阿帕替尼联合长春瑞滨对晚期乳腺癌患者 MMPs 及PTEN/HIF1α 的影响分析

齐艳姝 傅鉴乾 黄如意 吴晗

[摘要]目的本研究分析阿帕替尼聯合长春瑞滨对晚期乳腺癌患者基质金属蛋白酶（MMPs）及 PTEN/缺氧诱导因子1α（HIF1α）水平的影响。方法选取厦门市第五医院2017年1月至2018年12月收治的120例晚期乳腺癌患者作为研究对象。按照治疗方法分为对照组（n=60）和观察组（n=60），对照组接受阿帕替尼联合卡培他滨治疗，观察组接受阿帕替尼联合长春瑞滨治疗。比较两组临床疗效、治疗前后血清 MMPs、PTEN 及 HIF1α水平的变化。结果观察组有效率及疾病控制率均明显高于对照组（P <0.05）;两组治疗后血清 MMP2、MMP9、TIMP1和 TIMP2水平均明显降低（P <0.05），同时两组治疗后 PTEN 水平明显升高， HIF1α水平明显降低（P <0.05），且观察组上述指标变化较对照组更显著（P <0.05）。结论阿帕替尼联合长春瑞滨治疗晚期乳腺癌疗效良好，可有效改善患者 MMPs、HIF1α以及 PTEN 蛋白水平。

[关键词]阿帕替尼;长春瑞滨;乳腺癌患者;基质金属蛋白酶;缺氧诱导因子1α

[中图分类号] R737.9  [文献标识码] A   [文章编号]2095-0616（2022）08-0151-04

Analysis on the effects of apatinib combined with vinorelbine on MMPs and PTEN/HIF1α in patients with advanced breast cancer

QI  Yanshu    FU  Jianqian    HUANG  Ruyi    WU  Han

Department of Medical Oncology， the Fifth Hospital of Xiamen， Fujian， Xiamen 361101， China

[Abstract] Objective To analyze the effects of apatinib combined with vinorelbine on the levels of matrix metalloproteinases （MMPs） and phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten （PTEN）/hypoxia- inducible factor 1α（HIF1α） in patients with advanced breast cancer （ABC）. Methods A total of 120 patients with ABC admitted to the Fifth Hospital of Xiamen from January 2017 to December 2018 were selected as study subjects. They were divided into the control group （n=60）and the observation group （n=60） according to the treatment method. The control group was treated with apatinib combined with capecitabine， and the observation group was treated with apatinib combined with vinorelbine. The clinical efficacy， changes of serum MMPs， PTEN and HIF1α levels before and after treatment were compared between the two groups. Results The response rate and disease control rate in the observation group were significantly higher than those in the control group （P <0.05）. After treatment， the serum MMP2， MMP9， tissue inhibitor of metalloproteinase 1（TIMP1） and TIMP2 levels in both groups were significantly lower than those before treatment （P <0.05）. Meanwhile， PTEN levels were significantly higher and HIF1α protein levels were significantly lower in both groups after treatment than those before treatment （P <0.05）， and the changes of the above indexes in the observation group were more significant than those in the control group （P <0.05）. Conclusion Apatinib combined with vinorelbine is effective in improving MMPs， HIF1α and PTEN protein levels in patients with treating ABC.

[Key words] Apatinib; Vinorelbine; Patients with breast cancer; Matrix metalloproteinase; Hypoxia-inducible factor 1α

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤，且我国乳腺癌的发病率有逐年升高的趋势，早期乳腺癌可通过手术治疗，但其中仍有30%～40%患者可能会发展为晚期乳腺癌[1]。化疗是晚期乳腺癌的主要治疗手段之一，但大部分患者可能会面临多线化疗后耐药以及无进展生存逐渐缩短的问题[2]。有研究表明，阿帕替尼对晚期乳腺癌患者的生存质量及生存期改善具有良好的疗效。阿帕替尼是一种新型口服小分子抗血管生成抑制剂，在肺癌、肝癌中均表现出良好的抗肿瘤疗效[3]。但是晚期乳腺癌患者多线治疗一般多联合化疗或内分泌治疗，迄今为止，阿帕替尼联合化疗疗效的研究报道较少[4]。基于此，本研究就阿帕替尼联合长春瑞滨对晚期乳腺癌患者进行联合化疗，为临床治疗提供参考，现报道如下。

1资料与方法

1.1 一般资料

选取厦门市第五医院2017年1月至2018年12月收治的120例晚期乳腺癌患者为研究对象。纳入标准：①经病理学诊断确认为乳腺浸润癌，且发生1个以上的转移病灶;②既往治疗中接受过一线或二线治疗方案;③血常规、尿常规和心脏、肝脏、肾脏功能基本正常。排除标准：①哺乳期或妊娠期妇女;并发其他恶性肿瘤患者;②预计生存期<3个月的患者;③中途退出患者;④具有严重的代谢性疾病及血功能障碍患者;⑤严重感染患者。按照治疗方法将其分为对照组（n=60）和观察组（n=60），对照组男1例，女59例，年龄 32～56岁，平均（44.51±11.30）岁;其中骨转移11例，肝转移17例，胸膜转移9例，肺转移12例，脑转移6例，肾上腺转移5例。观察组男2例，女58例，年龄31～57岁，平均（43.32±10.14）岁;其中骨转移10例，肝转移16例，胸膜转移10例，肺转移11例，脑转移7例，肾上腺转移6例。两组患者性别、年龄、转移类型比较，差异无统计学意义（ P >0.05），具有可比性。

1.2 方法

对照组患者接受阿帕替尼联合卡培他滨治疗。阿帕替尼（江苏恒瑞医药股份有限公司，国药准字 H20140103，规格：0.25 g×10片）起始服用剂量为500 mg，口服，1次/d，并根据患者的不良反应发生情况进行延迟给药或剂量调整;口服卡培他滨（上海罗氏制药有限公司，国药准字 H20073024）2000 mg/d，分2次服用，连续治疗21 d。观察组患者接受阿帕替尼联合长春瑞滨治疗。患者阿帕替尼起始服用剂量为500 mg，口服，1次/d，并根据患者的不良反应发生情况进行延迟给药或剂量调整;同时口服长春瑞滨（江苏豪森药业股份有限公司，国药准字 H199900278）60 mg/m2，于第1、8、15、21天给药。根据患者的不良反应发生情况进行延迟给药或剂量调整。用药21 d 为一个治疗周期。

1.3 观察指标及评价标准

1.3.1 临床效果分析临床疗效判定标准[5]：临床疗效分为完全缓解（肿瘤完全消失超过1个月）、部分缓解（病灶的最大直径及其最大的垂直直径的乘积减少50%以上，无新发病灶，维持状态超1个月）、稳定（病灶的最大直径及其最大的垂直直径的乘积减少，但未达到50%）和进展（病灶未变小甚至体积增大）四类，其中有效率=（完全缓解+部分缓解）例数/总例数×100%，疾病控制率=（完全缓解+部分缓解+稳定）例数/总例数×100%。

1.3.2 血清指标测定抽取患者治疗前后空腹静脉血5 ml，1000 rpm 离心10 min 后分离上层血清，使用酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosor-bent assay， ELISA）检测治疗前后基质金属蛋白酶（MMPs）水平变化以及血清 PTEN 及 HIF1α水平。MMP2和 MMP9检测试剂盒由 Abcam 公司提供; TIMP1检测试剂盒由 CST 公司提供; TIMP2检测试剂盒由 Santa Cruz 公司提供; HIF1α检测试剂盒由武汉博士德生物工程有限公司提供; PTEN 检测试剂盒由 R&D 公司提供。所有检测操作均按照试剂盒说明书进行操作。

1.4 统计学方法

采用 SPSS 21.0统计学软件进行数据处理，计量资料用均数±标准差（ x ± s）表示，采用 t 检验，计数资料用[n （%）]表示，采用χ2檢验， P <0.05为差异有统计学意义。

2结果

2.1 两组患者临床治疗效果比较

观察组的有效率及疾病控制率均高于对照组，差异有统计学意义（P <0.05），见表1。

2.2 两组患者治疗前后基质金属蛋白酶水平比较

治疗后，两组血清 MMP2、MMP9、TIMP1、TIMP2水平均较治疗前降低（P <0.05）;且观察组低于对照组，差异有统计学意义（t=5.125， P <0.001; t=10.479， P <0.001; t=2.833， P=0.005; t=8.542， P <0.001），见表2。

2.3 两组患者治疗前后血清PTEN及HIF1α水平比较

治疗后，两组血清中 PTEN 水平明较治疗前升高， HIF1α水平较治疗前降低（P <0.05）;且观察组 PTEN 水平高于对照组，HIF1α水平低于对照组，差异有统计学意义（t=10.969， P <0.001; t=7.286， P <0.001），见表3。

3讨论

乳腺癌是发生在乳腺的一种很常见恶性肿瘤，严重危害女性健康，且晚期乳腺癌较难治愈，生存期有限[6-7]。因此乳腺癌的治疗是当前临床的重点以及难点。目前，阿帕替尼单药治疗在乳腺癌治疗中得到了初步的肯定，但迄今为止还鲜有研究报道阿帕替尼联合其他药物治疗乳腺癌的治疗效果及机制[8]。本研究选用长春瑞滨作为化疗联合药物，旨在分析阿帕替尼联合长春瑞滨治疗对晚期乳腺癌患者 MMPs 及 PTEN/HIF1α水平的影响。

基质金属蛋白酶及其抑制剂调控了细胞外基质的降解与重构过程，且参与了乳腺癌细胞的增殖、分化、转移以及凋亡的过程[9-10]。血清 MMP9、 TIMP1水平与患者年龄、病理分级、肿瘤大小、淋巴结转移有关，术后乳腺癌患者同时行化疗和放疗可降低局部复发率或远处转移率，从而提高5年生存率，且此过程与调节基质金属蛋白酶表达有关[11-12]。mfap5可抑制 MMP2、MMP9的表达，提示 mfap5可能是乳腺癌，特别是乳腺癌骨转移的潜在预后生物标志物和治疗靶点，而其主要通过调节基质金属蛋白酶表达发挥作用[13]。同时，杨梅素通过抑制小鼠模型中 MMP2/9的蛋白表达、St6Galnac5的表达以及乳腺癌的肺转移，可显著阻断 MDA- MB-231BR 细胞的侵袭，提示杨梅素是一种潜在的乳腺癌治疗候选物[14]。

PTEN 蛋白的异常也与乳腺癌的发病及治疗过程有关， mir-9和 mir-155在转移性乳腺癌外体中富集，提示外体微 RNA 可以从癌细胞转移到其他细胞，并抑制其在受体细胞中的靶基因，而此过程与 PTEN 水平密切相关[15]。Yap1通过在 PTEN- Akt 信号通路上缺失的磷酸酶和紧张素同系物促进细胞生长并抑制 BC 的细胞凋亡，提示 Yap1可能是抑制乳腺癌进展的新靶點[16]。乳腺癌中 PTEN 缺乏会导致对 PI3K-AKT 抑制剂治疗的抵抗，而 kdm4b 组蛋白脱甲基酶的基因缺失或小分子抑制激活了未折叠蛋白反应途径，并导致 PTEN 缺陷型三阴性乳腺癌（TNBCS）的优先凋亡[17]。在乳腺癌中 AKT1、PIK3CA、PTEN 和 TP53基因突变，这些突变是癌症分类和治疗的潜在临床生物标志物，乳癌癌患者中 PTEN 突变频率为4.8%，且 PTEN 体细胞突变与 ER 阳性或 PR 阳性肿瘤显著相关[18]。

血管生成被认为是肿瘤生长和转移的必要条件，低氧刺激 HIF-1α，然后激活各种促血管生成细胞因子（如血管内皮生长因子）的转录。BRCA1阳性肿瘤具有独特的分子结构和不同的肿瘤发生机制，而这种肿瘤与 HIF1α表达和血管内皮生长因子水平增加有关[19]。随着肿瘤的发展，肿瘤的体积会超过血液供应，从而导致癌细胞暴露在缺氧中，而缺氧会刺激许多致瘤信号通路。高血糖状态下乳腺癌细胞对化疗的敏感性降低，但低氧会抑制这种作用，提示这些效应可能是通过调节 HIF1α介导的[20]。本研究结果显示，观察组有效率及疾病控制率均明显高于对照组（P <0.05）;两组患者治疗后血清中基质金属蛋白酶 MMP2和 MMP9及基质金属蛋白酶抑制剂 TIMP1和 TIMP2水平均明显降低，且观察组显著低于对照组（P <0.05）;两组治疗后 PTEN 水平明显升高， HIF1α蛋白水平明显降低，且与对照组相比，观察组上述指标变化更显著。由此提示阿帕替尼联合长春瑞滨可有效控制晚期乳腺癌，改善患者 MMPs、HIF1α以及 PTEN 蛋白水平。但本研究样本量有限，具有一定的局限性，在以后的研究中将进一步增加研究纳入的样本量，并采用多中心进行研究，为临床治疗提供更多数据参考。

综上所述，阿帕替尼联合长春瑞滨治疗晚期乳腺癌疗效良好，可有效改善患者 MMPs、HIF1α以及 PTEN 蛋白水平。

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（收稿日期：2021-09-17）