血清基质金属蛋白酶抑制因子-1、半乳糖凝集素-3水平与未足月胎膜早破患者发生绒毛膜羊膜炎的关系

袁路路，赵晓丹

（河南科技大学第一附属医院新区医院 产科，河南 洛阳 471000）

未足月胎膜早破（preterm premature rupture of membranes，PPROM）指孕龄小于37周胎膜自发性破裂，目前尚无确切病因，可能与胎膜受力不均、创伤、感染等因素有关［1］。PPROM患者常并发绒毛膜羊膜炎，通常早期无明显临床症状，容易诱发宫腔感染、新生儿败血症等多种并发症，威胁母婴生命安全。因此，积极探寻可早期检测PPROM患者并发绒毛膜羊膜炎的相关指标至关重要。相关研究证明，绒毛膜羊膜炎的发生与炎症和蛋白水解相关，氧化应激和细胞衰老的过早激活可促进炎症和蛋白水解进展［2］。基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase，MMP）是一族蛋白水解酶，可参与细胞外基质的代谢，其活性可被特异性抑制因子所抑制，其中基质金属蛋白酶抑制因子-1（tissue inhibitor ofmetalloproteinase-1，TIMP-1）分布最广泛［3］。半乳糖凝集素（galectin，Gal）是一种多功能蛋白，在细胞氧化应激过程中发挥作用，Gal-3主要位于子宫内膜间质、胎膜和滋养细胞中，在氧化还原反应、细胞衰老和免疫调节方面具有一定作用［4］。因此，推测血清TIMP-1、Gal-3水平可能对PPROM患者绒毛膜羊膜炎的发生存在一定影响。鉴于此，本研究重点观察血清TIMP-1、Gal-3在PPROM患者中的表达，并分析二者水平对PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生的影响，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本研究经河南科技大学第一附属医院新区医院医学伦理委员会批准［2019审（101）号］，选取2019年9月至2021年5月河南科技大学第一附属医院新区医院接收的92例PPROM患者作为研究对象，患者已签署知情同意书。（1）纳入标准：①PPROM符合第9版《妇产科学》［5］中诊断标准，且经体征、影像学检查确诊；②单胎孕妇，且在河南科技大学第一附属医院新区医院建卡产检，并完成分娩；③孕周在28～36周；④近期内未使用过抗生素或保胎药物治疗。（2）排除标准：①入院时已发生绒毛膜羊膜炎；②胎膜破裂时间大于12 h；③合并精神障碍，依从性较差；④伴有严重感染；⑤合并高血压、糖尿病等其他产科合并症；⑥先天性子宫发育畸形。92例PPROM患者年龄21～36（28.21±2.28）岁；破膜孕周28～36（33.12±1.23）周；初产妇57例，经产妇35例。

1.2 研究方法

1.2.1 绒毛膜羊膜炎判定标准及分组方法 PPROM患者在分娩完成胎盘娩出后30 min内，采集胎膜破口距离2 cm以内的两块胎膜组织，大小约为2 cm×2 cm，采用9 g·L-1氯化钠液将羊水黏液和血迹冲洗干净，以体积分数为10%的甲醛快速固定，石蜡包埋，苏木精-伊红染色，送至病理科检查。由病理科2名工作5 a以上的主任医生进行双盲法阅片，依据《妇产科诊断病理学》［6］诊断标准判定：（1）无羊膜与绒毛模板上白细胞可见弥散性聚集；（2）白细胞浸润呈极性分布，各高倍镜视野中有5～10个中性粒细胞。满足上述情况则为绒毛膜羊膜炎，将其纳入发生组，反之纳入未发生组。

1.2.2 血清TIMP-1、Gal-3水平测定方法 患者确诊时，采集清晨空腹外周肘静脉血5 mL，以3 000 r·min-1速率离心10 min，离心半径10 cm，取血清待检。采用酶联免疫吸附测定法检测血清TIMP-1、Gal-3水平，试剂盒分别选自北京四正柏酶联生物科技有限公司和武汉贝茵莱生物科技有限公司。所有操作均严格按照试剂盒说明进行。

1.2.3 基线资料采集分析方法 设计患者基线资料填写表，询问并记录研究所需资料，内容主要包括年龄、破膜孕周、分娩前体质量指数、受教育程度（初中及以下，高中及以上）、是否初产妇（是、否）、是否剖宫产（是、否）以及确诊时血清TIMP-1、Gal-3水平等。1.3 统计学方法 采用SPSS 25.0统计软件进行数据处理。全部计量资料均经Shapiro-Wilk正态性检验，符合正态分布以均数±标准差（±s）表示，组间比较采用独立样本t检验；计数资料以频数和百分数（%）表示，采用χ2检验；采用logistic回归分析检验血清TIMP-1、Gal-3水平对PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生的影响。检验水准α＝0.05。

2 结果

2.1 PPROM 患者绒毛膜羊膜炎发生情况 92例PPROM患者分娩后经病理检查，发生绒毛膜羊膜炎48例，占52.17%（48/92）；未发生毛膜羊膜炎44例，占47.83%（44/92）。

2.2 发生组与未发生组患者基线资料及血清TIMP-1、Gal-3水平 发生组确诊时血清TIMP-1水平低于未发生组，确诊时血清Gal-3水平高于未发生组，差异有统计学意义（P＜0.05）；组间年龄、破膜孕周、分娩前体质量指数、受教育程度、是否初产妇、是否剖宫产等其他资料比较，差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 发生组与未发生组患者基线资料比较

2.3 血清TIMP-1、Gal-3水平对PPROM 患者绒毛膜羊膜炎发生影响的logistic回归分析 将表1中经初步比较差异有统计学意义的变量（确诊时血清TIMP-1、Gal-3水平）作为自变量（均为连续变量），将PPROM 患者绒毛膜羊膜炎发生情况当作因变量（发生＝1，未发生＝0）。经logistic回归分析，结果显示，血清TIMP-1水平过表达是PPROM患者并发绒毛膜羊膜炎的保护因素（OR＜1，P＜0.05），血清Gal-3水平过表达是PPROM患者并发绒毛膜羊膜炎的危险因素（OR＞1，P＜0.05）。见表2。

表2 血清TIMP-1、Gal-3水平对PPROM患者并发绒毛膜羊膜炎影响的logistic回归分析

3 讨论

PPROM是妇产科常见的并发症，不仅可增加早产的发生风险，还提高了宫内感染、产褥感染发生率，严重影响母婴健康［7］。目前PPROM发生的感染通常是亚临床感染，主要是中性粒细胞浸润进入胎儿组织或胎儿-母体界面，属于子宫内炎症疾病。PPROM合并绒毛膜羊膜炎早期常无明显症状，不易被发现，随着病情发展，易出现胎心过快、体温升高等症状，需及时终止妊娠［8］。相关研究表明，绒毛膜羊膜炎在PPROM患者中发生率达50%以上［9］。本研究结果显示，92例PPROM患者分娩后经病理检查，绒毛膜羊膜炎发生率为52.17%，符合上述研究结果［9］，说明PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生率较高。因此，积极寻找早期诊断PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生的有效检测指标，对选择有效的方式终止妊娠至关重要。

血清TIMP-1是机体中重要的酶，可在细胞外基质的逆转和重塑以及疾病损害中发挥重要作用，主要通过与MMP-9的结合，抑制细胞外基质降解。在机体出现某些炎症病理情况时，血清TIMP-1和MMP-9的系统平衡失调，导致血清TIMP-1水平异常降低［10］。血清Gal-3是一种嵌合型Gal，可参与细胞中其他蛋白质的相互作用调控多种信号途径，从而诱导细胞凋亡、炎症因子分泌［11］。绒毛膜羊膜炎多由细菌感染引起，与炎症反应和蛋白水解密切相关。因此，推测血清TIMP-1、Gal-3水平可能对PPROM患者发生绒毛膜羊膜炎有一定影响。

本研究结果显示，发生组确诊时血清TIMP-1水平低于未发生组，确诊时血清Gal-3水平高于未发生组，且logistic回归分析结果显示，血清TIMP-1低表达、Gal-3过表达是PPROM患者发生绒毛膜羊膜炎的风险因素，说明血清TIMP-1、Gal-3水平对PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生具有一定影响，且血清TIMP-1低表达、Gal-3过表达可增加PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生风险。原因在于，MMP-9是MMP家族中重要成员，主要由炎症细胞、滋养层细胞、内皮细胞等生成并分泌，在细胞外基质代谢中起到关键作用，而TIMP-1可以和MMP-9结合，从而抑制MMP-9的作用。当产妇出现炎症反应时，炎症细胞因子水平会异常升高，导致溶酶体酶大量的分泌，促使胎膜组织变性坏死，从而增加感染绒毛膜羊膜炎的发生风险。同时宫颈组织细胞外基质具有丰富的胶原，当并发绒毛膜羊膜炎后，可活化中性粒细胞，破坏TIMP-1和MMP-9的动态平衡，促使MMP-9的异常升高，抑制TIMP-1的合成和分泌，从而降低血清TIMP-1水平［12］。血清Gal-3在多种炎症细胞中有着广泛表达，大部分情况下表现为促炎细胞因子，对免疫细胞浸润、激活和清除起到重要调节作用。血清Gal-3水平能够抑制细胞色素-C的释放和线粒体损伤，以抑制炎症部位的细胞凋亡，同时可刺激巨噬细胞活化并向M1型转化，促进肿瘤坏死因子α、C反应蛋白、白细胞介素-6等多种炎症因子的表达，促进炎症因子分泌、炎症细胞浸润和氧化应激。Gal还可与细菌表面的多糖相互作用，起到抑制病原体进入的功效，说明Gal-3水平异常升高可能作为免疫调节分子参与绒毛膜羊膜炎的发生［13］。因此，血清TIMP-1、Gal-3水平可作为PPROM患者发生绒毛膜羊膜炎的标志物，检测二者水平可辅助评估绒毛膜羊膜炎发生风险。但本研究仍存在不足之处，如纳入的样本量较小，血清TIMP-1、Gal-3水平可能受其他因素的影响，未来可进一步研究，通过增加样本量，联合检测肿瘤坏死因子-α、C反应蛋白等炎症因子水平，以提高诊断PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生的准确性。

综上所述，血清TIMP-1、Gal-3水平对PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生具有一定影响，且血清TIMP-1水平低表达、Gal-3水平过表达提示PPROM患者绒毛膜羊膜炎发生风险较高。