龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果的相关性

李石 马兆峰

错牙合畸形患儿常表现为牙齿错位、排列不齐、咀嚼功能异常等，如不及早进行牙齿矫正治疗，可能会影响患儿的颅颌面发育，造成长面、开唇露齿等容貌畸形，影响患儿的身心健康[1]。自锁托槽矫正器是错牙合畸形患儿牙齿矫正治疗中常用的仪器，可以避免传统矫正器结扎钢丝对正畸钢丝的捆绑，具有摩擦力低、操作便捷等优势[2]。但自锁托槽矫正器治疗后仍有部分患儿因自身或外在因素导致治疗无效，造成牙齿位置移动、牙周损伤等不良后果。白介素(Interleukin，IL)-35可以抑制Th17分化，诱导Th1细胞生成，促进T细胞增殖，在炎症感染性疾病、自身免疫等多种疾病中发挥重要的调节作用[3]。IL-17A，可以诱导T细胞激活，刺激前炎性因子的释放，并能招募中性粒细胞，诱导其他细胞因子与组织降解酶，发挥强效致炎作用，常被作为牙周炎症活跃期的信号指标[4]。目前，有关龈沟液中IL-35、IL-17A水平与牙周炎的报道较多，但有关龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果关系的相关报道较少。本研究对错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果与矫正前龈沟液中IL-35、IL-17A水平的相关性进行研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料 回顾性分析2017年1月至2019年12月北京市顺义区医院口腔科采用自锁托槽矫正器治疗且治疗6个月时复诊有效的68例错牙合畸形患儿，纳入有效组，收集同期采用自锁托槽矫正器治疗且治疗6个月时复诊无效的59例错牙合畸形患儿，纳入无效组；运用倾向性评分匹配(PSM)法(1∶1，卡钳值=0.01)基于基线资料及实验室指标将有效组与无效组配对，获得组间协变量均衡样本，每组50例。本研究符合相关医学伦理规定，经患儿家长同意。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：①错牙合畸形符合《口腔科学(第8版)》[5]中诊断标准，且经X线牙片检查确诊；②Angle错颌畸形分类第Ⅱ类1分类；③首次接受牙齿矫正，可耐受自锁托槽矫正器；④牙列完整，除第三磨牙外无其他牙齿缺失；⑤牙周状况良好，且治疗前行牙周清洁；⑥临床资料完整。

1.2.2 排除标准：①唇腭裂患儿；②合并口腔黏膜疾病的患儿；③合并骨骼畸形的患儿；④有磨牙习惯或紧咬牙习惯的患儿；⑤牙齿松动、存在龋齿的患儿；⑥合并传染病的患儿；⑦矫正前1个月服用抗生素的患儿。

1.3 基线资料收集方法及内容 记录患儿的相关资料：(1)基线资料：性别(男、女)、年龄、病程。(2)实验室指标：①患儿侧貌指标：矫正前，采用牙科X射线机(泰州中联医疗科技有限公司，型号：ZLY-B)头颅定位侧位片检测患儿的上唇基角、下唇基角、全面凸角、颊唇沟角、上唇凸距、下唇凸距、颊唇沟深度。②龈沟探诊深度：采用牙周探针(北京驰洪医疗科技股份有限公司)检查龈缘至龈沟底的距离，正常≤2～3 mm。③龈沟液IL-35、IL-17A水平：清洁患儿龈沟液，收集部位龈上牙结石与牙菌斑，待患儿漱口后擦干牙面，将无菌滤纸(10 mm×2 mm)垂直插入受试牙唇面远中、近中两位点龈沟中，直至遇轻微阻力为止(如沾有唾液或血液需重取)，30 s后取出置于离心管中密封，于-70℃保存。于室内20℃解冻，用稀释缓冲液洗涤1 h，采用离心机(贝克曼库尔特，Avanti JXN-30/26型)以1 000 r/min离心15 min，离心半径8 cm，收集上清液，用酶联免疫吸附法检测龈沟液IL-35、IL-17A水平，试剂盒为上海信裕生物科技有限公司。

1.4 疗效评估 自锁托槽矫正器治疗后6个月，采用同行评估等级指数(peer assessment rating index，PAR)[6]评估错牙合畸形患儿的治疗效果。PAR指数包括前、后牙齿排列情况、中线、覆牙合、覆盖、颊侧咬合关系，PAR加权总分为各项权重分别为1、4、2、6、1的加权总分。PAR总值减少率[治疗后PAR总值减少量/治疗前PAR总值]>70%表示显著改善，减少≥30%表示得到明显改善，减少率<30%表示未改善或变差。显著改善、明显改善患儿纳入有效组，将未改善或变差患儿纳入无效组。

2 结果

2.1 2组基线资料、实验室指标比较 无效组的龈沟液IL-35、IL-17A水平高于有效组，差异有统计学意义(P<0.05)；组间其他资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 2组基线资料、实验室指标比较 n=50

2.2 龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果关系的Logistic回归分析 将错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果作为因变量(1=无效，0=有效)，将龈沟液中IL-35、IL-17A水平作为协变量，Logistic回归分析显示，矫正前龈沟液中IL-35、IL-17A水平过高与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果有关(OR>1，P<0.05)。森林图显示，与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗无效风险增加的相关因素中，龈沟液IL-17A是关联强度最大的因素(OR=1.688，95%CI为1.242～2.296，P<0.05)。见表2，图1。

图1 龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果关系的森林图

表2 龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错(牙合)畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果关系的Logistic回归分析

2.3 龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果的相关性 Kendall的tau-b相关性分析显示，矫正前龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗无效呈正相关(r>0，P<0.05)。见表3。

表3 龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果的相关性

3 讨论

错牙合畸形的病因病机较复杂，多因儿童发育时替牙障碍、口腔不良习惯、外伤或遗传等单一因素或多种因素综合所致[7]。错牙合畸形不仅会增加牙周病、龋齿等疾病的发生风险，也会影响患儿的口颌功能及面部美观，不利于患儿的身心发育。自锁托槽矫正器是治疗错牙合畸形的常用方法，但仍有部分患儿矫正效果不理想，需延长矫正时间，增加患儿痛苦。因此，寻求与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果相关的指标，对提升自锁托槽矫正器治疗效果有重要意义。

错牙合畸形所致的牙列间隙、牙列拥挤等会导致食物残渣留于间隙，诱发牙结石与牙菌斑，引发口腔微环境变化。IL-35属于IL-12超家族的一员，可由免疫细胞调控T细胞、调控B细胞等分泌产生，已被临床证实可调控炎症性、免疫性疾病[8]。IL-35可与细胞表面的IL-35二聚体受体结合，激活细胞内的信号转导及转录激活蛋白、Janus激酶，从而促进免疫细胞活化增殖，发挥抗炎作用[9]。同时IL-35可以抑制T淋巴细胞CD4+的增殖，并能抑制Th17受体的应答，发挥免疫抑制作用，避免激发过度的免疫损伤导致牙周组织病理损害[10]。有研究指出，健康龈沟液中IL-35水平较少，当龈沟液中IL-35异常升高时，说明此时牙周存在炎性反应[11]。IL-17A为常见的促炎因子，可以通过刺激嗜中性粒细胞的转换与生成，调节细胞在患者体内的平衡，发挥免疫防御的目的；同时IL-17A还会促进IL-8、肿瘤坏死因子-ɑ等炎性因子生成，促进炎性反应发生、发展，与口腔炎性疾病密切相关[12]。由此推测，错牙合畸形患儿的龈沟液中IL-35、IL-17A水平可能与自锁托槽矫正器治疗效果有关。

由于炎症多起始于龈沟液中，本研究对自锁托槽矫正器治疗有效、无效的错牙合畸形患儿龈沟液中IL-35、IL-17A水平进行检测及比较，Kendall的tau-b相关性及Logistic回归分析结果显示，错牙合畸形患儿矫正前龈沟液中IL-35、IL-17A水平过高与自锁托槽矫正器治疗无效有关。分析原因在于，IL-35是一种抑制性免疫调节因子，可以经免疫调节机制使机体的效应细胞与牙周致病菌间维持稳态，避免牙周过度损伤[13]。矫正前龈沟液中IL-35水平升高，说明错牙合畸形患儿牙周存在炎性反应[14]。而自锁托槽矫正器治疗过程中也会引发牙周组织炎性反应，促使局部分泌IL-35来抑制炎性反应加重。而炎性反应的加重可能会导致错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗过程中发生牙龈萎缩，增加治疗失败的风险。此外，牙根吸收主要由人体内各种调节因子与破牙骨质细胞共同作用所致，是正畸治疗的常见并发症，也是导致自锁托槽矫正器治疗失败的重要因素[15]。同时破牙骨质细胞会吸收牙骨质，降解有机基质，引发破骨活动，在矫正治疗时的外力压迫作用下会造成牙根吸收[16]。而IL-17A在促进炎性反应的同时，还能刺激基质金属蛋白酶生成，引发细胞外基质损伤，促进破骨细胞活化，增加骨损伤[17]。同时IL-17A也是调控破骨细胞上游因子，破坏骨保护蛋白与核因子-kB受体活化因子(Receptor activator of nuclear factor-KappaB ligand，RANK)配体的平衡，诱导骨吸收，从而增加自锁托槽矫正器治疗无效的发生风险[18]。也有研究显示，IL-17A会使破骨细胞前体细胞的RANK表达增加，增加破骨细胞前体细胞对RANK配体的敏感性，进而使RANK配体与RANK结合，增加破骨细胞数量，发生严重骨吸收症状[19]。因此，龈沟液中IL-17A水平升高会导致牙根吸收，进而导致自锁托槽矫正器治疗失败。对此，临床在对错牙合畸形患儿进行自锁托槽矫正器治疗前可通过检测龈沟液中IL-35、IL-17A水平来判断矫正治疗效果，及时调整治疗方案。

综上所述，龈沟液中IL-35、IL-17A水平与错牙合畸形患儿自锁托槽矫正器治疗效果有关，即矫正前龈沟液中IL-35、IL-17A水平过高会增加患儿自锁托槽矫正器治疗无效的风险。