离子色谱法测定环硅酸锆钠散中总钠和游离钠

夏颖，严菲，李耕，陈民辉（江苏省食品药品监督检验研究院，南京 210019）

环硅酸锆钠散（sodium zirconium cyclosilicate powder，商品名：利倍卓）是一种口服悬浮剂，适应证为成人高钾血症，2018年在美国批准上市，2020年在我国上市，用于高钾血症患者的快速降钾以及长期维持治疗。长期应用环硅酸锆钠散可获得良好的治疗效果，但临床试验表明该药物存在水肿的不良反应，发生率约为8%～11%。该不良反应发生可能的原因是每5 g 环硅酸锆钠中约含有400 mg 钠，会引起身体钠负荷增加，导致水钠潴留，从而引起水肿。因此有必要对本品中的钠含量进行控制。

现行进口药品注册标准（No.JX20190188）未对环硅酸锆钠散中的钠含量进行控制，目前也尚无关于本品中钠的测定方法的报道。本研究首次建立环硅酸锆钠散中总钠和游离钠的含量测定方法，为产品的质量控制提供参考。

药品中钠含量测定常用的方法有原子吸收分光光度法和离子色谱法。环硅酸锆钠散的原料药为微孔环硅酸锆钠，是一种不溶于水的无机物，化学式为NaHZrSiO·2 ～3HO，钠在本品中大部分以结合态存在，因此选择合适的前处理方式非常重要。如采用原子吸收分光光度法，常见的前处理方式为湿法消解、微波消解和碱熔消解等，对于无机晶体化合物，上述操作方法均存在步骤烦琐的缺点。环硅酸锆钠散是通过氢和钠选择性地交换钾离子，从而达到降低钾离子的效果，本文采用高浓度的氯化钾溶液通过振摇的方式将样品中的钠置换成钠离子，并采用离子色谱法进行测定，样品前处理方法简单，测定结果准确可靠，适用于环硅酸锆钠散中总钠和游离钠的测定。

1 仪器与试药

1.1 仪器

Dionex ICS-6000 型离子色谱仪（美国Thermo Fisher Scientific 公司）；XS205 型电子天平（瑞士Mettler Toledo 公司）；Milli-Q 超纯水仪（Millipore公司）。

1.2 试药

钠单元素标准溶液（国家有色金属及电子材料分析测试中心，1000 μg·mL，批号：204021-6）；氯化钠纯度标准物质（中国计量科学研究院，纯度：100%，批号：17071）；环硅酸锆钠散（企业A，批号：MA3216B、MA3081B）；氯化钾为分析纯；水为超纯水。

2 方法与结果

2.1 色谱条件

色谱柱：Dionex IonPac CS12A（4 mm×250 mm）；保护柱：DionexIonPac CG12A 柱（4 mm×50 mm）；CDRS600 型抑制器（4 mm）；检测器：电导检测器；淋洗液发生器：Dionex EGC 500 MSARFIC；淋洗液：20 mmol·L甲磺酸溶液；流速：1.0 mL·min；柱温：30℃；抑制电流59 mA；分析时间：15 min；进样量：25 μL。

2.2 溶液制备

2.2.1 空白溶液 精密量取200 mmol·L氯化钾溶液1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为空白溶液。

2.2.2 对照品溶液 精密量取钠单元素标准溶液（1000 μg·mL） 1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为对照品溶液。

2.2.3 总钠含量测定的供试品溶液 取本品细粉适量（约相当于总钠40 mg），精密称定，置具塞离心管中，精密加入200 mmol·L氯化钾溶液40 mL，振摇至少2 h，滤过，精密量取续滤液1 mL，置25 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为总钠含量测定的供试品溶液（无特殊说明，下文中提到的供试品溶液均指此溶液）。

2.2.4 游离钠含量测定的供试品溶液 取本品细粉适量（约相当于总钠4 mg），精密称定，置100 mL 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，作为游离钠含量测定的供试品溶液。

2.3 方法学研究

2.3.1 专属性试验 精密量取水及“2.2” 项下的空白溶液、对照品溶液和供试品溶液各25 μL 注入离子色谱仪，记录色谱图。典型色谱图见图1，其中钠离子和钾离子分离度为5.8。空白溶液均不干扰测定。

图1 空白溶液（A）、对照品溶液（B）和供试品溶液（C）的HPLC 色谱图Fig 1 HPLC chromatograms of blank solution（A），reference solution（B）and sample solution（C）

2.3.2 线性试验 分别精密量取钠单元素标准溶液（1000 μg·mL），用水稀释制得钠离子质量浓度约为8、20、32、40、48、60 和80 μg·mL的系列标准溶液，进样分析，记录色谱图。以钠离子的质量浓度（

C

）为横坐标，峰面积（

A

）为纵坐标，进行线性回归拟合，回归方程为

A

＝0.2640

C

－0.0225（

r

＝1.000），钠离子在8 ～80 μg·mL与峰面积线性关系良好。2.3.3 回收试验 取本品细粉适量（约相当于总钠16 mg、20 mg 和24 mg），精密称定，置具塞离心管中，分别精密加入氯化钠纯度标准物质（约相当于钠16 mg、20 mg 和24 mg），混匀，按“2.2.3”项下方法制成钠离子含量分别约为32、40 和48 μg·mL的溶液，作为回收试验溶液。每个浓度平行制备3 份，进样分析，记录色谱图，计算加样回收率，结果在低、中、高水平的平均回收率（

n

＝3）分别为99.73%、100.30%和98.60%，

RSD

分别为0.80%、1.2%和0.40%，表明该方法准确度高。2.3.4 精密度和重复性试验 精密量取“2.2.2”项下的对照品溶液，连续进样6 次，结果钠离子峰面积

RSD

为0.040%；表明方法进样精密度良好。精密量取“2.2”项下的对照品溶液和供试品溶液（平行制备6 份），进样分析，结果6 份样品中总钠的含量的

RSD

（

n

＝6）为0.60%，方法重复性良好。由不同的分析人员在不同日期重复上述操作，计算得12 份样品中总钠的含量

RSD

（

n

＝12）为0.60%，表明该方法具有良好的中间精密度。2.3.5 稳定性试验 取“2.2”项下的对照品溶液和供试品溶液，分别于室温放置0、2、4、8、12和24 h 注入离子色谱仪，进样分析，对照品和供试品溶液各时间点峰面积的

RSD

均为0.20%，表明在室温条件下24 h 内稳定。2.3.6 灵敏度试验 取上述线性对照品溶液逐步稀释，按“2.1”项下方法测定，以

S/N

≈10 为定量限，

S/N

≈3 为检测限，结果钠离子的定量限为0.04 μg·mL，检测限为0.01 μg·mL。

2.3.7 样品测定 取本品适量，按“2.2”项下方法分别制备用于总钠测定和游离钠测定的供试品溶液，进样分析，结果见表1。

表1 不同批次样品中钠含量测定结果
Tab 1 Determination of sodium in samples

批次规格/g总钠含量/%游离钠含量/%MA3216B107.90.1 MA3081B 57.80.1

3 讨论

3.1 钾离子浓度的选择

环硅酸锆钠是一种结构独特的高选择性钾离子结合剂，作用机制为用氢和钠交换钾，本试验采用高浓度的钾离子置换出样品中的钠，并对钠的含量进行测定，因此，前处理过程中保证钠能被钾完全置换出来是关键。试验中，比较了不同浓度的钾离子溶液（浓度分别为5、10、50、100、150 和200 mmol·L）振摇处理3 h后钠的测定结果，结果表明，随着钾离子浓度升高，所测得钠含量升高，其中150 mmol·L和200 mmol·L钾离子浓度测得的钠含量无显著差别，故认为钠已经置换完全，最终选择200 mmol·L钾离子作为提取溶液。

3.2 振摇时间的确定

采用200 mmol·L钾离子振摇提取，考察不同提取时间（0.5、1、1.5、2、2.5、3 h）对测定结果的影响，发现提取1.5 h 后，测得钠含量无显著增加，说明在1.5 h 时已经基本置换完全。最终确定振摇提取至少2 h，在缩短分析时间的基础上保证钠完全被置换出来。

4 小结

本文首次建立了环硅酸锆钠散中总钠和游离钠的含量测定方法，并对其进行了方法学验证。该方法专属、灵敏、准确度高、重复性好，可为环硅酸锆钠散的质量控制提供参考和依据。由于本品的钠含量与不良反应相关，因此建议生产厂家对钠含量情况进行考察，制订合适的限度，并在稳定性考察过程中关注游离态钠的变化情况。