登革热患者临床特征及血清细胞因子分析*

陈胜杰，黄俊远，汪 杨，周迎春，李 溪

广州中医药大学第一附属医院检验科，广东广州 510405

登革热是由登革病毒(DENV)感染引起，通过埃及伊蚊或白蚊伊蚊传播的急性传染病。人群对DENV普遍易感，登革热是多种因素作用的结果，登革热的发病机制至今尚未完全阐明，近年来免疫应答及细胞因子风暴理论受到国内外学者的广泛关注[1]。鉴于细胞因子水平与登革热疾病严重程度之间的关系目前并无确切结论，国内关于DENV感染后白细胞介素(IL)-8、IL-10、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达水平的研究较少，本研究探讨了登革热患者血清IL-8、IL-10、IL-6和TNF-α的表达水平，希望明确以上指标在诊断登革热中的临床意义。

1 资料与方法

1.1一般资料 选择2016年1月至2019年12月在本院确诊的297例登革热患者为研究组，诊断符合《登革热诊疗指南(2014年第2版)》[2]标准：患者发病前14 d曾到过登革热流行区，或其居住场所或工作场所周围1个月内曾出现过登革热患者；急性起病，突发高热；有明显的疲乏、厌食、恶心等症状；常伴有较剧烈的头痛、眼眶痛、全身肌肉痛、骨关节痛等症状，可伴面部、颈部、胸部潮红，结膜充血等，有皮疹或出血倾向；白细胞计数(WBC)和(或)血小板计数(PLT)降低，血清DENV的IgM抗体阳性；同时血清检测出DENV的NS1抗原。另选择同期体检健康者20例作为对照组，无基础疾病，且DENV特异性IgM/IgG 抗体和NS1抗原筛查均为阴性。

1.2方法 收集297例登革热患者的年龄、性别、相关临床症状、体征。比较两组研究对象常规实验室指标检查结果(如血常规、肝功能等)等资料。采集所有研究对象血清标本，-40 ℃保存，采用Biolegend公司的LEGENDplexTM试剂盒(荧光微球技术的免疫“双夹心”和流式细胞仪结合的免疫学分析方法)定量检测所有标本的细胞因子水平，包括IL-8、IL-10、IL-6和TNF-α，比较两组研究对象细胞因子的表达情况。

2 结 果

2.1登革热患者流行病学特征分析 共纳入登革热患者297例，年龄1～87 岁，平均(41.00±18.39)岁，30～<40岁登革热患者占25.59%，明显高于其他年龄段人群的构成比，差异有统计学意义(P<0.05)；不同性别登革热患者构成比比较，差异无统计学意义(P>0.05)；登革热好发于8～11月，9月和10月登革热发病人数构成比明显高于其他月份，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 登革热患者流行病学特征分析

2.2两组常规实验室指标比较 研究组WBC、PLT、血清尿素(Urea)水平明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。研究组血清肌酐(Crea)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)水平明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 两组常规实验室指标比较

2.3两组血清细胞因子表达情况比较 研究组血清细胞因子IL-6、IL-8、 IL-10和TNF-α水平均明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 两组血清细胞因子比较

3 讨 论

登革热是由DENV引起的急性蚊媒传染病，以发热、皮疹、肌肉及骨关节疼痛为主要临床表现[3-4]。登革热广泛流行于热带及亚热带国家及地区，并成为日益严重的全球性公共卫生问题[5]。部分有基础疾病患者感染登革热后可发展为重症登革热，重症登革热的主要并发症为休克、出血及严重器官损伤，严重者可危及患者生命。由于目前登革热尚无特效治疗药物，重症登革热病死率较高，早期识别登革热是降低病死率的关键[6]。因此，对登革热感染提出预警信号显得尤为迫切。

本研究对2016-2019年本院收治的登革热患者进行流行病学分析，发现登革热流行时间主要集中于每年的8～11月，9月和10月登革热患者明显增多，其中10月出现流行高峰，该发现和既往报道一致[4-6]。本研究的279例登革热患者年龄为1～87岁，平均(41.00±18.39)岁，其中30～<40岁患者占25.59%，高于其他年龄段人群，这可能与青壮年外出务工多，流动性大等因素有关。既往有报道称登革热发病高峰年龄为20～<60岁，好发于青壮年人群(73.72%～90.30%)，本研究结论与之基本一致[7]。不同性别登革热患者的构成比比较，差异无统计学意义(P>0.05)。

DENV可抑制骨髓中白细胞和血小板的生成，导致WBC、PLT降低，临床上普遍认为PLT下降幅度与病情严重程度呈正比[8]。本研究数据显示，与体检健康者比较，登革热患者WBC和PLT明显降低，PLT降低大大增加了出血风险，这也是登革热患者典型的实验室特征。同时，本研究结果显示，登革热患者肝功能指标AST、ALT水平较体检健康者明显升高，肝功能异常是登革热较常见的并发症，与文献[9]报道肝脏是DENV靶细胞的观点一致。肝功能指标AST、ALT水平的升高可能与免疫激活释放细胞因子造成免疫损伤有关。研究组Crea水平明显高于对照组，Urea水平明显低于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)，登革热患者出现肾功能不全可能诱因是严重消化道症状导致摄入不足，严重血浆渗漏导致有效血容量不足，低血压所致组织缺氧、溶血等[10]。

此外，近年来研究发现机体免疫与DENV相互作用是重症登革热发生的主要原因之一，细胞因子在其中起重要作用，有学者将细胞因子作为新的重症登革热预警指标并用于临床研究，取得了一些进展[11]。原发性病毒感染时，宿主的T细胞及B细胞免疫应答产生的辅助性T细胞(Th)1分泌IL-2、TNF-α、干扰素(INF)-γ等，能清除病毒，促进患者机体恢复；Th2分泌IL-4、IL-6、IL-10等，刺激B细胞产生抗体，辅助体液免疫应答，能促进炎性反应，导致病情恶化。Th1与Th2之间的平衡调节主要由IL-10、IFN-γ介导[12-13]。本研究发现，与体检健康者比较，登革热患者外周血血清中IL-8、IL-10、IL-6、TNF-α水平明显升高，说明DENV感染能激活机体免疫，释放多种细胞因子引起免疫损伤，提示这些细胞因子可能可作为登革热诊断的辅助诊断指标。

本研究通过分析登革热患者流行病学特征，同时分析登革热患者常规实验室检测结果和血清细胞因子的差异，为更好地诊治与管控登革热，以及进一步阐明细胞因子在登革热中的作用及其机制提供了依据。