金佳培
河南省洛阳市第一人民医院检验科,河南洛阳 471000
在深部真菌感染致病菌中,曲霉菌较为常见,具有极强的致病性[1]。肺部的曲霉菌感染最严重的是引起肺呼吸功能严重受损从而导致呼吸衰竭,比如侵袭性肺曲霉菌病[2]。本研究比较了肺曲霉菌感染诊断中常规真菌检测和血清半乳甘露聚糖试验的应用价值。
1.1一般资料 回顾性选取2020年2月至2021年2月本院拟诊肺曲霉菌感染的患者124例。纳入标准:(1)具有完整的病历资料;(2)具有良好的依从性。排除标准:(1)合并恶性肿瘤;(2)有免疫系统疾病。患者年龄19~87岁,平均(52.35±8.42)岁;男29例(23.39%),女95例(76.67%)。
1.2方法
1.2.1试剂 购买天津喜诺生物医药有限公司生产的曲霉菌半乳甘露聚糖检测试剂盒。
1.2.2痰或肺灌洗液标本涂片与真菌培养 用无菌容器留取培养标本,清晨将肺泡灌洗液无菌留取,或让患者将深部痰液咳出,及时送检。在35 ℃ CO2培养箱中放置巧克力平板、哥伦比亚血平板,培养2 d。曲霉菌在显微镜下菌丝排列成珊瑚状或放射状,具有均匀的粗细,呈45°分枝、有隔,有反复分枝现象,一些慢性损害呈扭曲状,缺乏规则性[3]。
1.2.3血清半乳甘露聚糖试验 采集患者3 mL空腹静脉血,采用酶联免疫吸附试验进行检测,试验过程依据试剂盒说明书进行操作。检测每批次标本过程中,为了使试验的有效性得到有效保证,对血清检测进行质控。试验结果用血清学系数(I)表示,即标本吸光度(A)值/cut-off质控A值。I>0.5为试验阳性,I≤0.5为试验阴性[4]。
1.3观察指标 (1)直接涂片镜检结果与临床诊断结果对比;(2)常规真菌检测结果与临床诊断结果对比;(3)血清半乳甘露聚糖试验结果与临床诊断结果对比;(4)直接涂片镜检、常规真菌检测与血清半乳甘露聚糖试验结果比较。
2.1直接涂片镜检结果与临床诊断结果对比 124例患者中,临床诊断阳性51例,阴性73例;直接涂片镜检阳性4例,阴性120例。以临床诊断结果为金标准,直接涂片镜检的灵敏度为7.84%(4/51),特异度为100.00%(73/73),准确度为62.10%(77/124),阳性预测值为100.00%(4/4),阴性预测值为60.83%(73/120)。见表1。
2.2常规真菌检测结果与临床诊断结果对比 124例患者中,常规真菌检测阳性17例,阴性107例。以临床诊断结果为金标准,常规真菌检测的灵敏度为31.37%(16/51),特异度为98.63%(72/73),准确度为70.97%(88/124),阳性预测值为94.12%(16/17),阴性预测值为67.29%(72/107)。见表2。
表1 直接涂片镜检结果与临床诊断结果对比(n)
表2 常规真菌检测结果与临床诊断结果对比(n)
2.3血清半乳甘露聚糖试验结果与临床诊断结果对比 124例患者中,血清半乳甘露聚糖试验阳性51例,阴性73例。以临床诊断结果为金标准,血清半乳甘露聚糖试验的灵敏度为80.39%(41/51),特异度为86.30%(63/73),准确度为83.87%(104/124),阳性预测值为80.39%(41/51),阴性预测值为86.30%(63/73)。见表3。
表3 血清半乳甘露聚糖试验结果与临床诊断结果对比(n)
2.4直接涂片镜检、常规真菌检测与血清半乳甘露聚糖试验结果比较 血清半乳甘露聚糖试验的灵敏度、准确度、阴性预测值均高于直接涂片镜检、常规真菌检测(P<0.05),特异度、阳性预测值均低于直接涂片镜检、常规真菌检测(P<0.05)。常规真菌检测的灵敏度高于直接涂片镜检(P<0.05),特异度、准确度、阳性预测值、阴性预测值在两者之间的差异均无统计学意义(P>0.05)。
肺曲霉菌病是由曲霉属感染或吸入曲霉属抗原所引起的一组急性或慢性肺部疾病,大多数是在原有肺部疾病的基础上,因长期使用抗菌药物和激素或人体免疫力低下而引起的感染。临床上包括过敏性曲霉病、寄生型曲霉病、侵袭性肺曲霉病,主要表现为咳嗽、咳痰、发热、咯血。有些患者对曲霉菌的成分发生过敏反应后可能出现类似于哮喘样的症状,如喘息、气急、呼吸困难,除了抗曲霉菌治疗之外还要使用抗哮喘类的药物才能使疾病得到改善。所以肺曲霉菌感染有很多种形式,采取的治疗手段措施可能也会有所不同。发热、胸痛、咳嗽等是肺曲霉菌病的主要临床表现,缺乏特异性,通常需要侵入性采集组织标本才能确诊,而患者病情又使临床上很难顺利实施侵入性操作[5-8]。近年来随着大剂量免疫抑制剂、化疗药物、广谱抗菌药物的使用,以及造血干细胞移植和艾滋病患者的增多,肺曲霉菌病的发病率迅速上升。为了提升临床治疗曲霉菌感染的成功率、降低患者病死率,目前国内外均制订了相应的诊治指南,但是一般情况下无菌腔液标本或活组织标本培养阳性、组织病理学证据仍然是临床的确诊依据[9-12]。
真菌检查分为浅表真菌检查和深部真菌检查。浅表真菌检查主要是刮取怀疑真菌感染的皮损表面的皮屑或者脱落细胞,用氢氧化钾溶解,然后通过乙醇灯加热固定之后,通过高倍显微镜来观察是否有荧光显色,如果通过显微镜能够看到明显的荧光反射,能够看到菌丝和孢子,考虑就是真菌阳性。而深部真菌检查主要是检测血液,可以做真菌培养,通过特殊的培养皿静置48 h之后,再通过特殊的检测方式判断是否阳性。在做真菌培养的过程中,还可以直接做药敏试验,判断已经感染的真菌对哪一种抗真菌药更敏感,然后选择该种药物进行治疗,效果才是最好的。近年来,真菌抗原检测等非侵袭性实验室技术受到了临床重视,已经成为诊断真菌感染的标准[13]。相关医学研究表明,在肺曲霉菌感染的诊断中,血清半乳甘露聚糖试验联合涂片镜检与真菌培养能够为临床提供有效依据[14-15]。本研究结果表明,血清半乳甘露聚糖试验的灵敏度、准确度、阴性预测值均高于直接涂片镜检、常规真菌检测(P<0.05),特异度、阳性预测值均低于直接涂片镜检、常规真菌检测(P<0.05);常规真菌检测的灵敏度高于直接涂片镜检(P<0.05),充分证实了血清半乳甘露聚糖试验的优越性。
综上所述,肺曲霉菌感染诊断中血清半乳甘露聚糖试验的应用价值较高,值得推广。