐被人们所发现，其主要成分有黄酮类、香豆素类、挥发油以及生物碱类，其中黄酮类成分被认为是主要药效物质[9]。蒲丁颗粒的提取工艺中优化了紫花地丁黄酮类成分的保留，保证了蒲丁颗粒剂良好的药效作用。本实验中使用的二甲苯诱导小鼠耳肿胀与内毒素脂多糖诱导家兔发热试验都是经典的药效评价试验，实验结果表明蒲丁颗粒剂对二甲苯诱导的小鼠耳肿胀有一定抑制作用，可显著抑制小鼠耳部肿胀，具有一定的抗炎作用；同时对LPS诱导的家兔发热具有积极的抑制作用，高剂量组作用较为明显，可说明蒲丁颗粒具有一定的解热的药效作用。