蛋白基因产物9.5在子宫内膜样癌中的表达及其与临床病理特征的关系

曾繁晟 刘兰兰 杨晶珍

1.江西省赣州市妇幼保健院病理科，江西赣州 341000；2.江西省赣州市妇幼保健院妇科，江西赣州 341000

子宫内膜癌是女性常见的恶性肿瘤疾病，与其他女性相比，围绝经期、绝经后的女性更易患此病，平均发病年龄在59 岁， 近几年发病率逐年上升且趋于年轻化发展[1]。临床将子宫内膜癌分为Ⅰ型癌（子宫内膜样癌、黏液癌）和Ⅱ型癌（浆液性癌、透明细胞癌等），其中子宫内膜样癌的发生与雌激素持续刺激密切相关[2-3]。 患者往往存在阴道异常流血、下腹部隐痛以及贫血、发热等症状，影响患者正常生活和身心健康。为更好地控制病情发展， 需积极探索该疾病的致病基因， 有利于早期诊断和预后。 蛋白基因产物9.5（protein gene product 9.5，PGP 9.5）在多种恶性肿瘤疾病中的表达水平较高，而抑制其表达可有效抑制其病情发展[4]。 目前关于PGP 9.5 表达在子宫内膜样癌发病和发展相关的研究较少。 本研究探究PGP 9.5 在子宫内膜样癌组织中的表达水平并分析其与各临床病理学特征的关系以及作用机制，以便为子宫内膜样癌的临床治疗提供新思路。

1 资料及方法

1.1 临床资料

选取2017年1月至2020年12月赣州市妇幼保健院收治的91 例子宫内膜样癌患者以及20 例健康者作为研究对象。 患者年龄43～73 岁，平均（53.48±10.58）岁。 根据国际妇产科联盟（Federation Interna tional of Gynecology and Obstetrics，FIGO）制定的关于子宫内膜癌分期标准进行癌症分期[5]，其中Ⅰ～Ⅱ期患者82 例，Ⅲ期患者9 例，无Ⅳ期患者。 所有患者均接受全子宫（广泛全子宫）+双侧附件切除术和（或）盆腔淋巴结清扫术，晚期患者手术治疗的同时同步进行化疗和放疗。 本研究经医院医学伦理委员会审核批准。纳入标准：①年龄＞18 岁；②所有患者均经病理诊断证实；③个人信息以及临床记录完整；④患者及其家属均知情同意。 排除标准：①研究期间接受化疗或者放疗；②合并其他恶性肿瘤疾病；③合并阿尔茨海默病等精神疾病；④依从性差。

1.2 方法

试剂选择。 选择中杉金桥公司提供PGP 9.5 抗体（生产批号20200809），以平滑肌作为阴性对照，以结肠神经丛神经节细胞作为阳性对照。

免疫组化实验。将子宫内膜样癌组织标本和正常子宫内膜组织标本处理切片，厚度为4 μm，操作过程严格按照试剂盒说明书进行免疫组化染色。将染色切片放在光镜下随机观察3 个视野拍照并保存， 以阳性细胞百分率以及染色强度对免疫组化结果进行半定量分析[6]。 由工作5年以上的病理诊断医师判读。PGP 9.5 染色的阳性判读标准是胞质内出现棕黄色颗粒， 联合染色强度和阳性细胞数所占百分比进行综合分级，按染色强度评分[7]：无着色为阴性表达评0 分，淡黄色为弱阳性表达评1 分，棕黄色为中阳性表达评2分，褐棕色为强阳性表达评3 分；按阳性细胞数所占百分比评分[8]：无阳性细胞评0 分，阳性细胞数0～25%评1 分， 阳性细胞数＞25%～50%评2 分，阳性细胞数＞50%～75%评3 分，阳性细胞数＞75%评4分。两者相加得分，从0～7 分共分8 个级别。 若评分＜4 分则为高表达组，评分≥4 分则为低表达组。 评分＞1 分则鉴定为阳性（图1～2，封三）。

图1 PGP 9.5 高表达（免疫组化染色，×40）

图2 PGP 9.5 低表达（免疫组化染色，×40）

1.3 观察指标

子宫内膜癌与正常组织PGP 9.5 表达水平、临床病理特征与PGP 9.5 表达的关系。 ①记录子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的PGP 9.5 表达情况。 阳性率=阳性例数/总例数×100%。 ②根据PGP 9.5 染色后评分， 将子宫内膜癌标本分为高表达组和低表达组，观察患者年龄、肿瘤直径、组织学分级、肌层浸润、宫颈管累及、淋巴结转移、脉管累及、附件累及、FIGO分期等临床病理特征与PGP 9.5 表达水平的关系。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 统计学软件进行数据分析， 计量资料用均数±标准差（±s）表示，两组间比较采用t 检验；计数资料采用率表示，组间比较采用χ2检验；等级资料的比较采用秩和检验， 以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 子宫内膜样癌组织和正常子宫内膜组织中的PGP 9.5 表达情况

免疫组化结果显示， 正常子宫内膜组织检测出3例弱阴性，子宫内膜癌组织检测出38 例阴性，正常子宫内膜组织中PGP 9.5 的阳性表达率明显低于子宫内膜癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）（表1）。

表1 子宫内膜癌组织和正常子宫内膜组织中的PGP 9.5 表达情况

2.2 子宫内膜样癌组织PGP 9.5 不同表达水平患者的病理学特征结果比较

根据PGP 9.5 染色后评分，PGP 9.5 高表达组13例，低表达组78 例。两组患者年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），两组患者肿瘤直径、组织学分级、肌层浸润、宫颈管累及、淋巴结转移、脉管累及、附件累及、FIGO 分期比较，差异有统计学意义（P＜0.05）。

3 讨论

子宫内膜样癌是女性常见肿瘤疾病之一，年龄、绝经时间、月经初潮时间以及雌激素水平均是引起子宫内膜样癌的危险因素， 且随着人们生活水平的提高，该疾病发生率也越来越高[9-10]。 患病早期主要通过手术治疗， 但发展至中晚期时手术治疗并不理想，需辅以化疗和放疗， 但部分患者可能产生化疗耐药，导致治疗效果不理想[11]。 因此需寻求全新的治疗手段。子宫内膜癌遗传基因改变、 生物学行为病理价值、寻求生物治疗新途径以及预防该疾病转移复发的新方法，均已经成为提高子宫内膜样癌患者生存率的重要内容[12]。

PGP 9.5 广泛存在于神经内分泌细胞以及神经元中，由2450 个碱基组成，含有200 多个氨基酸蛋白基因产物。 有研究显示PGP 9.5 为抑癌基因，但在甲基化的作用下，此基因会过度表达，以至于其抑癌基因功能失效，并且会促进细胞周期蛋白泛素化，导致未分化的细胞不受限制的无序繁殖[13-14]。 研究显示，PGP 9.5 表达并不依赖于神经分化而处于独立存在状态， 其表达与肿瘤疾病病理分期以及手术联系紧密，例如肺癌、甲状腺癌、结直肠癌以及胆囊癌等[15-16]。 另外相关研究表明，宫颈癌、非小细胞性肺癌的发生以及发展与PGP 9.5 表达关系紧密[17-18]。 本研究结果显示，正常子宫内膜组织中PGP 9.5 的阳性表达率明显低于子宫内膜样癌组织，差异有统计学意义（P＜0.05）。说明由正常细胞组织到病变组织，PGP 9.5 表达水平会发生明显改变。

表2 子宫内膜癌组织PGP 9.5 不同表达水平患者的病理学特征结果比较[n（%）]

本研究结果显示，两组患者年龄比较，差异无统计学意义（P＞0.05），两组患者肿瘤直径、组织学分级、肌层浸润、宫颈管累及、淋巴结转移、脉管累及、附件累及、FIGO 分期比较，差异有统计学意义（P＜0.05），肿瘤直径越大、组织学分级越高、肌层浸润程度越深、宫颈管间质累及、淋巴结存在转移、脉管有累及、附件累及以及FIGO 分期越高，则PGP 9.5 表达水平越高。说明PGP 9.5 表达上调会影响疾病发生和发展，可对其预后情况进行预测。由于子宫内膜样癌的组织学类型复杂，相同形态内膜癌中可能伴有多种成分，例如小细胞癌、鳞癌、乳头状癌等，因此跟组织分型无关。据此猜测PGP 9.5 可能参与肿瘤的侵袭和转移，且作用较大。 因此可将其作为判断肿瘤侵袭、转移以及病情进展的重要指标[19]。 邓颖辉等[20]对宫颈癌患者进行研究发现，PGP 9.5 在此类疾病患者中的表达水平与其预后有密切联系。 说明PGP 9.5 可作为预测子宫内膜样癌发展的一种监测工具，也是判断预后情况的重要手段。PGP 9.5 在癌细胞中恶性转化、异常增殖以及穿透基底膜而发生转移的过程中其发生机制尚未明确，可进行进一步的研究。

综上所述，PGP 9.5 在子宫内膜样癌组织、 正常组织中的表达水平存在差异， 说明该蛋白基因产物在子宫内膜组织由正常转变为子宫内膜样癌的过程中具有重要调控作用。 PGP 9.5 表达水平越高，肿瘤FIGO 分期越高，患者预后生存较低，因此可将其作为子宫内膜样癌预后的有效预测指标， 为临床治疗子宫内膜样癌提供新思路、新方法，可创造一定的社会效益。