基因检测联合彩色多普勒超声检查在甲状腺结节鉴别诊断中的应用价值分析▲

郭建红 喻红霞 王志红

1 中牟县人民医院超声科，河南省中牟县 451450；2 郑州大学第二附属医院超声科，河南省郑州市 450014

甲状腺结节(TN)是甲状腺细胞局部异常增殖后在甲状腺组织中出现的团块，多发于女性和老年人群[1]。TN可分为良性结节和恶性结节，良性结节主要在结节性甲状腺肿、甲状腺腺瘤患者中出现，而恶性结节主要在甲状腺乳头状癌、甲状腺滤泡状癌、未分化甲状腺癌等患者中出现[2]。大部分甲状腺良性结节患者无明显症状，只需定期复诊观察，无需进行甲状腺手术治疗。甲状腺乳头状癌和甲状腺滤泡状癌的恶性程度较低，手术切除治疗后患者的预后一般较好；而未分化甲状腺癌的恶性程度较高，治疗效果差，致死率较高，患者必须尽早进行手术治疗，并且术后还需进行放化疗和采用其他的手段进行治疗，所以准确鉴别TN的良恶性对TN患者采用合适的治疗方案进行治疗，从而改善预后具有十分重要的临床意义。彩色多普勒超声(CDUS)检查目前是临床鉴别TN良恶性的重要检查手段之一，具有操作简便、无创伤、检查速度快、安全性高的优点。何榕洲等[3]报道，BRAF基因突变在甲状腺癌的发病机制中发挥着重要的作用，对细针穿刺标本进行BRAF基因检测也可对TN的良恶性进行鉴别诊断。为探讨甲状腺癌基因检测联合CDUS检查在TN良恶性鉴别诊断中的临床应用价值，本研究选取我院收治的96例TN患者进行了检测分析。现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2018年11月至2020年11月我院收治的TN患者96例为研究对象。纳入标准：(1)超声检查诊断为TN患者；(2)患者自愿接受BRAF基因检测和CDUS检查；(3)患者在我院接受手术治疗。排除标准：(1)合并其他恶性肿瘤；(2)妊娠期或哺乳期女性；(3)合并精神疾病；(4)合并其他内分泌疾病；(5)合并甲状腺弥漫性病变。纳入研究的患者中男30例、女66例；年龄25～70岁，平均(46.13±5.41)岁；甲状腺结节直径4～22 mm，平均(12.75±3.08)mm。本研究经我院医学伦理委员会审查批准。

1.2 方法

1.2.1 BRAF基因检测 患者取仰卧位，局部麻醉，在超声引导下找到甲状腺结节进行细针穿刺，抽取组织标本。采用微量组织DNA提取试剂盒提取DNA，采用荧光定量PCR仪(美国应用生物系统公司，ABI7500)检测DNA的荧光信号强度，FAM信号Ct值<28判定为基因发生突变，判定甲状腺结节为恶性结节。试剂盒购自德国QIAGEN公司。

1.2.2 CDUS检查 采用彩色多普勒超声诊断仪(荷兰皇家飞利浦电子公司，IU22)，患者取仰卧位，垫高肩部和头部，充分暴露颈部，探头频率2～5 MHz，对患者甲状腺部位进行纵切面、横切面等多断面扫描，观察患者结节的大小、数目、形态、边界清晰度、内部回声情况、纵横比、囊性成分比例、内部钙化情况、后方回声情况、血流阻力指数、内部及周边血流分布情况等。诊断标准[4]：结节病灶边界轮廓清晰，形态规则，病灶及其周边无血流为良性结节；结节病灶边界模糊，形态不规则，病灶内及周边存在中量血流，或病灶及其周边均探及丰富血流为恶性结节。

1.2.3 手术病理检查 对患者手术切除的结节组织进行病理学检查，根据检查结果确定结节的良恶性。以手术病理检查结果作为诊断结节良恶性的金标准。

1.3 统计学方法 采用SPSS 21.0统计学软件进行数据分析。计数资料用%表示，比较采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。采用Kappa检验评估不同诊断结果的一致性，Kappa值≥0.70表示采用不同方法的诊断结果具有高度的一致性，0.40≤Kappa值<0.70表示具有中高度一致性，Kappa值<0.40表示具有较弱的一致性。

2 结 果

2.1 BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的效果比较 手术病理检查结果显示，96例TN患者中，恶性结节患者39例、良性结节患者57例；BRAF基因检测诊断恶性结节患者32例、良性结节患者64例；CDUS检查诊断恶性结节患者48例、良性结节患者48例；BRAF基因检测联合CDUS检查诊断恶性结节患者39例、良性结节患者57例。见表1。

表1 BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的效果比较

2.2 BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的临床应用价值分析 BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的灵敏度分别为74.36%、79.49%、94.87%，特异度分别为94.74%、70.18%、96.49%，准确率分别为86.46%、73.96%、95.83%，阳性预测值分别为90.63%、64.58%、94.87%，阴性预测值分别为84.38%、83.33%、96.49%，Kappa值分别为0.711、0.479、0.914。BRAF基因检测联合CDUS检查诊断TN良恶性的灵敏度、特异度、准确率、阳性预测值、阴性预测值及与手术病例检查诊断结果的一致性均高于单独的BRAF基因检测或CDUS检查诊断。见表2。

表2 BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的临床应用价值分析

3 讨 论

近年来，人群甲状腺结节(TN)的发病率呈上升趋势，其中大部分是良性结节，恶性结节只占较小部分，但恶性结节发病率的增加速度在内分泌系统恶性肿瘤中最快，严重影响患者的身体健康和生命安全[5-9]。目前，彩色多普勒超声(CDUS)检查是临床诊断甲状腺结节的首选方法，通过对结节的形态、边界清晰度、内部回声情况、囊性成分、内部钙化情况、后方回声情况、血流分布情况等特征可初步判断TN的良恶性[10-12]。BRAF基因是临床上已知的甲状腺癌基因，BRAF基因编码可产生BRAF蛋白，该蛋白参与了细胞的增殖、分化和程序性死亡过程，在丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中发挥着十分重要的作用；BRAF基因发生突变后可向MAPK信号通路下游传递细胞有丝分裂信号，引发细胞癌变，发生侵袭行为，因此被认为是甲状腺癌基因检测的理想标记物[13-15]。

本研究通过检测分析发现，在96例TN患者中，手术病理检查结果显示恶性结节患者39例，良性结节患者57例；BRAF基因检测、CDUS检查及两者联合检查诊断TN良恶性的灵敏度分别为74.36%、79.49%、94.87%，特异度分别为94.74%、70.18%、96.49%，准确率分别为86.46%、73.96%、95.83%，阳性预测值分别为90.63%、64.58%、94.87%，阴性预测值分别为84.38%、83.33%、96.49%，Kappa值分别为0.711、0.479、0.914。结果提示，BRAF基因检测联合CDUS检查诊断TN良恶性的效果显著优于单一BRAF基因检测或CDUS检查。研究表明，甲状腺乳头状癌和未分化甲状腺癌可发生BRAF基因突变，而甲状腺滤泡状癌中BRAF基因无突变，可能会导致根据BRAF基因检测结果诊断甲状腺滤泡状癌时会出现漏诊；CDUS检查主要是通过观察结节的形态、边界以及血流分布情况来判断TN的良恶性，因此在较小的恶性结节在未突破基底膜、未向周围组织浸润前，无法观察到结节明显的边界模糊、形态不规则、内部血流特征异常等情况，也容易导致漏诊，而联合应用这两种方法对TN的良恶性进行诊断可以弥补使用单一方法的不足，提高诊断的准确性。

综上所述，基因检测联合CDUS检查诊断甲状腺结节良恶性具有较高的临床应用价值，可为临床治疗提供重要参考。